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总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒
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品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/9 12:01:28
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详细内容
提取液：液体 100mL×1 瓶，使用预冷。
试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 6mL×1 瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体 2mL×1 瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1 支，10mgFeSO4·7H2O。临用加入 1.75ml 蒸馏水，滴加 1 滴浓硫酸，制备 20µmol/mL FeSO4 标准溶液。
混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三7:1:1的比例混合，使用37℃预温。
产品说明：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
在酸性环境下，还原 Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的 Fe2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品：
恒温水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品的制备：
a. 血清、血浆、唾液或尿液样品
血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用 EDTA 抗凝）5000r/min 离心 10min， 取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过 30 d）后再测定。
b. 细胞或组织样品
收集约 100-200 万个细胞或者约 0.1g 组织，加入 1.0mL 预冷的提取液，匀浆或超声以充分破碎细胞并释放其中的抗氧化物，4℃、10000r/min 离心 5 分钟，取上清待测。需测定蛋白浓度。
二、测定步骤：
1、 标准曲线绘制：
将 20μmol/mL FeSO4 标准溶液稀释至 0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156μmol/mL，吸取 100μL 标准溶液（蒸馏水作空白）加入 100μL 试剂二，充分混匀，反应 10min， 双蒸水调零，测定 A593，计算ΔA=A 标准-A 空白，此时 Fe2+终浓度为 0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156、0.00078μmol/mL。
2、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 593nm，蒸馏水调零。
3、 操作表
|
| 对照管 | 测定管 |
| 混合液（μL） | 180μL | 180μL |
| 样品（μL） |
| 6μL |
| 双蒸水（μL） | 24μL | 18μL |
| 充分混匀，反应 10min，双蒸水调零，吸取 200μL 于微量玻璃比色皿/96 孔板， 测定 593nm 吸光值。计算△Aˊ= A 测定-A 对照（注：对照管只需测定一次）。 | ||
三、总抗氧化能力计算公式：
1、 标准曲线绘制
以 Fe2+终浓度为横坐标，以△A 为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程 y=kx+b，将△Aˊ带入方程求得 x（μmol/mL）。
2、计算公式：
单位定义：样品的抗氧化能力以达到同样吸光度变化值（△A）所需的标准液离子浓度表示。计算公式：
（1） 按蛋白浓度计算
总抗氧化能力（U/mg prot）=x× V反总÷（V样× Cpr）=34×x÷ Cpr
（2） 按样品质量计算
总抗氧化能力（U/g）=x× V反总÷（V样÷V样总×W）=34×x÷ W
（3） 按细胞数量计算
总抗氧化能力（U/104cell）= x×V反总÷V样×V样总÷细胞数量= 34×x÷ 细胞数量
（4）按液体体积计算
总抗氧化能力（U/mL）=x× V反总÷V样 =34×x
V 样总：加入提取液体积，1 mL； V 反总：反应总体积，0.204mL；V 样：反应中样品体积， 0.006mL；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以 104 为单位，以万计。
注意事项：
（1） 试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶手套操作。
（2） 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的样品，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
（3） 样品中不宜添加Tween、Triton 和 NP-40 等去垢剂和 DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
（4） 如果样品测定出来的吸光值在标准曲线范围以外，需把样品适当稀释或浓缩后再进行测定。
（5） 试剂盒 2-8℃保存。
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