当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > 蛋白相关制品 > 上海信裕生物科技有限公司 > 产品展示 > 蛋白质生物学 > 液体样本蛋白提取试剂盒(离心管法)
液体样本蛋白提取试剂盒(离心管法)
检测试剂盒
- 人检测试剂盒/Human
- 大鼠检测试剂盒/Rat
- 猪检测试剂盒/Porcine
- 小鼠检测试剂盒/Mouse
- 豚鼠检测试剂盒/Guinea pig
- 兔检测试剂盒/Rabbit
- 山羊检测试剂盒/Goat
- 牛检测试剂盒/Bovine
- 马检测试剂盒/Equine
- 鸡检测试剂盒/Chicken
- 猴检测试剂盒/Monkey
- 其它检测试剂盒/General
- 犬检测试剂盒/Dog
- 人Elisa试剂盒
- 小鼠Elisa试剂盒
- 大鼠Elisa试剂盒
- 其他Elisa试剂盒
- 兔Elisa试剂盒
- 猪Elisa试剂盒
- 鸡Elisa试剂盒
- 猴Elisa试剂盒
- 马Elisa试剂盒
- 牛Elisa试剂盒
- 生化试剂盒
抗体
蛋白/多肽/抗原
原代细胞
细胞系
分子生物学
细胞分析
- 细胞凋亡
- 细胞周期
- 细胞增殖
- 细胞活性
- 细胞毒性
- ROS检测
- 细胞代谢
- 细胞自噬
- 细胞成像
- 细胞粘附
- 细胞pH检测
- 细胞耗氧与酸化
- 细胞示踪与追踪
- 离子指示剂及膜电位
- 吞噬、内吞、受体内化
- 细胞抑制剂
生化试剂
细胞培养基
细胞
免疫学试剂
细胞生物学
一类医疗器械产品
实验耗材
蛋白质生物学
外泌体研究
微生物
企业档案
会员类型:旗舰版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网旗舰版会员:11年
最后认证时间:
注册号: 【已认证】
法人代表: 【已认证】
参观次数:16003216
手机网站:http://wap.app17.com/c115321/
旗舰版网址:http://www.xybio-sh.com
详细内容
液体样本蛋白提取试剂盒(离心管法)
产品货号:XY9-31334
产品规格及价格:50T/900元;100T/1600元
产品简介:
液体样品蛋白提取试剂盒适用于从细胞培养上清、细菌、酵母培养上清、脑脊液、尿液等液体样品中提取蛋白。提取过程简单方便,可在1小时内完成。
提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳等下游蛋白研究。
可以提供各种蛋白质提取、裂解、酶活测定、细胞器分离、免疫组织化学、蛋白表达、蛋白标记等蛋白质相关试剂盒产品。
可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。
可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。
可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。
产品应用:
WB,IP 等

使用方法:
1.在操作过程中,一个离心套管可用于收集滤出液,而另一个用于回收提取后的样本。
2.用过的蛋白提取管要保持过滤膜湿润,不能干掉。
清洗蛋白提取管:1.
用缓冲液或纯水进行预清洗。也可先用 0.1 M NaOH 清洗,再用缓冲液或纯水进行二次清洗。
2.离心管中的过滤膜一旦润湿后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用,则让液体保留在滤膜上,直到
使用。
样品处理:
1. 在 500 µl 待提取液体样品中加入 5 µl 蛋白吸附抑制剂。充分混匀。
【注】:吸附抑制剂按照 1/100 加到待提取液体样品。
2. 每 500 µl 液体样本中加入 100 µl 蛋白提取液,充分混匀后,在 4℃条件下振荡 5-10 分钟。
【注】:使用振荡器/摇床的较低转速,提取液能轻微晃动即可。
没有振荡条件也可以不振荡,置 2-8℃静置,稍微延长提取液的处理时间,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀即可。
3. 在 4℃,15000×g 条件下离心 15 分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,待后续蛋白提取管离心过滤。
蛋白提取管使用方法:
使用注意事项:
不同的液体样本的离心速度不同,有的需要长时间离心,有的则很快就好。和液体中蛋白样品纯度,所用 buffer 类型,蛋白的浓度有关系。离心时要先短些时间,观察一下速度; 如果需要多次重复使用,离心速度不要太高; 样品体积大就分批离心,尽可能不要离心时间太长。 样品里的杂质如果可能尽量在离心前去除一些。 吸附损失取决于溶质浓度、疏水性、与过滤提取管表面接触的温度和时间、样本成分及 pH。为了最大限度降低损失,离心后请立即回收提取后的样本。 如果样本的起始浓度很高,离心过程中会出现沉淀,这也可能带来样本损失。
样本有可能穿过滤膜,务必将每次的滤过液一直保留到提取样品分析测试完成。
样品中蛋白最低起始浓度为 25ug/ml。 加蛋白液或 Buffer 到蛋白提取管时,可以用蓝枪头;
