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Tris-EDTA抗原修复液(10×,pH8.0)
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详细内容
Tris-EDTA抗原修复液(10×,pH8.0)
产品货号:XY9-23517
产品规格及价格:100ML/250元
产品简介:
以下是关于 Tris-EDTA 抗原修复液(10×,pH8.0)的详细介绍:
成分与性质
主要成分:Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种常用的稳定、无毒、不吸湿的缓冲液,能维持溶液的 pH 值稳定;EDTA(乙二胺四乙酸)是一种金属螯合剂,可与阳离子金属离子结合。
pH 值:该修复液的 pH 值被调整为 8.0,处于弱碱性范围,在这个 pH 条件下,既能有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,又能较好地保持抗原的活性和稳定性。
浓度:标注为 10×,表示其为浓缩液,使用时需要用去离子水或双蒸水稀释至 1× 工作液后再进行抗原修复操作。

作用原理
去除蛋白交联:在组织固定过程中,醛类试剂会使蛋白质之间形成交联,导致抗原表位被封闭。Tris-EDTA 抗原修复液可以破坏这些交联结构,使抗原表位重新暴露出来。
修正抗原肽链扭曲:热的作用会使部分抗原的肽链发生扭曲,而 Tris-EDTA 缓冲液在加热条件下,有助于使扭曲的肽链恢复到正确的构象,从而使抗原能够被抗体识别。
适用范围:主要用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后的抗原修复。可以提高石蜡切片的免疫染色效果,对冰冻切片的染色效果也能在不同程度上有所提升。
使用方法
石蜡切片
脱蜡至水:将石蜡切片依次放入二甲苯中浸泡 3 次,每次 3-5 分钟,以去除石蜡;然后用无水乙醇脱水 2 次,每次 3-5 分钟,再依次经过 95%、90%、80%、70% 的乙醇各浸泡 3-5 分钟,用蒸馏水冲洗 2 次,每次 3-5 分钟。
抗原修复:用去离子水或双蒸水将 Tris-EDTA 抗原修复液(10×)稀释至 1× 工作液。将切片浸泡在 1× 抗原修复液中,95℃或沸水加热约 10-30 分钟,修复液使用前需预热到 95-100℃。若使用微波炉加热,要避免暴沸和过多水分蒸发,加热完成后在 20-30 分钟内冷却至室温。
洗涤:用免疫染色洗涤液洗涤切片 1-2 次,每次 3-5 分钟,随后进行封闭等后续免疫染色步骤。
冰冻切片:先用去离子水或双蒸水将 Tris-EDTA 抗原修复液(10×)稀释至 1× 工作液。用免疫染色洗涤液洗涤切片 5 分钟后,将切片浸泡在 1× 抗原修复液中,95℃或沸水加热约 10-30 分钟,抗原修复液(1×)使用前同样需预热至 95-100℃,加热后在 20-30 分钟内冷却至室温,用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 分钟,再进行封闭等后续免疫染色步骤。
注意事项
浸泡在抗原修复液(1×)中的最佳加热时间,需要根据不同的样品和目的蛋白自行摸索确定。
操作过程中为了安全和健康,应穿实验服并戴一次性手套。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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