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丙二醛(MDA)检测试剂盒
价格:¥ 100T/700元
品牌名称:$brandModel.Title型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/19 10:41:19
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详细内容
丙二醛(MDA)检测试剂盒
产品货号:XY9-47095
产品规格及价格:100T/700元
产品简介:
丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法,MDA Assay Kit)又称脂质氧化(MDA)检测试剂盒,是采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应,广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation)水平检测。丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应,形成红色的MDA-TBA加合物,MDA-TBA加合物在535nm处有最大吸收,据此可以通过比色法进行检测。
MDA试剂盒是一种改进型的微量、快速、简便、准确、无毒害的测试方法。通过测试可反映出细胞、细胞培养上清、血清、血浆、乳汁等细胞外液、红细胞、白细胞以及各种动植物的细胞水平的脂质过氧化物的量。本试剂盒仅用于科研领域,不能用于临床诊断或其他用途。
机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基,后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid, PUFA),引发脂质过氧化作用,并因此形成脂质过氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基,以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂,即非自由基性的脂类分解产物,而且通过链式或链式支链反应,放大活性氧的作用。因此,初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成,这些分解产物中,一些是无害的,另一些则能引起细胞代谢及功能障碍,甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化引起细胞损伤,而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。
因而测试MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合,SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力,而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。
可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
产品应用:
微孔板,酶标仪
产品特点:
1.本试剂盒中试剂均无刺激性气味,对操作人员无任何毒害。
2.快速准确,操作简便,每小时可测 100 例以上样本。
3.灵敏度高,血清或血浆样品只需 0.1 ml,或者更少。
4.再现性好,变异系数 CV=1.5%,同一份标本数次测试结果相关极微。
5.呈色稳定,呈色后一天内测吸光度不变。
6.血清样品放置 40℃,3~5 天内测试结果不变。—70℃以下可保存个月至半年。
7.测试面广,可测血清、血浆、各种组织匀浆,培养细胞等。
8.不需昂贵与特殊仪器,只需恒温水浴箱或铝锅、铝盆开盖煮沸,及 721、722、751、752 分光光度计任一型号均可。
9.稳定,不受气温等外界因素的影响。

使用方法:
1.必须使用干净的试管。
2.配制试剂时要充分混匀,加样或加试剂时要垂直加入试剂中,避免加到管壁。
3.水浴时间和温度必须固定。
4.血浆、血清或尿液样品制备后可以直接用于 MDA 测定。
5.组织或细胞可以使用 PBS 或裂解液进行匀浆或裂解。对于组织,组织重量占匀浆液或裂解液的比例为10%;对于细胞,每 100 万细胞使用 0.1ml 裂解液或匀浆液。匀浆或裂解后,1600g 离心 10 分钟取上清用于后续测定。匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或 4℃进行操作。
6.对于组织或细胞样品,样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的 MDA 含量。
7.95℃水浴用带盖试管,如无带盖试管,可用保鲜膜扎口,水浴时用针扎一小孔。
8.试剂 A 温度低时会凝固,使用前水浴加热溶解至透明。
9.测定样品吸光度值较低时,可将水浴延长至 80min,但应同时延长,以免造成批间差异。
10.避免使用 EDTA、枸橼酸、氟化钠、草酸等抗凝剂。
11.待测样本如不能及时测定,应置于-20℃保存,4 天内稳定。
样品测定:
1. 样品处理
① 血清、血浆、尿液、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水或者 PBS 稀释后检测。
② 组织、细胞等样本:组织或细胞可以使用 PBS 或的 RIPA 裂解液(BB-3201)等进行匀浆或裂解。
匀浆或裂解组织时,组织重量占匀浆液或裂解液的比例应为 10%;
对于细胞,每 106 个细胞使用 0.1 ml 裂解液或匀浆液。匀浆或裂解后,1600×g 离心 10 min,取上清用于后续测定。
匀浆或裂解等样品制备步骤宜在冰浴或 4℃进行操作。
样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的 MDA 含量。
2. 试剂配制:
TBA 工作液的配制: 称取适量 TBA,用 TBA 稀释液配制成浓度为 0.68%的 TBA 工作液。TBA 工作液需完全溶解后再使用,可以加热到 60-70℃促溶,并可通过反复剧烈 Vortex 促溶。
配制好的 TBA 工作液 4℃避光保存,1 个月内有效。
3. 稀释标准品:
取适量 MDA 标准品(1mM)用恰当溶液稀释至 1、2、5、10、20、50 µM(如果进行简易快速检测,标准品直接稀释 10 µM)。
4. MDA 检测工作液的配制:临检测前,根据待测定的样品数(含对照),参考下表新鲜配制适量的 MDA 检测工作液。
5. 样品测定:
离心管或其它适当容器内加入 0.1 ml 匀浆液、裂解液、PBS、生理盐水等适当溶液作为空白对照。加入 0.1 ml 上述不同浓度标准品用于制作标准曲线,加入 0.1 ml 样品用于测定;随后加入 4.14 ml MDA 检测工作。在带盖试管中按下表配制检测反应体系:
6. 混匀, 加盖,95℃水浴煮沸 40 min,加热时务必注意避免液体暴沸溅出。如果使用加热块(Heat block)进加热注意用重物压紧离心管盖;如果使用沸水浴,则需使用可把盖子锁死的离心管或螺旋盖离心管,或用Parafilm 封住离心管口,用针头刺一小孔。最方便和准确的加热方法是使用带有热盖并可以加热金属浴。
7. 水浴或流水冷却至室温。
8. 在 3000×g 离心 15 分钟或 4000×g 离心 10 分钟。
9. 取上清,双蒸水调零,用酶标仪检测 535 nm 处吸光值。96 孔板每孔加 200 µl 上清液。分别记为 A 空白、A标准、A 样品。
结果计算:
对于血浆、血清或尿液等样品可以直接根据标准曲线计算;也可以简易快速检测方法,采用如果进行简易快速检测,直接以 10 µM 标准品进行计算,获得 MDA 的摩尔浓度。
对于细胞、或组织样品,计算出样品溶液中的 MDA 含量后,可以通过单位重量的蛋白含量或组织重量等来表示最初样品中的 MDA 含量,例如 µmol/g 蛋白或组织。
简易快速血清、血浆、尿液等液体样品中 MDA 含量计算公式:
血清中 MDA 含量(µmol/L)
=(A 样品-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×10 × 样品测试前稀释倍数
简易快速细胞、组织样品中 MDA 含量计算公式:
组织细胞中 MDA 含量(µmol/g)
=(A 样品-A 空白)÷(A 标准-A 空白)× 10 ÷ 样品蛋白浓度(mg/ml)式中:
A 样品=样品孔的吸光度
A 标准=标准孔的吸光度
A 空白=空白孔的吸光度
参考区间:
健康成年人血清 MDA:9.58±2.15 µmol/L 血浆 MDA:7.31±1.27 µmol/L
参考取样量:
血清(浆)尿液取 0.1 ml;
低密度脂蛋白悬液取 0.1~0.2 ml。
食用油取 0.03 ml;
细胞悬液细胞上清 0.1~0.2 ml。
肝组织、心肌、肌肉组织等,取 5%或 10%匀浆 0.1~0.2 ml 较好。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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