但从蛋白管底吸取提取好的目的蛋白时,必须用黄枪头;用枪头伸入蛋白管中时,必须防止碰到滤膜,以免戳破滤膜。
操作步骤:
1. 将内管插入所提供的一个微量离心管中。
2. 向内管中加入不超过 500 µl 的以上步骤中处理过的液体样本,并盖上盖子。
3. 将盖好盖子的蛋白提取管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中央;用一个类似的离心
管平衡。
4. 以 2000-10000 x g 离心约 10-30 分钟。
【注】:
务必将滤过液一直保留到提取的样品分析测试完成。
影响流速的因素包括样本浓度、起始体积、溶质的化学性质、相对离心力、离心转子的角度以及温度。500ul 样本的典型离心时间大约是 10 至 30 分钟。尽管大部分样本在离心开始后的前 5 至 10 分钟发
过滤,但在离心 10 至 30 分钟后才能达到最低的剩余体积(15-20ul)。
根据不同的起始蛋白量决定离心后的剩余体积。起始蛋白浓度极低的液体样品(如培养上清等)可以离心至剩余 20ul,起始蛋白浓度高的液体样品(如腹水脑脊液等)可以离心至剩余 100-200ul。
5. 离心结束后将整个蛋白提取管从离心机中取出,取出内管。
6. 为了回收过滤后的液体,将内管倒过来插在另一个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开
的盖子朝着转子的中央;用一个类似的离心管进行平衡。以 1,000 x g 离心 2 分钟,使剩余后的样本从蛋白提取内管转移到收集管中。滤液可以保存在收集管中。
【注】: 要达到理想的回收效果,请尽早进行倒置离心。 也可不倒置离心,直接用移液器直接吸出内管中的样品。
7. 将蛋白提取管清洗后用于提取其它液体蛋白样品。
【注】: 一般每个蛋白提取管重复使用 10 次。
清洗和保存:
1. 使用后用水冲洗干净;
2. 内管加入超纯水 500 µl,5000g 离心 5 分钟;
3. 净内管中的水,加入 500 µl 0.1M NaOH,5000g 离心 20 分钟;
4. 用 0.1 M NaOH 浸泡 24 小时;
5. 用水冲洗干净;
6. 用无菌水浸泡 2-8℃保存。
7. 外管用自来水洗净后,用超纯水冲洗干净,晾干。
【注】:
1 个月不用的话,直接用 100 mM 的 NaOH 保存!更长时间的话加 0.02%的叠氮钠。
再次使用前,用纯水充分冲洗干净,然后在用样品缓冲液平衡。
常见问题分析:
1.膜会因为离心时间过长而变干么?
不会,因为蛋白管有死体积,总会有溶液残留在滤管中。死体积大约 10-20ul。
可以重复使用蛋白管么?
可以重复使用。如果使用、清洗、保存得当,可以反复使用多次。但是多次重复使用后过滤膜有破损风险,注意使用过程中尽量避免尖锐物品戳到膜。离心力不要过大。
蛋白在提取时出现了沉淀,如何改进?
蛋白如果离心过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。建议蛋白提取后的最终浓度不超过20 mg/ml。
对于对离心速度敏感而容易沉淀的蛋白,建议的改进方法是:
1)离心力降低 30%-50%
2)在离心过程中取出蛋白管,用枪头反复吹吸几次
提取后发现提取液中没有目的蛋白,可能的原因有哪些?
蛋白管的蛋白最低起始浓度为 25ug/ml。请确保的样本的起始浓度大于这个浓度。
如果问题仍然出现,请不要丢弃样本滤过液以便用于分析可能的原因:
1)如果目的样本在滤过液中,那么请排查:
a)使用的离心力是否是在限定范围内?如果使用的是 rpm,请换算成相应的 g 离心力,具体换算方法请垂询。
b)离心机最近是否有校准过?2)如果目的样本也不在滤过液中,那么:
a)蛋白样本起始浓度是否大于 25ug/mL?
b)用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?
c)目的蛋白是不是沉淀了?
有时候用蛋白提取离心管连水都离不下来,可能是什么原因?
如果出现这种情况,可能时过滤膜的孔被堵住。请先用 0.1M NaOH 清洗再离心。用缓冲液或纯水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用,如暂时不用,请保持润湿状态,避免重新干燥。
2.说明书中推荐在室温下进行离心,考虑到蛋白的稳定性,是否可以在 4℃进行离心可以,但是低温会增加蛋白样品的粘性,导致流速减慢,建议可将离心时间延长。
3.是否可以用于高压灭菌?不可以,蛋白管都是采用热封设计,不可以用高压高温灭菌。
4.没有液流流出,为什么? 可能是溶液比较粘稠或浓度太高;
5.蛋白管可以去除去垢剂吗?去垢剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(CriticalMicelle Concentration, CMC)时,去垢剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果。小于 CMC 值时可以去除
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
热门标签:液体样本蛋白提取试剂盒,离心管法,液体样本蛋白提取试剂盒(离心管法)
















