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支原体蛋白提取试剂盒
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详细内容
支原体蛋白提取试剂盒
产品货号:XY9-31234
产品规格及价格:50T/700元;100T/1100元
产品简介:
支原体蛋白提取试剂盒适用于从各种支原体中提取总蛋白。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。
该试剂盒提取的蛋白具有天然活性,提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫共沉淀、质谱等各种下游蛋白研究。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
产品应用:
WB,IP 等
产品特点:
1.使用方便,将蛋白提取的时间缩短至 1 小时。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含 6 种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
5.本品不含EDTA,可以用于金属螯合层析等下游应用。

使用方法:
使用注意事项:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,
注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
1. 提取液准备:
每 500 µl 提取液 A 中加入 2 µl 蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2. 收集好的支原体样本用 PBS 洗涤后,加入 300-500 µl 冷的提取液 A,充分混匀。
3. 置 2-8℃条件下振荡 20-30 分钟。至支原体裂解完全,沉淀体积明显减少。
4. 将蛋白提取液在 2-8℃低温下 12000×g 离心 5-10 分钟,取上清。
5. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即得支原体蛋白样品。
6. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析:
1.蛋白浓度低?
支原体蛋白丰度比较低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大样本的上样量以提高蛋白浓度。
处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法,因为试剂 A 中含有干扰 Bradford 法的组份,导致定不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。
3.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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