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植物种子蛋白提取试剂盒
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详细内容
植物种子蛋白提取试剂盒
产品货号:XY9-31242
产品规格及价格:50T/1100元;100T/1800元
产品简介:
植物种子蛋白提取试剂盒提供全套试剂,适用于从各种高淀粉含量的植物种子样品中提取可溶性蛋白。如水稻、荞麦、玉米、小麦等。提取过程简单方便。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
产品应用:
WB,IP 等

使用方法:
使用注意事项:
旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
蛋白酶抑制剂在 2-8℃时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或 37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂,
注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
1. 将适量待提取种子样本剥皮,用 PBS 或纯水洗涤 3 次。
2. 将样本置研钵液氮充分研磨。
3. 加入 1 ml 蛋白提取液 A 充分混匀,移入离心管。
4. 将离心管置振荡器轻轻振荡 30 分钟-60 分钟。
5. 在 4℃,15000×g 离心 20 分钟。
6. 收集上清,弃沉淀。
7. 在 900 µl 上清液体样本中加入 100 µl 试剂 B,充分混匀。
8. 冰浴或 4℃冰箱静置 30 分钟以上。
9. 在 4℃,15000×g 以上条件下离心 15 分钟。
10. 小心移除上层清液丢弃,留沉淀。
11. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
12. 加入 200 µl 试剂 C 到离心管中。
13. 在 4℃,15000×g 以上条件下离心 15 分钟。弃上清,留沉淀。
14. 将离心管倒置在吸水纸上干燥离心管。
15. 用 40 µl - 100 µl 试剂 D 溶解蛋白沉淀,充分混匀。
16. 在 4℃,10000×g 条件下离心 10 分钟。
17. 收集上清用于下游实验。
常见问题分析:
1.蛋白浓度低?
部分植物种子蛋白丰度极低,在条件允许的情况下,需要尽可能加大种子样本的上样量。
处理部分样本时可能没有裂解完全,导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂 A 的处理时间即可。在持续振荡的条件下处理,没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
2.用什么方法定量蛋白?
建议用 BCA 法。不适合用 Bradford 法,因为试剂 E 中含有干扰 Bradford 法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用 Bradford 法定量。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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