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细胞衰老检测试剂盒 / Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit
价格：￥ 1000T/2100元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:41:19
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详细内容
细胞衰老检测试剂盒 / Cell Senescence β-Galactosidase Staining Kit
产品货号：XY9-4151
产品规格及价格：1000T/2100元
产品简介：
细胞衰老（Cell senescence）是细胞控制其生长潜能的保障机制，一般含义是复制衰老（Replicative senescence，RS），指正常细胞经过有限次数的分裂后，停止分裂，此时细胞虽然是存活的，但是细胞形态和生理代谢活性发生明显变化的现象。
体外衰老细胞研究常用的生物学特征包括：1）不可逆的生长停滞；2）与衰老相关的β-半乳糖苷酶（senescence associated β-galactosidase, SA β-gal）的活化。作为溶酶体内的水解酶，通常在pH 4.0的条件下表现活性。但是衰老细胞内其在pH 6.0的条件下表现活性，且随着传代次数的增加，细胞群体中表现衰老相关的β-半乳糖苷酶的细胞数目逐渐增加。
细胞衰老试剂盒正是基于SA β-gal活性变化的生物学特征而设计的，专门用于对衰老细胞或组织进行染色检测。本试剂盒以X-Gal为底物，通过细胞内SA β-gal在酸性条件下稳定表达，催化底物生成蓝色产物，从而在光学显微镜下观察颜色变化以分析细胞的衰老状况。
本试剂盒适用于人和各种动物体外培养细胞的衰老检测。产品性能稳定，参数经优化，着色敏感。仅对衰老细胞进行染色，不会染色衰老前的细胞（presenescent cells）、静止期细胞（quiescent cells）、永生细胞（immortal cells）或肿瘤细胞。
产品应用：
荧光显微镜
使用方法：
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.试剂 A 有腐蚀性，操作时要小心。
3.试剂 C2 刚溶解时可能会有沉淀，充分混匀或者漩涡震荡使沉淀全部溶解，之后用于染色实验
4.试剂 C2 需要避光保存。染色工作液也需要避免光照。
5.染色后的细胞样品可以在 4ºC 冰箱保存，需避免光照。
6.细胞 β-半乳糖苷酶活性强，孵育 3 h 即显示阳性；细胞 β-半乳糖苷酶活性弱，则需要孵育最长至 24 h。细胞染色孵育时间应根据不同细胞样本情况经预实验后选定为 3-24 h。
7. 细胞衰老 β-半乳糖苷酶染色反应依赖于特定的 pH 值，不能用于细胞培养的 CO2 培养箱中进行染色反应。因为 CO2 培养箱中较高浓度的 CO2 会影响染色工作液的 pH 值，导致染色失败。
8.避免使用细胞状态极差的细胞或过度传代的细胞，可能导致假阳性。
1. 染色工作液配制
实验开始前，将试剂盒内各组分从冰箱内取出，置于室温回温 15-20 分钟。按以下染色工作液配方，根据实验体系类型，检测样本数，统一配制单次实验需要的染色工作液总量。混匀后，置入 37ºC 恒温水槽里预热，即为染色工作液。
1.1 将染色剂 C2 粉剂用染色液 C1 充分溶解混匀。配成染色液 C。
1.2 将 300ul 染色液 C 加入 10ml 染色液 B 中，充分混匀。配成染色工作液。
2. 细胞染色
2.1 贴壁细胞：（96 孔板为例）
1） 吸除细胞培养液，用 0.1ml 洗涤液 E 洗涤 1 次，加入 0.1ml 固定液 A，覆盖整个生长表面。室温固定 5 分钟。
2） 吸除固定液 A，用 PBS 洗涤细胞 3 次，每次 3 分钟。
3） 吸除 PBS，每孔加入 0.1ml 预热的染色工作液，覆盖整个生长表面。
4） 37℃孵育 4 小时～24 小时，或直到细胞呈现蓝色，可以用封口膜或保鲜膜封住细胞培养板防止液体蒸发。
5） 普通光学显微镜下观察和计数：表达 SA β-gal 的细胞为阳性细胞，呈现蓝绿色。
2.2 悬浮细胞染色：
1） 离心收集细胞至 1.5ml 离心管内，用 0.1ml 洗涤液 E 洗涤 1 次，加入 0.1ml 固定液 A，覆盖整个生长表面。室温固定 15 分钟。固定时可以在摇床上缓慢摇动，以避免细胞结成团块。
2） 离心，吸除细胞固定液，用 PBS 洗涤细胞 3 次，每次 3 分钟。
3） 离心，吸除清洗液 A，每管加入 0.1ml 预热的染色工作液。
4） 37℃孵育 3 小时～15 小时，或直到细胞呈现蓝色（注：避免液体蒸发）。
5） 取部分染色好的细胞，滴加到载玻片上或 6 孔板内，普通光学显微镜下观察和计数。
2.3 组织切片染色：
1） 对于石蜡切片先按照常规方法进行脱蜡或水化处理。对于冰冻切片直接按照以下步骤进行；
2） 加入适当体积的固定液 A，以充分盖住组织为宜，室温固定不少于 15 分钟。
3） 用洗涤液 E 浸泡洗涤组织 1 次，用 PBS 洗涤 2 次，每次不少于 5 分钟；
4） 吸除 PBS，加入适当量的预热的染色工作液。
5） 37℃孵育过夜，可以用封口膜或保鲜膜封住防止蒸发，也可以把整个切片浸泡在染色工作液中。
6）普通光学显微镜下观察和计数。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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