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3D胶原蛋白培养试剂盒/细胞培养三维胶原蛋白试剂盒（5mg/ml，无菌）
价格：￥ 10ML/4700元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:03:04
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详细内容
3D胶原蛋白培养试剂盒/细胞培养三维胶原蛋白试剂盒（5mg/ml，无菌）
产品货号：XY9-48711
产品规格及价格：10ML/4700元
产品简介：
细胞迁移是正常细胞过程（包括细胞增殖和迁移）的基本功能。 通常在2D环境中检查体外细胞行为。然而，在体内，细胞存在于富含I型胶原的三维细胞外基质环境中。 实际上，与传统的2D系统相比，在3D基质中培养的细胞可以更好地反映体内细胞生理。
3D细胞培养三维胶原蛋白培养试剂盒（3D胶原蛋白培养试剂盒）是采用开发的胶原三维细胞培养系统。该系统紧密模拟正常组织富含胶原蛋白的细胞外基质。该3D系统提供了一种简单快速的方法来分析3D胶原基质中的细胞血管生成，迁移，凋亡，增殖和组织形成。 混悬在该3D系统中的细胞可以通过相对比或荧光显微镜检查轻松可视化。 细胞可以直接固定并在基质内染色，并用抗体处理以可视化特定的细胞内和细胞外蛋白。 重要的是，混悬在3D系统中的细胞也可以用各种试剂处理，从而可以广泛筛选对生长因子和化学试剂的生物学反应。
细胞外基质对细胞的发育和行为有极大的影响。I 型胶原作为细胞外基质的主要组成成分，常用于原代细胞培养。Ⅰ型胶原存在于大多数组织和器官中，是结缔组织和内脏器官细胞外基质的主要构造成分，在皮肤、肌腱、骨骼中分布最为广泛。Ⅰ型胶原是由2条α1链和1条α2 链组成的长约300 nm的异源三聚体[α1( I )2 α2( I )]。位于细胞表面的胶原结合受体包括四大类，分别是整合素受体（α1β1, α2β1, α10β1, α11β1），盘状结构受体（Discoidin domain receptors，DDRs），主要位于血小板上的 Glycoprotein VI 受体以及位于免疫细胞上的 LAIR-1 受体。细胞可以通过以上受体与三聚体形态的 I 型胶原结合，从而调节细胞的粘附、形态、生长、迁移和分化。
胶原蛋白I 是根据Birkedal-Hansen 方法，通过醋酸抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备。可用于三维胶的制备，模拟真实的生长环境，使得细胞在三维环境中生长。还可用于包被细胞培养器皿，培养细胞表面粘附性，特别适合那些在普通培养器皿表面不易贴壁的细胞，比如成纤维细胞、肝细胞等原代细胞。本胶原蛋白在中性pH 下自发形成三螺旋骨架，是一种的细胞培养用基质。
本试剂盒可以用于肝细胞、成纤维细胞、脊神经节、肌肉细胞、施万细胞、胚肺细胞、上皮细胞和其他大量细胞系。可用于研究肿瘤细胞的侵袭和迁移、干细胞介导的肝细胞形成，神经细胞培养和移植，原代干细胞的体外培养及表型和功能的维持，体外类器官的三维培养，肿瘤球体（spheroids）形成及培养等多个生物学过程。
本试剂盒中胶原液溶于6 mM 醋酸盐缓冲液的无菌溶液，浓度5 mg/ml，每个批次产品皆通过细胞培养测试（包括三维空间培养）以保证质量的可靠性。批间差异小，内毒素严格控制，无免疫原性，可用于各种细胞的体外三维培养及体内移植。
胶原液形态为透明至乳白色液体，纯度≥99%，通过SDS-PAGE检测，pH值范围2-4，内毒素<0.5 EU/ml。
使用方法：
1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2. 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
3. 胶原原液不能冷冻，冷冻后再解冻会产生蛋白变性及蛋白沉淀。
4. 高浓度的胶原原液是粘稠状的，使用时应该一直放置在冰上。
5. 混合物在红色至粉红色之间，说明其为生理 pH，可形成凝胶。
6. 配制混合物的整个过程必须在冰上保持低温。
7. 当胶原原液出现浑浊不透明时，可能被污染，不能使用。
8.胶原能在培养瓶/皿上作为薄层包被或凝胶化用于细胞附着。细胞可以培养在凝胶上或凝胶内。以下以含细胞三维胶原制备为例。也可以先不加细胞，制备好三维胶原凝胶培养器皿后，再添加细胞悬液进行培养
9.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM，r/min）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：g=r×1.118×10-5×rpm2（r为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米)例如:转速为3000 rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
