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核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒

价格：￥ 50T/1600元；100T/2700元

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/15 11:06:33

产品摘要：核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。

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详细内容

核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒

产品货号：XY9-3112

产品规格及价格：50T/1600元；100T/2700元

产品简介：

核蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种原代或传代细胞和各种实体组织，如脑、脊髓、神经结或纤维、脂肪、肝脏、消化道、肾脏、心脏、肌肉、血管、结缔组织等哺乳动物组织中提取核蛋白和胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的核蛋白和胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞核膜组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。

产品应用：

WB,IP 等

产品特点：

1.使用方便，从细胞，组织中提取蛋白不需经过研磨、反复冻融、超声破碎等前处理3.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。

4.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。

5.蛋白提取液含多种有效成分，可以充分释放胞浆蛋白和膜蛋白，又可结合释出的蛋白防止沉淀。

6.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂 AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Pepstatin A、Bestatin、E-64，每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。

使用方法：

使用注意事项：

旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。

蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。

实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。

如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。

可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

细胞蛋白提取

1. 提取液准备：

每 200 µl 蛋白提取液 A 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

每 200 µl 蛋白提取液 B 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取 5-10×106 个细胞，在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细。

3. 用冷 PBS 洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

4. 每 20 µl 体积细胞沉淀（约 20 mg，2×106 个细胞）中加入 200-300 µl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置 2-8℃条件振荡 15-30 分钟。

5. 然后在 4℃，1000×g 条件下离心 10 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

8. 在沉淀中加入 200 µl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 5 秒。

9. 置 2-8℃条件振荡 30 分钟，至沉淀明显减少甚至无明显沉淀。

10. 在 4℃，14000×g 条件下离心 10 分钟。

11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

组织蛋白提取

1. 提取液制备：

每 200 µl 蛋白提取液 A 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

每 200 µl 蛋白提取液 B 中加入 1 µl 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。

2. 取适量组织样本，用手术剪刀尽可能剪碎，加冷 PBS，用组织匀浆机/匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体，冰上静置 5 分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

3. 在 4℃，500×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

4. 每 20 mg 组织（20-30 µl 细胞沉淀体积）中加入 200 µl 冷的提取液 A，高速涡旋振荡 15 秒或吹打混匀，置2-8℃条件振荡 20-30 分钟。

5. 然后在 4℃，1000×g 条件下离心 10 分钟。

6. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。

7. 沉淀用 PBS 洗涤一次，在 4℃，1000×g 条件下离心 5 分钟，弃上清。

8. 在沉淀中加入 100-200 µl 冷的提取液 B，高速涡旋振荡 5 秒。

9. 置 2-8℃条件振荡 30-40 分钟，至沉淀明显减少甚至无明显沉淀。

10. 在 4℃，12000×g 条件下离心 10 分钟。

11. 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。

12. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

常见问题分析：

1.细胞裂解速度慢？

为了充分保证提取得到的蛋白的活性，提取液采用独特的保护蛋白的配方，裂解能力温和，下游应用范围广。适当延长裂解时间。

2.蛋白浓度低？

处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 和试剂 B的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

3.用什么方法定量蛋白？

建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法，因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用 Bradford 法定量。

仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。

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