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核糖体蛋白提取试剂盒（低速离心法）

价格：￥ 50T/900元；100T/1600元

品牌名称：$brandModel.Title型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/15 11:06:33

产品摘要：核糖体蛋白提取试剂盒（低速离心法）只需要达到20000×g以内的离心力即可提取核糖体蛋白，一般的常规台式离心机均可以满足使用要求。

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核糖体蛋白提取试剂盒（低速离心法）

产品货号：XY9-314223

产品规格及价格：50T/900元；100T/1600元

产品简介：

核糖体蛋白提取试剂盒（低速离心法）只需要达到20000×g以内的离心力即可提取核糖体蛋白，一般的常规台式离心机均可以满足使用要求。
核糖体蛋白提取试剂盒可用于各种动物细胞和实体软、硬组织样本的核糖体的提取。
用于提需要细菌、植物、叶绿体核糖体蛋白提取试剂盒可以联系选择其他货号的产品。
传统的核糖体蛋白提取方法需要采用较高的离心力或者采用密度梯度离心，对实验室离心机设备要求较高，对实验的操作细致程度要求较高。如果实验室没有能达到100000×g以上的离心力的设备，则没法进行提取。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，需要除盐后再用于2D电泳。如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用其他货号的蛋白提取试剂盒。也可以将样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理。
本试剂盒不需要使用高速离心，但是提取得到的蛋白样品没有高速离心法的蛋白样品纯度高，会混有胞浆蛋白杂质，对蛋白样品纯度要求高的下游应用，可以选择的其他核糖体蛋白提取试剂盒
可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒，例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒；含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒；专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

使用方法：

1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3.实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。使用Dounce匀浆器匀浆，如果没有Dounce匀浆器，也可用普通玻璃匀浆器匀浆，但是核糖体蛋白回收率会下降。
细胞核糖体蛋白提取：
1.提取液准备：每100 µl冷的核糖体蛋白提取液C中加入1 µl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
【注】： 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
以下步骤中使用的蛋白提取液为此步配制好的含蛋白酶抑制剂的提取液。
2.取1-2×107个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞；
3.用冷PBS洗涤两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4.加入500 µl冷的试剂A，置冰上10分钟。
5.用Dounce匀浆器匀浆充分匀浆，然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
【注】：先用Dounce匀浆器的松型槌初步匀浆10-20次，再用紧型槌匀浆20-30次。每上下一个来回为一次。
6.将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
7.将上清在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
8.将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
9.将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
10.在上清中加入125 µl试剂B，充分混匀。
【注】： 试剂B使用前请充分混匀。
11.置2-8℃冰箱静置过夜。
。【注】：静置保存时间不少于10小时。
12.在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
13.小心移除上清，收集沉淀。
【注】：尽可能吸干上清。 吸取时小心，防止吸掉沉淀。
14.沉淀中加入30-50 µl核糖体蛋白提取液C，充分混匀。在4℃条件下振荡10-20分钟。
【注】：使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
15.在4℃，12000×g条件下离心10分钟。
16.将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核糖体蛋白。
17.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】： 建议用BCA法进行蛋白定量。。
蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。
组织核糖体蛋白提取：
1.取50-100 mg新鲜动物组织样本，用PBS洗涤干净。
2.用剪刀尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3.加入500 µl冷的试剂A，置冰上10分钟。
4.用Dounce匀浆器充分匀浆30-40下，至无明显固体团块。然后在4℃，1000×g力条件下离心5分钟。
【注】：先用Dounce匀浆器的松型槌初步匀浆10-20次，再用紧型槌匀浆20-30次。
每上下一个来回为一次。
5.将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
6.在4℃，11000×g力条件下离心10分钟。
7.将上清吸入另一预冷的干净离心管。弃沉淀。
8.将上清在4℃，12000-16000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，留上清。
9.在上清中加入125 µl试剂B，充分混匀。
【注】： 试剂B使用前请充分混匀。10.置2-8℃冰箱静置过夜。
【注】： 静置保存时间不少于10小时。
11.在4℃条件下，10000×g离心20-45分钟。
12.小心移除上清，收集沉淀。
【注】：尽可能吸干上清。 吸取时小心，防止吸掉沉淀。
13.沉淀中加入30-50 µl核糖体蛋白提取液C，充分混匀。在4℃条件下振荡10-20分钟。
【注】：使用振荡器/摇床的较低转速，提取液能轻微晃动即可。
没有振荡条件也可以不振荡，稍微延长提取液的处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
14.在4℃，12000×g条件下离心10分钟。
15.将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核糖体蛋白。16.将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
【注】：建议用BCA法进行蛋白定量。
蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染

常见问题分析：

1.蛋白浓度低？核糖体蛋白含量较低，在条件允许的情况下，尽可能加大细胞样品的上样量。处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当增加匀浆次数，延长试剂 C 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。

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