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细菌总蛋白提取试剂盒
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详细内容
细菌总蛋白提取试剂盒
产品货号:XY9-319816
产品规格及价格:50T/750元;100T/1100元
产品简介:
细菌总蛋白提取试剂盒可以从各种菌体中提取总蛋白,包括革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,可用于纯化蛋白的粗品制备及总蛋白制备。提取过程简单方便。该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒的所有组份均不含去垢剂成分,得到的蛋白样品的成分对NI柱纯化、分子筛、离子交换、亲和纯化等下游应用没有明显影响。
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
本试剂盒中不含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用兼容。
本试剂盒提取的蛋白样本含有高浓度的盐成分,不可直接用于2D电泳,如下游实验需要直接用于等电聚焦、双向电泳,请使用其他货号的试剂盒。也可以将样品除盐后再用于2D电泳,用脱盐柱脱盐处理。

使用方法:
1. 裂解液的准备:
根据所需要提取的样本量,每500 ul裂解液中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物和2ul磷酸酶抑制剂混合物和5ul蛋白稳定液,充分混匀后置冰上备用。
2. 在4℃, 10000×g条件下将菌液离心5 min,弃上清,尽量吸干剩余液体,收集菌体。
3. 用PBS洗菌体2次。若为冷冻菌体直接进行下面操作步骤即可。
4. 按每50-100 mg湿重菌体样本加入500 ul裂解液,吹打混匀,2-8℃振荡20-30分钟。
5. 在150 w-300 w,10 s超声/10 s间隔条件下冰浴超声至菌液变清。
6. 在4℃, 12000×g条件下将菌液离心5分钟,将上清移入冷的干净离心管。
7. 即得到细菌总蛋白样品。
8. 将总蛋白样品定量后分装置于-80℃冰箱或直接用于下游实验。
使用注意事项
1. 预实验很重要。必须要做预实验,在正式实验之前取少量样本优化实验条件,并像正式样本一样认真进行,看实验结果是否可行,实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性,不同样本的实验条件通常差异较大,同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同,为了避免浪费正式样本和试剂,一定要提前预实验优化实验条件。
2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
3. 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
4. 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
5. 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
6. 本试剂盒中提取液和蛋白酶抑制剂中均不含EDTA,根据需要可自行加入。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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