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核蛋白提取试剂盒

价格：￥ 50T/700元；100T/1100元

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/15 11:06:33

产品摘要：核蛋白提取试剂盒适用于从各种原代或传代动物细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。

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详细内容

核蛋白提取试剂盒

产品货号：XY9-3102

产品规格及价格：50T/700元；100T/1100元

产品简介：

核蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代动物细胞和各种动物实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞核膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。
如果下游应用是金属螯和层析等不能含EDTA试剂的实验，可以联系更换不含EDTA的蛋白酶抑制剂混合物。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒提取的蛋白含高浓度盐，不可直接用于2D电泳，需要透析、脱盐后在用于2D电泳。如下游实验需要直接用于2D电泳，请使用其他货号的试剂盒。

产品应用：

WB,IP,co-IP,ELISA,EMSA 等

产品特点：

1.使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理。

2.提取过程简单方便，将蛋白提取的时间缩短至 30 分钟-1 小时。

3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5.总蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白、核蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。
6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

使用注意事项：

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

Western 实验内参可以选用 Lamin B、TBP、Histon H3。

细胞蛋白提取

1. 提取液制备：

每 500 µl 冷的蛋白提取液 A 加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 1 µl 磷酸酶抑制剂。

每 200 µl 冷的蛋白提取液 B 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 1 µl 磷酸酶抑制剂，混匀后置冰上备用。

2. 取 5-10×106 个细胞，在 4℃，500×g 力条件下离心 5 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 20 µl 体积细胞沉淀（约 20 mg，2×106 个细胞）中加入 200-300 µl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡混匀或吹打混匀，置 2-8℃条件振荡 10-30 分钟。

5. 然后在 4℃，2000×g 条件下离心 5 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

7. 在沉淀中加入 80-200 µl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。

8. 置 2-8℃条件振荡 30-40 分钟。

9. 在 4℃，12000×g 条件下离心 10 分钟。

10. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

11. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

组织蛋白提取

1. 提取液制备：

每 500 µl 冷的蛋白提取液 A 加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 1 µl 磷酸酶抑制剂。

每 200 µl 冷的蛋白提取液 B 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物和 1 µl 磷酸酶抑制剂，混匀后置冰上备用。

2. 取适量组织样本用手术剪刀尽可能剪碎，每 20 mg 样本中加入 200-300 µl 冷的提取液 A，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

3. 匀浆液置 2-8℃条件振荡 10-30 分钟。

4. 然后在 4℃，2000×g 力条件下离心 5 分钟。

5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

6. 在沉淀中加入 80-200 µl 冷的蛋白提取液 B，高速涡旋振荡 15 秒。

7. 置 2-8℃条件振荡 30-40 分钟，至无明显沉淀。

8. 在 4℃，12000×g 条件下离心 10 分钟。

9. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

常见问题分析：

1.核蛋白浓度低？

核蛋白丰度较低，需要足够细胞数量提取，在条件允许的情况下，尽可能加大细胞量。

注意用蛋白提取液 B 处理时没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 B 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀，至无明显沉淀。

如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则需要采用超声处理。

2.用什么方法定量蛋白？

建议用 BCA 法。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

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