三维胶原的制备：
一、 不含细胞的三维胶原
1. 根据下表计算一定体积胶原凝胶所需各成分添加的量。
总体积（mL） 胶原（mL） 5×MEM（mL）NaOH 中和液（uL）
1 0.8 0.2 6 µl 起适量
5 4 1 30 µl 起适量
10 8 2 60 µl 起适量
2.准备碎冰置于冰盒中，接下来的混匀步骤需将混合管插入冰中。取预冷的50 mL无菌管，插入冰中，使用无菌注射器移取适量体积的胶原原液到该无菌管中。加入对应体积的5×MEM培养基，用注射器反复抽吸至少20次。
3.将以上胶原/培养基混合液移入另一含有中和液的预冷的无菌离心管，用注射器反复抽吸至少20次，并再次少量添加中和液并充分混匀，至混合物变成红色为止。抽吸过程中应确保无菌管插在冰中。
4.抽吸结束后，会看到混合物中有很多气泡。将无菌管放入离心机，3000 rpm，2-8℃快速离心15 s排出气泡后取出，插入冰上。
5. 三种成分添加好后立即充分混匀，混匀后立即加到培养器皿中。
6. 将培养器皿在室温（25℃左右）放置 20 min 后，转移到培养箱内。
7. 在 37℃孵育 1 h 即可在细胞培养器皿底部形成胶原凝胶。
8. 将需要培养的细胞悬液加入胶原凝胶上，正常培养。
二、 含细胞三维胶原
1.将预培养的细胞收集到离心管中，使用1×MEM培养基进行重悬，其体积不应超过预使用的胶原凝胶体积的1/10。
2. 根据下表计算一定体积胶原凝胶所需各成分添加的量。
3. 准备碎冰置于冰盒中，接下来的混匀步骤需将无菌混合管插入冰中。
4.取预冷的无菌离心管，插入冰浴中，使用预冷的无菌注射器移取适量体积的胶原原液到该无菌管中。
5.接下来，加入对应体积的5×MEM培养基，充分混匀，加入到另一含有中和液的冰浴离心管中，用注射器反复抽吸20-25次，并再次少量添加中和液并充分混匀，至混合物变成红色为止。抽吸过程中应确保无菌管插入冰中。
6.抽吸结束后，会看到混合物中有很多气泡。将无菌管放入离心机，3000 rpm，2-8℃快速离心15 s后取出，插入冰上，5 min内需完成与细胞混合加入培养皿中。
7. 将细胞混入胶原混合物当中，用移液器缓慢抽吸进行混合。
8. 加入细胞培养器皿，37℃孵育 1 h 即可在细胞培养器皿底部形成胶原凝胶。
9. 加入相应的细胞培养基到胶原凝胶上，正常培养。
常见问题分析：
1. 3D 细胞培养后如何染色？
3D细胞培养后可以直接在胶中进行染色，染色步骤同2D培养的细胞。不需要进行特殊处理。
2. 你们的 3D 培养凝胶试剂盒是不是只能培养特定的一些细胞？
本试剂盒对细胞没有选择性，对大多数细胞都是适用的。
3.你们的3D培养凝胶试剂盒和Matrigel基质胶有何不同？
Matrigel基质胶主要是由层粘连蛋白、Ⅳ型胶原、巢蛋白、硫酸肝素糖蛋白等组成，是从肿瘤中提取出来的，成分复杂。本试剂盒为单一胶原成分。用Matrigel基质胶进行3D培养，其后期染色非常困难，使用本试剂盒进行3D培养后的细胞可以轻松染色。
4.凝胶和细胞悬液混合这一步，是否有顺序要求？
有。必须严格按照说明书，顺序不可颠倒。否则不利于形成稳定的凝胶结构。
5.使用中如何吸取胶原？
先将吸头尖剪掉，用PBS润洗，然后再吸取凝胶。慢慢松开移液枪的按钮，按钮弹回原位之后，让枪头在凝胶液面以下稍多停留一会儿，再提枪，转移凝胶到其他容器中。
6.何时添加培养基？
37℃恒温培养箱中孵育5-30 min形成稳定3D凝胶结构后即需要添加培养液。将培养液贴壁缓慢加入孔板中。
7.长期培养需要如何换液？
换液时，弃掉2/3左右的旧培养基即可，留少量旧液以避免吸走凝胶；生长快的细胞，24 h时可以换掉一半培养液。换液时一定要紧贴培养孔壁，小心缓慢吸取旧液，避免吸掉刚贴附好的细胞。添加新液一定要贴壁、缓慢加入，以避免冲坏凝胶。此后可根据细胞生长速度，视培养液的消耗情况来换液。
8.3D细胞培养后怎么观察？
3D细胞培养后可以使用Confocal或者荧光倒置显微镜进行观察，光学显微镜也可以观察，但是由于凝胶是立体结构，可能光学显微镜观察的效果不会太理想。
9. 你们的 3D 细胞培养凝胶能进行长期培养吗？
可以。
10.你们的3D细胞培养凝胶使用时需要使用配套的耗材或者仪器吗？
不需要使用特殊耗材和仪器。采用本试剂盒进行3D细胞培养时所用的耗材和仪器同2D培养。
11. 你们的 3D 细胞培养凝胶试剂盒可以用于细胞共培养吗？
可以进行细胞共培养。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：3D胶原蛋白培养试剂盒,5mg/ml,无菌,3D胶原蛋白培养试剂盒/细胞培养三维胶原蛋白试剂盒（5mg/ml,无菌）
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