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霉菌耗氧率检测试剂盒
价格：￥ 200T/4000元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:03:04
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详细内容
霉菌耗氧率检测试剂盒
产品货号：XY9-482116
产品规格及价格：200T/4000元
产品简介：
霉菌（丝状真菌）氧气消耗检测试剂盒（Oxygen Consumption Rate Assay Kit）是利用 合成的特异性氧气荧光探针R11来检测细胞外耗氧情况变化的试剂盒。可以通过简单的混合基于荧光酶标仪便捷的直接进行耗氧量测定。
耗氧量分析是研究代谢的有用工具。耗氧量测量结果是细胞代谢功能的关键性指示。通过这类指标来探究活霉菌细胞代谢，可为细胞功能以及代谢变化在疾病进展中的作用提供深入洞察。
R11分析提供了一种基于酶标仪的简单、灵敏的方法，用以测定各种细胞生长或筛选抗菌化合物，无需进行多次样品稀释或基于琼脂的冗长的研究。其还为微生物代谢研究提供了一种有价值的方法。酶标仪形式提供了筛选所需的通量和分辨率，且便于生成IC50 或 MIC 数据。
R11耗氧量分析可以实时测量霉菌全细胞的耗氧量，是以高通量形式来评估用于代谢表征的霉菌细胞呼吸以及评估治疗对霉菌功能毒性作用的一种可靠方法。
它可以使用荧光酶标仪在标准微孔板上进行有氧代谢的简单动力学测定。随着霉菌代谢作用的进行，溶解氧被消耗，样品中的氧气浓度降低，导致 R11 分析的信号增加，从而实现对耗氧量的测定。
R11是氧气敏感的荧光探针，最大激发波长为 453 nm，最大发射波长为 592 nm。其荧光通过分子碰撞与氧气反应，由O2淬灭，在无氧条件下荧光强度更高，反之有氧条件下荧光强度变低，因此荧光信号的量与样品中细胞外O2的量成反比，从而 R11可被用于监测细胞外氧气消耗的变化。在测定中，耗氧率由荧光信号随时间的变化计算。细胞耗氧量增加，荧光信号的变化率增加；反之，耗氧量减少，荧光信号的变化率降低。
R11与O2的这种反应是非破坏性且完全可逆的，R11没有细胞毒性，其是化学稳定的，惰性的，水溶性的和细胞不渗透的，不能透过完整的细胞膜。因此还可以同时与霉菌ROS、细胞ATP 、LDH或其它指标等检测的试剂结合使用，进行多参数检测。
用 R11进行细胞外耗氧检测方法及其简单，不需要适用特殊的仪器设备，只需要荧光酶标仪之类的荧光读板设备即可。
R11采用可见光激发检测，相对于采用紫外光激发的检测试剂，细胞损伤更低，对细胞的毒害更小。结果更加准确客观。
霉菌细胞氧气消耗检测试剂盒可以用于直接，实时分析细胞耗氧代谢功能。本试剂盒可以用来测量各种全细胞，透化细胞，各种3D培养物，支架和基质等。 R11还适用于分离的酶，酵母和霉菌等的细胞外耗氧情况测量。
以96孔细胞培养板计，本试剂盒小包装可以检测200-400个样本。
产品特点：
1. 广泛适用于各种微生物和特定的 3D 培养物；
2. 简单的“混合-检测”方案允许使用多种其他分析试剂盒进行多参数分析；
3. 可逆转，能够观察耗氧量的瞬态和长时间变化；
4. 可适配多数荧光酶标仪以及标准 96 孔和 384 孔；
5. 以高通量的形式方便地测量；
6. 无需等待专用设备空闲所需的实验室时间，也无需大额资金专用设备投入。
使用方法：
1. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3. 以下操作以 96 孔细胞培养板为例。其他培养容器或装置请根据实际情况调整试剂用量和检测方法。各试剂等比例调整即可。O2 荧光探针终浓度 16 倍稀释最佳。
4. R11 探针的信号变化直接取决于所测量细胞类型的细胞呼吸速率，建议尽可能使用每孔高的细胞密度作为起点，并根据需要减少细胞数量。
