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  • 植物纤维素合成酶(CesA)酶联免疫试剂盒

    应用领域:生物产业       关注度:1942       发布时间:2025/10/9
    参考标准:试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被植物纤维素合 成酶(CesA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP 标记的检测抗体,经过 温育并彻底洗涤。用底物 TMB 显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用 下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物纤维素合成酶(CesA)呈正相关。用酶标 仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品含量。

1.

血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或 4℃过夜,然后 1000×g 离

心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

2.

血浆:用EDTA 或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的 30 分钟内于 2-8℃

1000×g 离心 15 分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免

反复冻融。

3.

组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红

细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按

1:9 的重量体积比,比如 1g 的组织样品对应 9mL 的 PBS,具体体积可根据实验需要适当

调整,并做好记录。推荐在PBS 中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分

研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀

浆液于5000×g 离心 5~10 分钟,取上清检测。

4.

细胞培养物上清:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃

保存,但应避免反复冻融。

5.

其它生物标本:1000×g 离心 20 分钟,取上清即可检测。

6.

样品外观:样品应清澈透明,悬浮物应离心去除。

7.

样品保存:样品收集后若在1 周内进行检测的可保存于 4℃,若不能及时检测,请按一

次使用量分装,冻存于-20℃(1 个月内检测),或-80℃(6 个月内检测),避免反复冻

融,标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

 


原创作者:上海双赢生物科技有限公司


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