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酸性磷酸酶染色试剂盒(硝酸铅法)
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详细内容
酸性磷酸酶染色试剂盒(硝酸铅法)
产品货号:XY9-44283
产品规格及价格:2×50ML/900元
产品简介:
以下是关于酸性磷酸酶染色试剂盒(硝酸铅法)的详细介绍:
基本信息
英文名:Acid Phosphatase Staining Kit (Lead Nitrate Method)
储存条件:一般为 2-8℃避光保存,不同品牌的试剂盒可能会有细微差异,保质期通常为 6 个月。
检测原理
以 β- 甘油磷酸钠为底物,在酸性 pH(4.5-5.5)条件下,酸性磷酸酶将其水解,释放出磷酸盐。磷酸盐与试剂盒中的铅离子结合,生成磷酸铅沉淀。磷酸铅沉淀再与硫化物(如硫化铵)反应,最终生成棕黑色的硫化铅沉淀,从而使酸性磷酸酶活性部位得以显示。

试剂盒组成
孵育液:主要包含 β- 甘油磷酸钠、铅离子(如硝酸铅)以及酸性缓冲液等成分,为酸性磷酸酶发挥作用以及磷酸铅沉淀的生成提供适宜的环境。
硫化液:通常为硫化铵溶液,用于将磷酸铅沉淀转化为棕黑色的硫化铅沉淀。
对照液:用于设置阴性对照,验证染色结果的特异性。部分试剂盒可能还会提供复染液,如核固红,用于复染细胞核,以便更好地观察细胞形态和酸性磷酸酶的定位。
操作步骤
冰冻切片染色
切片准备:将冰冻切片置于蒸馏水中。
孵育:把切片放入 ACP 孵育液中,在 37℃温箱中浸染 15-60 分钟。
清洗:将切片放入 37℃蒸馏水中清洗 2 次,每次 1 分钟,以去除未被吸附的铅。
硫化处理:配制 ACP 硫化工作液,取试剂(B)用蒸馏水稀释 50 倍,切片入硫化工作液,孵育 1-2 分钟。
冲洗:流水冲洗 3-5 分钟,再用蒸馏水洗。
复染与封片:可选核固红复染细胞核,蒸馏水洗后,用甘油明胶封片。
石蜡切片染色
切片脱蜡:石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
孵育:切片入 ACP 孵育液,置于 37℃温箱,浸染 4-12 小时,也可延长至 24 小时。
清洗:与冰冻切片染色步骤 3 相同。
硫化处理:同冰冻切片染色步骤 4。
冲洗:同冰冻切片染色步骤 5。
复染与封片:可选核固红复染细胞核,蒸馏水洗后,石蜡切片需脱水,常规透明,再用中性树胶封片。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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