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RTS OrigamiB(DE3)感受态细胞
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详细内容
RTS OrigamiB(DE3)感受态细胞
描述:RTS(Room Temperature Stable)系列感受态细胞为独有的化学感受态专利技术制备,其室温可保存 7 天、 -20°C 可保存 2 年(推荐保存温度)、-80°C 可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰,可常规冰袋运输(推荐运输温度)。 RTS 表达感受态细胞均为热激感受态细胞,转用于蛋白表达(不可用于克隆和载体构建),经 42°C 热激 1min 可获得105~106cfu/µg 效价,可满足质粒转化要求。该制品使用简单、运输、储存方便。

储存:RTS 系列感受态为干粉形式,均可室温保存 3 天,长期保存-20°C(2 年)。经 Nano E.coli Transfection Reagent 溶
解后的感受态必须分装后,并于-60°C 以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融,在-60°C 以下可保存 6 个月。

操作方法
1. 从-20°C 冰箱中取出 Nano E.coli Transfection Reagent 融化,放置于冰上。取 300 µl Nano E.coli TransfectionReagent 加入到一支冻干感受态细胞中,并分装到 10 支 1.5ml EP 管中(每支 30 µl),于-60°C 以下保存(或立即使用)。
2. 将 10~100 ng 质粒 DNA 加入到分装的感受态细胞中,轻弹 EP 管(或枪头轻轻吹打),置于冰上 15min。4. 置于 42°C热激 1min 后,迅速置于冰上急冷 2min。
3. 热激完毕后,向上述感受态细胞中加入 450 µL 不含抗生素的 SOC(或 LB)培养基,37°C 振荡(225 rpm)培养 60min。
使质粒上抗性标记基因表达,菌体复苏。
4. 取 200 µL 复苏菌液涂布到含相应抗生素的 LB 琼脂平板表面。
5. 将平板置于 37°C 培养,12~18 小时后可出现菌落。
6. 获得的表达菌,可使用 IPTG 进行诱导表达,从而获得重组蛋白。
注意事项:该产品仅供科研使用,不得用于临床诊断及其他用途,产品说明书以到货说明书为准,网站说明书仅供参考!
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