实验原理：

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被大鼠白细胞介

素6（IL-6）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体，经过

温育并彻底洗涤。用底物TMB 显色，TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用

下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠白细胞介素6（IL-6）呈正相关。用酶标

仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

样本处理及要求：

1.

血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或 4℃过夜，然后 1000×g 离

心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.

血浆：用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃

1000×g 离心 15 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免

反复冻融。

3.

组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红

细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按

1:9 的重量体积比，比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS，具体体积可根据实验需要适当

调整，并做好记录。推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分

研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀

浆液于5000×g 离心 5~10 分钟，取上清检测。

4.

细胞培养物上清：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃

保存，但应避免反复冻融。

5.

其它生物标本：1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测。

6.

样品外观：样品应清澈透明，悬浮物应离心去除。

7.

样品保存：样品收集后若在1 周内进行检测的可保存于 4℃，若不能及时检测，请按一

次使用量分装，冻存于-20℃（1 个月内检测），或-80℃（6 个月内检测），避免反复冻

融，标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

原创作者：上海心语生物科技有限公司

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