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Green Fluorescent FAM Caspase-6检测试剂盒(FLICA)
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详细内容
Green Fluorescent FAM Caspase-6检测试剂盒(FLICA)
产品货号:XY9-486276
产品规格及价格:50T/1700元;100T/2700元
检测原理:试剂盒中的关键试剂是 FAM-VEID-FMK,这是一种荧光标记的 caspase-6 抑制剂。它能够透过细胞膜进入细胞内部,与激活状态的 caspase-6 特异性地不可逆结合。由于 FAM(羧基荧光素)是一种绿色荧光探针,当它与 caspase-6 结合后,会在特定波长的激发光下发出绿色荧光,且荧光强度与细胞内活性 caspase-6 的含量成正比,通过检测荧光强度就能反映出 caspase-6 的活性水平。
产品应用:
荧光酶标仪/荧光显微镜/流式细胞仪

试剂盒组成
FAM-VEID-FMK FLICA 试剂:通常为冻干粉形式,需要在使用前用适当的溶剂如二甲基亚砜(DMSO)进行溶解和稀释。
10x 凋亡洗涤缓冲液:用于洗涤细胞,去除未结合的试剂和细胞碎片等,一般在使用时需要将其稀释 10 倍成为工作液。
固定剂:如多聚甲醛等,用于固定细胞,使细胞形态和细胞内的成分保持稳定,便于后续的检测和观察,同时也可以防止已结合的 FLICA 试剂从细胞内流失。
碘化丙啶(PI):一种核酸染料,可用于标记坏死细胞或晚期凋亡细胞的细胞核,因为坏死细胞或晚期凋亡细胞的细胞膜通透性增加,PI 能够进入细胞内与 DNA 结合,在特定波长的激发光下发出红色荧光,从而可以区分坏死细胞与凋亡细胞。
Hoechst 33342:一种蓝色荧光核染料,可穿透活细胞和固定细胞的细胞膜,与细胞核内的 DNA 结合,发出蓝色荧光,用于观察细胞核的形态变化,辅助判断细胞的凋亡状态。
操作步骤
样本准备:收集待检测的细胞样本,包括悬浮细胞或贴壁细胞,调整细胞浓度至合适范围。
试剂准备:按照说明书要求,将 10x 凋亡洗涤缓冲液用去离子水稀释成 1x 工作液;用适量的 DMSO 溶解 FAM-VEID-FMK FLICA 试剂冻干粉,然后再用磷酸盐缓冲液(PBS)进行稀释。
细胞染色:向细胞样本中加入稀释后的 FLICA 试剂,在适宜的温度下孵育一段时间,一般为 37℃孵育 1 小时左右,使 FLICA 试剂与细胞内的活性 caspase-6 充分结合。
洗涤细胞:孵育结束后,去除上清液,用 1x 凋亡洗涤缓冲液洗涤细胞 3 次,每次洗涤后离心收集细胞,以去除未结合的 FLICA 试剂。
复染(可选):根据实验需求,可选择用碘化丙啶(PI)或 Hoechst 33342 等染料对细胞进行复染,以进一步观察细胞的凋亡状态和细胞核形态。
固定细胞(可选):如果需要长期保存样本或进行后续的其他检测,可以使用试剂盒中的固定剂对细胞进行固定。
检测分析:将染色后的细胞样本置于荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪等仪器上进行检测,观察绿色荧光信号的强度和分布情况,分析细胞内 caspase-6 的活性水平。
应用领域
细胞凋亡研究:在细胞凋亡过程中,caspase-6 的激活是一个重要的事件,该试剂盒可用于研究细胞凋亡的机制、凋亡信号通路的调控等,比如研究肿瘤细胞在化疗药物作用下 caspase-6 的激活情况,以及探讨凋亡相关蛋白对 caspase-6 活性的影响。
药物研发:可用于筛选和评估具有诱导细胞凋亡或抑制细胞凋亡作用的药物,通过检测药物处理后细胞内 caspase-6 的活性变化,判断药物的作用效果和作用机制,为新药研发提供重要的实验依据。
疾病诊断与治疗监测:在某些疾病的发生发展过程中,细胞凋亡异常与疾病的进展密切相关,如神经退行性疾病、心血管疾病、肿瘤等。通过检测相关组织或细胞中 caspase-6 的活性,有助于了解疾病的发生机制、病情评估以及治疗效果的监测。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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