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详细内容
PAGE胶蛋白回收试剂盒
产品货号:XY9-3761
产品规格及价格:50T/700元
产品简介:
PAGE 胶蛋白回收试剂盒是一种用于从聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)中回收蛋白质的工具,以下将从其作用原理、使用方法、品牌及特点等
作用原理
研磨破碎:通过研磨杵等工具将含有目标蛋白的凝胶块研磨成细小碎片,增加凝胶与试剂的接触面积,便于后续蛋白质的洗脱。
洗脱:利用特定的洗脱液,如试剂盒中的溶液 A,在适宜的温度和摇晃条件下,使蛋白质从凝胶碎片中溶解并释放到溶液中。
沉淀:加入助沉液和沉淀液,如溶液 B、溶液 C 等,改变溶液的物理化学性质,使蛋白质发生沉淀,从而与其他杂质分离,达到回收蛋白质的目的。

使用方法:
电泳:按常规方法进行变性(SDS-PAGE)或非变性蛋白电泳,使蛋白质在凝胶中得到分离。
切胶:电泳结束后,在对 PAGE 胶进行固定和染色时,切下其中一个样孔所对应的胶条进行固定和染色。将出现蛋白条带后的胶条放回到在整个 PAGE 胶中此胶条切除前的位置,通过胶条上的蛋白条带来找到在未染色胶上该蛋白预计出现的区域,并切下此区域的 PAGE 胶(含未固定和未染色的目的蛋白)进行回收,尽可能地把多余的胶切除,否则会影响回收效率。
研磨处理:将切下的胶块转移到 1.5mL 塑料离心管中,用研磨杵充分将胶块压磨成尽可能细小的碎片。
洗脱:加入适量的溶液 A,4℃摇晃洗脱至少 2-16 小时(过夜),使蛋白质从凝胶碎片中洗脱到溶液中。
过滤除胶:洗脱完成后,10,000g 离心 10 分钟,转移上清到新的离心管中,注意不要吸取碎胶。
蛋白沉淀:加入 5 倍体积的预冷的溶液 B,摇晃混匀,-20℃放置至少 10-30 分钟,使蛋白质沉淀。室温 12,000g 离心 5-20 分钟,弃上清,得到蛋白质沉淀。
蛋白漂洗:用预冷的丙酮等对蛋白沉淀进行漂洗,去除杂质,进一步纯化蛋白质。
蛋白贮存:选用合适的缓冲液溶解沉淀的蛋白质,以方便进行后续的电泳和质谱测序等实验。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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