5. 并非所有细胞类型都消耗足够用于检测的氧气。
6. 使用荧光培养专用的透明底黑色培养板。实在没有的话可以采用透明板，注意细胞孔间隔开，减少检测时各孔之间的光互相干扰。
7. 用于测定的所有仪器试剂溶液耗材均需 37℃预热。
8. 添加氧气封闭液时注意避免产生气泡。
9. 尽可能使用多通道移液器添加试剂。
操作步骤：
注意事项：
25. 以下各个换液、洗涤霉菌的步骤均须注意避免细胞损失。
26. 使用培养板离心机离心操作。
1. 检测工作液配制：
用相应的培养基将 R11 氧荧光探针 25 倍稀释（例如：96 µL 新鲜培养基+ 4 µLR11 氧荧光探针），充分混匀。
2. 按下表设定空白孔、对照孔和待测样品孔。
3. 准备细胞模型。
4. 培养好的待检测细胞移除培养基，用 PBS 洗涤细胞。
5. 加入 100 µL 新鲜配制的检测工作液。
6. 将培养板置于酶标仪（37℃）或培养箱孵育 30 min。
7. （可选，如果需要的话）可以在此处添加待测试化合物（通常为 1-10 µL，以实际为准）。
8. 加入药物后立即每孔加入 100 µL 氧气封闭液。
9. 然后用该细胞板进行荧光细胞外 O2 消耗变化情况检测。
将培养板置于酶标仪（37℃）中静置 5 min 后开始检测。
激发波长 455 nm - 468 nm，发射波长 603 nm。测定荧光强度，每 3 分钟或 5 分钟或 10 分钟读取一次数据。
10. 按照荧光值（F）纵坐标与时间（min）横坐标绘制耗氧率曲线，选择线性部分，按照线性部分的斜率对比细胞的 OCR 大小。
11. （选做）计算每个样品的斜率值。
如图样本，Sample 2 的耗氧率最高，Sample 3 的耗氧率最低。
简易计算：
注意事项：
27. 如果各待测样品耗氧率变化线性较好，各样品间差异明显，可以采用以下简易公式快速计算，比较各样本耗氧率差异。
28. 选取线性较好的时间段。
示例：
1. 斜率曲线获得
2. 绘制剂量反应曲线
要生成剂量响应曲线，绘制计算的耗氧率（OCR）与生成如上 OCR 曲线的数据对应的化合物浓度的关系曲
线， 如下：OCR 与药物浓度的关系证明化合物 A 引起对霉菌细胞耗氧的抑制反应。
常见问题分析：
1. 耗氧率检测趋势跟预期的不一致？
可以从以下方面改善：
检查细胞接种和移液的一致性。
增加细胞密度。
将测定体积减少到 60 微升。
在某些较短的检测时间区间内，会出现荧光数据的波动情况，出现斜率下降或不变化，需要扩大到更长的时间范围内来分析耗氧率趋势。一般检测时间范围不少于 30 分钟。
温度对检测有较大影响。有条件的话，务必使用配有温度控制的酶标仪，仪器以及所有培养基和储备溶液均须使用前 37℃预热。注意某些读板器的温度控制不一致，如果存在这种情况，请考虑将测定和平衡温度降低到 30℃，避开外圈。
2. 使用的细胞类型灵敏度不够？
可以考虑以下改善方案：
增加酶标仪的增益（PMT）设置。
在无酚红或无血清的情况下测定。
增加 R11 氧荧光探针的体积（至 10 µL/孔）。
减少R11 氧荧光探针的体积（至 2 µL/孔）。
增加细胞密度。
将测定体积减少到 60 微升。
测量底部读数（如果有）。
调整焦距。
3. 我无法在含有细胞的孔中检测到任何信号，或者我可以检测到信号，但斜率（速率）显得很低？
检查正确的仪器设置，设置信号优化。
增加细胞密度。
将测定体积减少到 60 微升。
4. 开始测定时荧光强度出现下降趋势？
有些细胞模型样本刚开始测定的一小段时间内可能出现荧光强度下降的情况，一般 10 分钟
左右。可以等荧光平衡后开始上升的时间点作为起点。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：霉菌耗氧率,检测试剂盒,霉菌耗氧率检测试剂盒
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