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细胞耗氧率检测试剂盒(R01荧光探针法）-OCR
价格：￥ 200T/4000元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:03:04
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详细内容
细胞耗氧率检测试剂盒(R01荧光探针法）-OCR
产品货号：XY9-48211
产品规格及价格：200T/4000元
产品简介：
细胞氧气消耗检测试剂盒（Oxygen Consumption Assay Kit / Oxygen Consumption Rate Assay Kit / OCR Assay Kit）是利用合成的特异性氧气荧光探针 R01来检测细胞外耗氧情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行耗氧量测定。
耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能，更具体而言是线粒体功能的关键性指示。通过这类指标来探究活细胞代谢，可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。
线粒体功能对细胞代谢、存活和能量产生至关重要。线粒体呼吸受损与病理状态（如癌症、缺血性再灌注损伤和神经退行性疾病）有关。线粒体毒性也是安全相关的抗药性和药物戒断症状的常见原因。
R01耗氧量分析可以实时测量全细胞或分离线粒体的耗氧量，是以高通量形式来评估用于代谢表征的细胞呼吸以及评估治疗对线粒体功能毒性作用的一种可靠方法。
它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着呼吸作用的进行，溶解氧被消耗，样品中的氧气浓度降低，导致 R01 分析的信号增加，从而实现对耗氧量的测定。
产品应用：
线粒体功能和细胞代谢研究
产品特点：
1.广泛适用于各种体外模型；不再局限于单层细胞，还能测定悬浮细胞、微生物和特定的 3D培养物；
2.简单的“混合-检测”方案允许使用多种其他分析试剂盒进行多参数分析；
3.可逆转，能够观察耗氧量的瞬态和长时间变化；
4.可适配多数荧光酶标仪以及标准 96 孔和 384 孔；
5.以高通量的形式方便地测量；
6.无需等待专用设备空闲所需的实验室时间，也无需大额资金专用设备投入
使用方法：
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.以下操作以 96 孔细胞培养板为例。其他培养容器或装置请根据实际情况调整试剂用量和检测方法。各试剂等比例调整即可。O2 荧光探针终浓度 25 倍稀释最佳。
4. R01 探针的信号变化直接取决于所测量细胞类型的细胞呼吸速率，建议尽可能使用每孔高的细胞密度作为起点，并根据需要减少细胞数量。
5.并非所有细胞类型都消耗足够用于检测的氧气。
6.必须使用荧光培养专用的透明底黑色培养板，减少检测时各孔之间的光互相干扰。
7.用于测定的所有仪器试剂溶液耗材均需 37℃预热。
8.添加氧气封闭液时注意避免产生气泡。
9.尽可能使用多通道移液器添加试剂。
10.如果药物有红色荧光（如阿霉素等）需要换液，不含培养基和待测药物，用 HBSS 或 PBS 体系检测，在无血清无酚红环境检测。
11.建议设定 FCCP 处理的阳性对照样本。
1. 检测工作液配制：
用相应的培养基将 R01 氧荧光探针 25 倍稀释
2. 按下表设定空白孔、对照孔和待测样品孔。
3. 准备细胞模型。
4. 培养好的待检测细胞移除培养基，用 PBS 洗涤细胞。
5. 加入 100 µL 新鲜配制的检测工作液。
【注】：
以 96 孔板为例。
6. 将培养板置于酶标仪（37℃）或培养箱孵育 30 min。
7. （可选，如果需要的话）可以在此处添加待测试化合物（通常为 1-10 µL，以实际为准）。
8. 加入药物后立即每孔加入 100 µL 氧气封闭液。
9. 然后用该细胞板进行荧光细胞外 O2 消耗变化情况检测。
将培养板置于酶标仪（37℃）中静置 5 min 后开始检测。
激发波长 455 nm - 468 nm，发射波长 603 nm。测定荧光强度，每 3 分钟或 5 分钟或 10 分钟读取一次数据。
10. 按照荧光值（F）纵坐标与时间（min）横坐标绘制耗氧率曲线，选择线性部分，按照线性部分的斜率对比细胞的 OCR 大小。
11. （选做）计算每个样品的斜率值。
常见问题分析：
1.耗氧率检测趋势跟预期的不一致？
可以从以下方面改善：
检查细胞接种和移液的一致性。
增加细胞密度。
将测定体积减少到 60 微升。
在某些较短的检测时间区间内，会出现荧光数据的波动情况，出现斜率下降或不变化，需要扩大到更长的时间范围内来分析耗氧率趋势。一般检测时间范围不少于 30 分钟。
温度对检测有较大影响。有条件的话，务必使用配有温度控制的酶标仪，仪器以及所有培养基和储备溶液均须使用前 37℃预热。注意某些读板器的温度控制不一致，如果存在这种情况，请考虑将测定和平衡温度降低到 30℃，避开外圈。
2.使用的细胞类型灵敏度不够？
可以考虑以下改善方案：
增加酶标仪的增益（PMT）设置。
在无酚红或无血清的情况下测定。
增加 R01 氧荧光探针的体积（至 10 µL/孔）。
减少R01 氧荧光探针的体积（至 2 µL/孔）。
增加细胞密度。
将测定体积减少到 60 微升。
测量底部读数（如果有）。
调整焦距。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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