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ELISA法测长叶车前花叶病毒实验步骤

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上传时间：2016/11/24 16:43:42

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上传者：上海研生实业有限公司

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将不同浓度的待检测RMV溶液作为样品液，在测定板每孔各加250ul,至冰箱（4℃）中孵育过一夜。
孵育后，去除孔穴内抗原溶液，用PBS-Tween20溶液缓缓冲洗孔穴3次，每次3min，然后去净洗涤液。
每孔穴加250ulRMV的酶标记抗体溶液（用1%牛血清白蛋白的PBS- ween20稀释）在恒温箱（37℃）里孵育3-6h,或6℃下过一夜。
去除孔穴酶标记抗体溶液，用PBS-Tween20溶液缓缓冲洗3次每次3min，然后去净洗涤液。
每孔穴加入新鲜配备的底物溶液250ul,室温放置0.5h，或者放置出现黄色。
加入50ul3N NaOH，终止反应。
对每孔穴的黄色溶液，测定449nm波长处的吸光值。
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