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革兰氏阳性菌膜蛋白提取试剂盒
价格：￥ 50T/900元；100T/1600元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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详细内容
革兰氏阳性菌膜蛋白提取试剂盒
产品货号：XY9-31518
产品规格及价格：50T/900元；100T/1600元
产品简介：
革兰氏阳性菌膜蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒。革兰氏阳性菌膜蛋白提取试剂盒可以从各种革兰氏阳性菌菌体中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份，试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分，不可直接用于2D电泳，如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳，请使用其他货号的试剂盒。也可以将样品除盐后再用于2D电泳，用脱盐柱脱盐处理。
产品特点：
1. 使用方便，从革兰氏阳性菌中提取膜蛋白不需经过超声破碎等前处理。
2. 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3. 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4. 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5. 本品不含 EDTA，可以用于金属螯合层析等下游应用。
使用方法：
1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
5. 蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
6. 提取液 A 在使用前须一直置于 2-8℃条件，否则下游膜蛋白提取时会导致不容易分层。
7. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
1. 提取液制备：
每 500 µl 冷的提取液 A 中加入 5 µl 提取液 B 和 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
2. 离心收集革兰氏阳性菌菌体，用 PBS 洗菌体 2 次。
按每 100-150 mg 湿重菌体样本加入 500 µl 冷的提取液 A（大约菌体和提取液体积比 1:3-1:5，完全淹没菌体即可），吹打混匀，在 2-8℃振荡 1-2 小时，至菌体裂解完全，液体澄清，菌体沉淀减少。
3. 将菌液在 2-8℃低温下 12000×g 离心 5 分钟，取上清。
4. 在 37℃水浴/气浴 10 分钟。
5. 在 37℃， 1000×g 离心 3 分钟。
6. 此时液体分为 2 层，小心移除上层溶液，留管底部下层，大约 50µl 液体。
7. 用 50-200 µl 冷的膜蛋白溶解液溶解该溶液，即得革兰氏阳性菌膜蛋白样品。
8. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析：
1. 蛋白浓度低？
膜蛋白丰度较低，需要尽可能加大细胞上样量。处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2. 用什么方法定量蛋白？
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法，因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用 Bradford 法定量。
3. 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。
4. 膜蛋白电泳没有条带？
膜蛋白样品通常浓度较低，电泳前一定要进行蛋白定量，以保证电泳是蛋白上样量足够。
蛋白样品中含有去垢剂，注意蛋白定量方法的选择，防止不合适的方法导致的蛋白浓度数据异常偏高，从而导致依据错误的蛋白浓度数据上样导致上样量不够。
膜蛋白提取好后，用溶解液充分溶解后，可以超声处理一下，再进行蛋白定量。
蛋白加 Loading buffer 后可以不用煮沸，采用 50℃保温 30 分钟。
蛋白 Loading buffer 中 SDS 终浓度含量可以提高至 3%-10%。
有些样品的膜蛋白含量太低，可以使用丙酮沉淀膜蛋白，再使膜蛋白溶解于上样缓冲液中，一般可以跑出清晰的蛋白条带。
电泳时采用低电压低电流电泳。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：革兰氏阳性菌膜,蛋白提取试剂盒,革兰氏阳性菌膜蛋白提取试剂盒
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