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ATP酶检测试剂盒（Na+K+ATP酶、Ca++Mg++ATP酶、）
价格：￥ 0100T/1100元；200T/1800元
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/19 10:41:19
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详细内容
ATP酶检测试剂盒（Na+K+ATP酶、Ca++Mg++ATP酶、）
产品货号：XY9-47195
产品规格及价格：100T/1100元；200T/1800元
产品简介：
ATP酶存在于组织细胞及细胞器的膜上，是生物膜上的一种蛋白酶，它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。机体在缺氧及一些疾病状态下，此酶活力发生一系列改变，另外有些遗传疾病也与此酶活力有关。
ATP酶检测试剂盒(总ATP酶)是利用ATP酶可分解ATP生成ADP及无机磷的原理，通过测定无机磷的量来判断ATP酶活力的高低。
可以提供各种细胞检测试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
产品应用：
分光光度计
使用方法：
1.试剂 E 乙液在冬天或 4℃长时间保存可能会出现凝胶状物质，37℃溶解不了，可将其 60℃左右水浴 10 分钟即可完全溶解；
2.试剂 E 甲液和乙液应防止磷污染；
一、试剂配制
1．试剂 C 的配制：
使用前每支粉剂 C 加纯水 1ml，充分溶解。
【注】：
根据样品数量现用现配，未用完部分-20℃保存，一周有效。
2．显色剂的配制：
取试剂 E 的甲液一瓶加入一瓶已预温好的试剂 E 的乙液中，充分混匀。
需提前 0.5 小时配制，2-8℃条件下可保存 5 天。
配好的显色剂的量够做 13 个管子。
如果样本量很少，所需的显色剂的量较少，可以按试剂 E 中的甲液：乙液=7:6 的比例自行配制显色剂，用多少配制多少。（按比例配制显色剂要防止磷污染，用专用的吸嘴）
【注】：
乙液在冬天或 4℃长时间保存可能会出现凝胶状物质，37℃溶解不了，可将其 60℃左右水浴 10分钟即可完全溶解。
甲液和乙液要防止磷污染。
3．0.1umol/ml 标准磷工作液的配制：
使用前将 10mmol/L 标准磷储备液 100 稀释，即取 0.1ml 储备液加纯水至 10ml；
4．0.02umol/ml 标准磷工作液的配制：
将 0.1umol/ml 标准磷工作液用纯水稀释 5 倍，即取 0.1umol/ml 标准磷工作液 1ml 加纯水至 5ml；
5．基液的配制：
将试剂 A、B、C 按 260:80:80 比例混合。需多少配多少，现配现用。
6. 试剂 I 的配制：
用时取一支稀释液 I2 加入到一支粉剂 I1 中，充分溶解。
【注】：
根据样品数量现用现配，未用完部分 4℃保存，一周有效。
7. 试剂 J 的配制：
用时取一支稀释液 J2 加入到一支储备液 J1 中，充分混匀。
【注】：
根据样品数量现用现配，未用完部分 4℃保存，一周有效。
二、样本的前处理：
1. 组织的前处理：
准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9 的比例，加入 9 倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械
匀浆，2500 转/分，离心 10 分钟，取上清液（即 10%的匀浆上清液），再用生理盐水 10 倍稀释成 1%，同时用考马斯亮蓝试剂测定组织蛋白浓度。
【注】：
如果预试结果太高，再将 1%的组织匀浆稀释成不同浓度再进行预试后再决定取样浓度。
2．培养细胞的前处理：
将培养细胞消化，离心、弃上清，留下层细胞，每管加 0.2~0.3ml 生理盐水或匀浆介质制备成 107/cm3 细胞悬液，即 107/ml，再进行破碎。
破碎细胞的方法有三种：
① 用匀浆器匀浆；
② 用超声粉碎器粉碎；
③ 反复冻融 3 次
第三种方法有时会影响酶活力；
制备好的细胞悬液不需要离心，同时用考马斯亮蓝试剂测定组织蛋白浓度。再将细胞匀浆液稀释成不同浓度进行预试，根据预试结果决定取样浓度。
【注】：
在测试加样前要摇匀后取样；
不可用磷酸盐缓冲液或含磷的试剂作为样本匀浆或稀释样本
预试结果将绝对吸光度值（测定管吸光度值-对照管吸光度值）控制在 0.2 左右为宜。
三、 操作步骤：
1. 酶促反应：
混匀，3500 转/分，离心 10 分钟，取上清定磷。
2．定磷：
混匀，室温静置 5 分钟，纯水调零，636nm，1cm 光径，测各管 OD 值。
【注】：
在比色前，将比色皿用自来水冲洗 10 余次，再用纯水冲洗 4~5 次，以免磷污染。
如果样本数量较多，可以采用简便操作法进行酶促反应：
基质液的配制:参见前面（一、试剂配制），现配现用。
1. 酶促反应：
混匀，3500 转/分，离心 10 分钟，取上清定磷。
2．定磷：
混匀，室温静置 5 分钟，纯水调零，636nm，1cm 光径，测各管 OD 值。
【注】：
在比色前，将比色皿用自来水冲洗 10 余次，再用纯水冲洗 4~5 次，以免磷污染。
四．计算：
组织、细胞中 ATPase 的计算
定义：每小时每 mg 组织（细胞）蛋白的组织（细胞）中 ATP 酶分解 ATP 产生 1umol
无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。即 umolPi/mgprot/hour
ATPase 活力（U/mgprot）=（样品 OD-对照 OD）÷（标准 OD-空白 OD）×标准品浓度×60 ÷ T ×N÷待测样本蛋白浓度（mgprot/ml）
注：
1. 标准品浓度，0.02µmoL/ml；
2. T：酶促反应时间，10min；
3. N：酶促反应体系稀释倍数，7.8；
计算举例：
取 0.1%的小鼠肝组织浆按操作表进行检测，测得空白管吸光度为 0.052，标准管吸光度为 0.255，对照管吸
光度为 0.280,测得 Na+/k+ ATP 酶管吸光度为 0.378；Ca++/Mg++ATP 酶管吸光度为 0.460；总 ATPase 管吸光
度为 0.645。同时测得 0.1%的小鼠肝组织匀浆蛋自含量为
0.998mgprot/mL。则计算结果为:
Na+/k+ ATP 酶 = 0.378-0.280 x 0.02 x 60 x 7.8 + 0.0998活力(U/mgprot) 0.255-0.052 10= 4.528 u/mgprot
Ca++/Mg++ATP 酶 = 0.460-0.280 x 0. 02 x 60 x7.8 +0.0998活力(U/mgprot) 0.255-0.052 10= 8.316 U/mgprot
总 TP 酶 = 0.645-0.280 x 0. 02 x 60 x7.8 +0.0998活力(U/mgprot) 0.255-0.052 10= 16.863 U/mgprot
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