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人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒
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详细内容
本试剂盒运用双抗体夹心 ELISA 法定量检测人血清、血浆、组织匀浆或其它相关生物液体中V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)含量。
[人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒内容]
| Reagent | Quantity |
| 酶标包被板 | 12well×8strips |
| 标准品 | 1×0.5ml |
| 标准品稀释液 | 1×1.5ml |
| 酶标试剂 | 1×6ml |
| 样品稀释液 | 1×6ml |
| 显色剂A液 | 1×6ml |
| 显色剂B液 | 1×6ml |
| 终止液 | 1×6ml |
| 30倍浓缩洗涤液 | 1×20ml×30flod |
| 说明书 | 1 |
| 封板膜 | 2 |
| 密封袋 | 1 |
[需自备的设备及试剂]
[试剂盒的储存及有效期]
注意:
[人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒标本的采集与保存]
1)取适量组织块,于预冷 PBS(0.01mol/L, pH 7.0⁻⁷.2)中清洗去除血液,称重后备用(组织块较大需先剪碎后再匀浆);
注意:
[试剂准备]

人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒注意:
[人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒操作步骤]
将V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)抗体包被于 96 孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入标准品或标本,其中的V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)与连接于固相载体上的抗体结合,然后加入生物素化的V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)抗体,将未结合的生物素化抗体洗净后,加入 HRP 标记的亲和素,再次彻底洗涤后加入 TMB 底物显色。TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。
[人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒计算]
各标准品及样本 O.D.值扣除空白孔 O.D.值后作图(七点图),如设置复孔,则应取其平均值计算。以标准品的浓度为纵坐标(或对数坐标),O.D.值为横坐标(或对数坐标),绘出标准曲线(最佳方程式应依回归方程计算的 R2值来定,以 R2值越趋近于 1 为好)。推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如 curve expert 1.30,根据样品 O.D.值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 O.D.值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的O.D.值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
[典型数据]
分别于定值血清及血浆样本中加入一定量的V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)(加标样品),重复测定并计算其均值,回收率为测定值与理论值的比率。
| 样本 | 回收率范围 | 平均回收率(%) |
| 血清(n=5) | 86-98 | 93 |
| EDTA血浆(n=5) | 91-103 | 96 |
| 肝素血浆(n=5) | 84-96 | 90 |
在定值血清及血浆样本内加入适量的V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS),并倍比稀释成 1:2,1:4,1:8,1:16 的待测样本,线性范围即为稀释后样本中V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)含量的测定值与理论值的比率。
| 样本 | 1:2 | 1:4 | 1:8 | 1:16 |
| 血清(n=5) | 83-95% | 85-97% | 93-107% | 85-99% |
| EDTA血浆(n=5) | 95-105% | 91-102% | 89-99% | 93-104% |
| 肝素血浆(n=5) | 87-101% | 84-98% | 91-103% | 88-96% |
精密度用样品测定值的变异系数 CV 表示。CV(%) = SD/mean×100批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定 20 次,分别计算不同浓度样本的平均值及 SD 值。
[人V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)检测试剂盒说明]
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