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Green Fluorescent FAM Caspase-5检测试剂盒(FLICA)
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详细内容
Green Fluorescent FAM Caspase-5检测试剂盒(FLICA)
产品货号:XY9-486272
产品规格及价格:50T/1700元;100T/2700元
产品简介:
Green Fluorescent FAM Caspase-5 检测试剂盒(FLICA)是一种用于检测细胞中 Caspase-5 活性的工具,以下将从其检测原理、组成成分、操作步骤、应用场景等维度展开介绍:
产品应用:
荧光酶标仪/荧光显微镜/流式细胞仪
检测原理
特异性结合:试剂盒中的 FAM 标记的 FLICA 试剂,包含能被 Caspase-5 特异性识别的氨基酸序列,当细胞发生凋亡等过程导致 Caspase-5 激活时,FLICA 试剂会与激活的 Caspase-5 发生特异性结合。
荧光信号产生:FLICA 试剂上连接有绿色荧光基团 FAM,与 Caspase-5 结合后,在特定波长的激发光下会发出绿色荧光,通过检测荧光信号的有无及强弱,即可判断 Caspase-5 的活性状态和表达量。
试剂盒组成
FAM-FLICA 试剂:即 FAM 标记的 Caspase-5 特异性抑制剂,是核心试剂,用于与活性 Caspase-5 结合,通常为冻干形式,需在使用前用特定溶剂复溶。
洗涤缓冲液:一般为 10× 浓缩液,使用时需稀释成 1× 工作液,用于洗涤细胞,去除未结合的 FLICA 试剂及其他杂质。
固定液:多为甲醛等成分,用于固定细胞,使细胞形态和细胞内成分保持稳定,便于后续检测,同时也有助于保持 FLICA 试剂与 Caspase-5 的结合状态。
细胞核染色剂:如 Hoechst 33342、Propidium iodide 等,可对细胞核进行染色,用于区分细胞的死活状态或观察细胞周期等,以便更地分析细胞凋亡情况。
操作流程
样本准备:收集处于对数生长期的细胞,根据实验需求进行处理,如诱导细胞凋亡等,使细胞处于不同的生理状态。
试剂准备:将 10× 洗涤缓冲液用去离子水或蒸馏水稀释成 1× 工作液;按照说明书要求,用适量的 DMSO 等溶剂复溶 FAM-FLICA 试剂,并进一步稀释至合适浓度。
细胞染色:向细胞样本中加入稀释后的 FAM-FLICA 试剂,在适宜的温度和时间条件下孵育,一般为 37℃孵育 30 分钟至 1 小时,使 FLICA 试剂与活性 Caspase-5 充分结合。
洗涤细胞:孵育结束后,离心去除上清液,用 1× 洗涤缓冲液洗涤细胞 2-3 次,每次离心后弃去上清液,以去除未结合的 FLICA 试剂。
固定细胞:加入适量固定液,室温下固定细胞 15-30 分钟,固定完成后,可根据需要再次洗涤细胞。
细胞核染色:加入适量的细胞核染色剂,如 Hoechst 33342 或 Propidium iodide 等,室温下孵育 5-15 分钟,然后用洗涤缓冲液洗涤细胞,去除未结合的染色剂。
检测分析:将染色后的细胞置于荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪等设备上进行检测,观察或分析绿色荧光信号的强度、分布等情况,从而得出 Caspase-5 的活性信息。
应用领域
细胞凋亡研究:Caspase-5 是细胞凋亡信号通路中的关键蛋白酶之一,通过检测其活性变化,可深入了解细胞凋亡的发生机制、进程及相关调控因素,为癌症、神经退行性疾病等疾病的发病机制研究提供重要线索。
药物研发:在药物筛选和研发过程中,可利用该试剂盒评估药物对细胞凋亡的诱导作用,以及对 Caspase-5 活性的影响,从而筛选出具有潜在治疗价值的药物,并进一步研究药物的作用靶点和作用机制。
免疫生物学研究:在免疫细胞的激活、分化和凋亡过程中,Caspase-5 也发挥着重要作用,通过检测免疫细胞中 Caspase-5 的活性,有助于阐明免疫反应的调控机制,以及免疫相关疾病的发生发展过程。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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