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WB Super RIPA Lysis Buffer
价格：￥ 100 ml/200
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:05:14
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详细内容
WB Super RIPA Lysis Buffer
制品的性能说明
蛋白酶及磷酸酶抑制剂组分及抑制性能
根据试验情况推荐选择组合
部分、制备 Western Blot 杂交蛋白样品
1. 对于培养细胞样品（0.5～10×106 个）：
(1). A: 非磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向 WB Super RIPA 裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物 A (S0142)，使其最终浓度为 1×。如 250µl WB Super RIPA 裂解液，加入 2.5µl 蛋白酶抑制剂混合物 A，混合均匀，待用。
B: 磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向 WB Super RIPA 裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物 A 、磷酸酶抑制剂混合物 B 、磷酸酶抑制剂混合物 C (S0143)各 2.5µl，使其最终浓度为 1×。如 250µl WB Super RIPA 裂解液，加入 2.5µl 蛋白酶抑制剂混合物 A、2.5µl 磷酸酶抑制剂混合物 B 、2.5µl 磷酸酶抑制剂混合物 C，混合均匀，待用。
注意：加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂后的 WB Super RIPA 裂解液可于-20°C 保存 2 个月，性能不会有下降；加入 Benzonase核酸酶（C2001）至终浓度为 0.25 U/µl，可有效降低样品粘度提高蛋白提取效率。
(2). 离心收集细胞，弃上清。加入 250 µl 上述配制好的裂解液，枪头或旋涡振荡混合均匀。冰上放置 30min。
(3). 样品裂解后，13,000 rpm 离心 5min，取上清，即为所提取蛋白。
2. 对于组织样品：
(4). 组织用研钵（或匀浆器）研磨充分至细小颗粒。
(5). 按照每 10 mg 组织加入 250 µl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当增加裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)，冰上放置 30min。
(6). 样品裂解后，13,000 rpm 离心 5min，取上清，即为所提取蛋白。
(7). 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。如蛋白提取过程中加入了 Benzonase 核酸酶消化核酸后，样品可以直接 NanoDrop 测定吸光值进行蛋白相对定量。
第二部分、制备 Co-IP/IP 蛋白样品
1. 对于培养细胞样品（0.5～10×106 个）：
(1). A: 非磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向 Co-IP/IP RIPA 裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物 A (S0142)，使其最终浓度为 1×。如 250µl Co-IP/IP RIPA 裂解液，加入 2.5µl 蛋白酶抑制剂混合物 A，混合均匀，待用。
B: 磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向 Co-IP/IP RIPA 裂解液中，加入蛋白酶抑制剂混合物 A 、磷酸酶抑制剂混合物 B 、磷酸酶抑制剂混合物 C (S0143)各 2.5µl，使其最终浓度为 1×。如 250µl Co-IP/IP RIPA 裂解液，加入 2.5µl 蛋白酶抑制剂混合物 A、2.5µl 磷酸酶抑制剂混合物 B 、2.5µl 磷酸酶抑制剂混合物 C，混合均匀，待用。
注意：加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂后的 Co-IP/IP RIPA 裂解液可于-20°C 保存 2 个月，性能不会有下降。
(2). 离心收集细胞，弃上清。加入 250 µl 上述配制好的裂解液，枪头或旋涡振荡混合均匀。冰上放置 30min。
(3). 样品裂解后，13,000 rpm 离心 5min，取上清，即为所提取蛋白。
2. 对于组织样品：
(4). 组织用研钵（或匀浆器）研磨充分至细小颗粒。
(5). 按照每 10 mg 组织加入 250 µl 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当增加裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量)，冰上放置 30min。
(6). 样品裂解后，13,000 rpm 离心 5min，取上清，即为所提取蛋白。
(7). 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。如蛋白提取过程中加入了 Benzonase 核酸酶消化核酸后，样品可以直接 NanoDrop 测定吸光值进行蛋白相对定量。
注意事项：该产品仅供科研使用，不得用于临床诊断及其他用途，产品说明书以到货说明书为准，网站说明书仅供参考！
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