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细胞外酸化率检测试剂盒(ECAR)-绿色荧光
价格：￥ 100T/2300元；200T/4000元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:03:04
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细胞外酸化率检测试剂盒(ECAR)-绿色荧光
产品货号：XY9-48312
产品规格及价格：100T/2300元；200T/4000元
产品简介：
细胞外酸化率（ECAR）检测试剂盒（Extracellular acidification Rate Assay Kit）是利用合成的酸化检测荧光探针P62来检测细胞外酸化情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行细胞外酸化情况的动态实时测定。
细胞外酸化（Extracellular Acidification ；ECA）测量可以为糖酵解（glycolytic）活性研究提供丰富的信息，本试剂盒可用于代谢表征并确定具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控）如何影响糖酵解通量。
细胞代谢与癌症、心血管疾病、神经退行性疾病、肥胖、糖尿病及干细胞等多个领域息息相关。糖酵解是真核细胞中的关键代谢途径，在分化、增殖和 ATP 生成等生理过程中起重要作用。糖酵解的改变对多种疾病也具有重要意义，包括但不限于癌症、心血管疾病和代谢疾病。
能量代谢指标胞外酸化率（ECAR）可帮助研究人员更多地了解细胞对外界的应激反应和运作机制。但以往细胞代谢的检测技术存在较多限制，例如难以对细胞代谢进行连续、实时的检测；一些专门检测细胞代谢的仪器、硬件贵，试剂耗材消耗成本高，实验重复性低且只能检测有限指标。
与传统的终点糖酵解分析不同， 使用P62糖酵解分析可以实时测定细胞外酸化率 (ECAR)，可以观察糖酵解机制的短暂变化和快速反应。样品不需要密封处理，在这些条件下， ECAR 是一种可靠且稳定的糖酵解活性测定方法。
P62细胞外酸化分析可以实时测量细胞糖酵解活性，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对细胞功能毒性作用的一种可靠方法。
它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行简单动力学测定。随着糖酵解作用的进行，丙酮酸转化为乳酸，这将导致细胞外环境 pH 降低。P62探针可以灵敏地检测到 pH 降低，并表现为BcellProbe® P62探针荧光信号增加，从而实现对ECAR的测定。
P62最大激发波长为 445 nm，最大发射波长为 503 nm。其荧光在碱性条件下强度较弱，反之酸性条件下变强，从而 P62可被用于监测细胞外酸化的变化。在测定中，细胞外酸化率由荧光信号随时间的变化计算。细胞外酸化增加，荧光信号的变化率增加；反之，酸化减少，荧光信号的变化率降低。
P62与乳酸的这种反应是非破坏性且完全可逆的，P62没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与细胞耗氧率， 线粒体膜电位， ROS和细胞ATP 、LDH等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。
用P62进行细胞外酸化检测方法及其简单，不需要适用特殊的仪器设备，只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。
P62采用可见光激发检测，相对于采用紫外光激发的检测试剂，细胞损伤更低，对细胞的毒害更小。结果更加准确客观。
细胞酸化检测试剂盒可以用于直接，实时分析细胞外酸化情况。本试剂盒可以用来测量各种全细胞（贴壁和悬浮细胞），各种3D培养物，组织，小生物，球体，支架和基质等。
以96孔细胞培养板计，本试剂盒小包装可以检测100个样本。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、铁死亡、铜死亡、细胞自噬、衰老、焦亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、信号传导、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、糖酵解、缺氧、细胞内pH、细胞粘附、细胞形态、生长、分化、迁移等数百种细胞检测试剂盒产品。
可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
使用方法：
27. 以下以贴壁细胞为例，悬浮细胞加入相应的细胞悬液后参照下面步骤即可。
28. 以下各个换液、洗涤细胞的步骤均须注意避免细胞脱落损失。已经脱落、漂浮的细胞需要离心收集加回对应的孔中。
29. 使用培养板离心机离心操作。
30. 建议悬浮细胞密度为5×10^3个/µL，如1×10^6个细胞，用200 µL试剂B重悬
1. 检测工作液试剂配制：
根据待测样本数量，用试剂B检测缓冲液100倍稀释探针P62（母液）（例如：每100 µL P62探针中加入9900 µL检测缓冲液），充分混匀，配制成P62探针检测工作液，备用。
2. 按下表设定空白孔、对照孔和待测样品孔。
空白孔 对照孔 待测样品
细胞 有细胞 有细胞 有细胞
检测工作液（µL） --- 100 100
试剂B（µL） 100 --- ---
药物（µL）* --- --- 10*
溶剂（药物的溶剂）* 10* 10* ---
3. 准备细胞模型。
4. 培养好的待检测细胞移除培养基，用试剂B检测缓冲液洗涤细胞两次。每次洗涤每孔使用100 µL检测缓冲液。
5. 去除第二次洗涤的检测缓冲液，加入100 µL检测工作液（已含 P62酸化荧光探针）。
6. （可选，如果需要的话）可以在此处添加待测试化合物药物（通常为1-10 µL，以实际为准）。
7. 然后用该细胞板进行荧光细胞外酸化变化情况检测。用荧光读板设备读取该细胞板的荧光数据。
激发波长445 nm，发射波长503 nm。
每3分钟或5分钟读取一次。测量时间大于120分钟。
8. 按照荧光值（F）纵坐标与时间（min）横坐标绘制酸化率曲线。选择线性部分，按照线性部分的斜率对比细胞的ECAR大小。
9. （选做）计算每个样品的斜率值
结果分析：
如图样本，Sample 2的酸化率最高，Sample 3的酸化率最低。
简易计算：
注意事项：
31. 如果各待测样品耗氧率变化线性较好，各样品间差异明显，可以采用以下简易公式快速计算，比较各样本。
32. 选取线性较好的时间段。
计算公式：
结果示例：
1. 斜率曲线获得/实时观察活细胞中的糖酵解状况。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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