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酵母质膜蛋白提取试剂盒
价格：￥ 50T/900元；100T/1600元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:06:33
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详细内容
酵母质膜蛋白提取试剂盒
产品货号：XY9-31252
产品规格及价格：50T/900元；100T/1600元
产品简介：
跨膜蛋白承担各种生物功能，膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。
酵母膜蛋白提取试剂盒是一种高效的高产膜蛋白提取试剂盒，酵母膜蛋白提取试剂盒可以从各种酵母样本中提取膜蛋白，可用于纯化蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。提取过程简单方便。
本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解酵母总膜组份，包括质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
产品应用：
WB,IP 等
产品特点：
1.使用方便。
2.含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
使用方法：
使用注意事项：
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，
注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
1. 提取液制备：
每 500ul 酵母蛋白提取液 B 中加入 2ul 蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2. 取适量酵母培养物，在 4℃，2000×g 条件下离心 5-10 分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集酵母沉淀。
3. 用冷 PBS 洗涤酵母两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4. 每 100-200ul 体积酵母沉淀物中加入 500ul 酵母质膜蛋白提取液 A，混匀后，在室温或 37℃条件下轻轻振荡30 分钟-1 小时。
5. 在 4℃，2000g 条件下离心 5-10 分钟，移除上清，收集沉淀。
6. 在沉淀物中加入 500ul 冷的（4℃）酵母质膜蛋白提取液 B，混匀。
7. 在 2-8℃条件下轻轻振荡 15-45 分钟。
8. 将提取液在 4℃条件下 12000×g 离心 5 分钟，取上清。
9. 将上清在 37℃水浴 10 分钟。
10. 在 37 1000×g ℃ 离心 3 分钟。
11. 此时溶液分为 2 层，小心移除上层部分，留下管底部下层部分大约 30-50ul 液体。
12. 用 50-100ul 膜蛋白溶解液 C 溶解该下层溶液，即得酵母质膜蛋白样品。
13. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析：
1.蛋白浓度低？
酵母质膜蛋白丰度较低，需要加大细胞上样量。处理部分酵母细胞样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 和 B 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白？
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法，因为试剂 BC 中含有干扰 Bradford 法的组份，导致定量不准。
3.提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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