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Tris-Tricine阳极缓冲液(5×,pH8.9)
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详细内容
Tris-Tricine阳极缓冲液(5×,pH8.9)
产品货号:XY9-37192
产品规格及价格:500ML/320元
产品简介:
Tris-Tricine 阳极缓冲液(5×,pH 8.9)是Tricine-SDS-PAGE(三羟甲基甘氨酸 - 十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳) 体系的核心缓冲液之一,主要用于小分子蛋白质(如 < 10 kDa 的多肽、小分子蛋白)或疏水蛋白的分离,其核心作用是在电泳过程中维持阳极区域的 pH 稳定,并为蛋白质迁移提供离子环境。以下是该缓冲液的详细信息,包括配制方法、关键原理、使用注意事项及相关拓展。

5× 浓缩液配制方法(1L 体系为例)
1. 所需试剂与耗材
Tris(分子量 121.14 g/mol):12.11 g(终浓度 50 mM,按 5× 浓缩液计算,1× 使用时为 10 mM)
Tricine(分子量 179.2 g/mol):17.92 g(终浓度 100 mM,1× 使用时为 20 mM)
SDS(十二烷基硫酸钠,分子量 288.38 g/mol):5 g(终浓度 5 g/L,1× 使用时为 1 g/L,提供变性环境)
超纯水(ddH₂O,无离子污染):约 800 mL
浓 HCl(12 M,用于调节 pH):少量(约 1-3 mL,根据实际 pH 调整)
1 L 容量瓶、磁力搅拌器、pH 计(需提前校准)、烧杯(2 L)
配制步骤(关键步骤需控温)
溶解固体试剂:在 2 L 烧杯中加入 800 mL 超纯水,依次加入 Tris、Tricine,置于磁力搅拌器上搅拌至完全溶解(避免先加 SDS,防止溶液粘稠影响溶解)。
加入 SDS:待 Tris 和 Tricine 完全溶解后,加入 SDS 粉末,继续搅拌至 SDS 完全溶解(SDS 溶解时可能轻微放热,无需降温,室温溶解即可)。
定容与调 pH:将溶液转移至 1 L 容量瓶中,用超纯水补至刻度线(定容后再调 pH,避免体积偏差);倒回烧杯,用 12 M 浓 HCl 缓慢滴加调节 pH 至8.9(室温下测量,温度每变化 1℃,pH 约波动 0.03,需在室温校准)。
过滤与分装:用 0.45 µm 滤膜过滤溶液(去除未溶解的微小杂质,避免电泳时出现条纹),分装至干净的试剂瓶中,4℃冷藏保存。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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