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RTS BL21(DE3) Chaprone感受态细胞
价格：￥ 10T/800
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:45:18
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详细内容
RTS BL21(DE3) Chaprone感受态细胞
描述：BL21(DE3) Chaprone 感受态细胞中含有分子伴侣蛋白质粒，其表达产物可协助重组蛋白正确折叠形成可溶活性蛋白。分子伴侣蛋白质粒为氯霉素抗性（chloramphenicol，Cmr）的表达受控于四环素（tetR）操纵子，因此该感受态不适用于氯霉素抗性表达质粒的转化。
本品使用 独有的化学感受态专利技术制备，其室温可保存 3 天、-20°C 可保存 2 年（推荐保存温度）、-80°C 可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰，可常规冰袋运输（推荐运输温度）。该感受态细胞为热激感受态细胞，转用于蛋白表达（不可用于克隆和载体构建），经 42°C热激 1min 可获得105～106cfu/µg 效价，可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。
组分
储存：RTS 系列感受态为干粉形式，均可室温保存 3 天，长
期保存-20°C（2 年）。经 Nano E.coli Transfection Reagent
溶解后的感受态必须分装后，并于-60°C 以下保存。溶解后
的感受态细胞避免反复冻融，在-60°C 以下可保存 6 个月。
操作方法
1. 从-20°C 冰箱中取出 Nano E.coli Transfection Reagent融化，放置于冰上。取 300 µl Nano E.coli TransfectionReagent 加入到一支冻干感受态细胞中，并分装到 10 支 1.5ml EP 管中（每支 30 µl），于-60°C 以下保存（或立即使用）。
2. 将 10～100 ng 质粒 DNA（不可使用连接产物、不可使用氯霉素筛选标记质粒）加入到分装的感受态细胞中，轻弹EP 管（或枪头轻轻吹打），置于冰上 15min。
3. 置于 42°C 热激 1 min 后，迅速置于冰上急冷 2 min。
4. 热激完毕后，向上述感受态细胞中加入 450 µL 不含抗生素的 SOC（或 LB）培养基，37 °C 振荡（225 rpm）培养60 min。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。
5. 取200 µl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。（含相应质粒抗生素和 20 µg/ml 氯霉素）
6. 将平板置于 37 °C 培养，12~18 小时后可出现菌落。
7. 挑选生长良好的菌落，接入 LB 培养基（含相应质粒抗生素，20 µg/ml 氯霉素），37 ℃剧烈振荡培养过夜。
8. 1/50 比例接入新的 LB 培养基（含相应质粒抗生素，20µg/ml 氯霉素，0.5 mg/ml L-阿拉伯糖）37 ℃剧烈振荡培养至菌体密度 OD600 约 0.3（约 2h）。
9. 加入终浓度 2 ng/ml 四环素（诱导 chaprone 伴侣蛋白表达），37℃剧烈振荡培养至 OD600 约 0.5（约 2~4h）。
10. 加入适量 IPTG(0.1-1 mM), 15℃振荡培养 24h（培养摇床无法制冷条件下，室温诱导 8～12h）。
11. 4,000 rpm 室温离心 15 min，收集细胞，进行蛋白表达和可溶性表达分析。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
热门标签：RTS,BL21(DE3),Chaprone感受态细胞,RTS,BL21(DE3),Chaprone,感受态细胞
