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技术文章
HSF95 Insect Cell Medium（CW003）昆虫细胞培养基产品说明书
点击次数：2022 发布时间：2025/7/9 11:17:01
HSF95 Insect Cell Medium（CW003）昆虫细胞培养基产品说明书
一、产品基本信息
产品名称：HSF95昆虫细胞培养基
产品货号：CW003
产品规格：1L
适用范围：sf9、High Five等昆虫细胞悬浮培养及杆状病毒载体系统（BEVS）的重组蛋白瞬时表达
二、产品描述
CW003培养基为无血清即用型全营养培养基，专为昆虫细胞悬浮培养设计，包含细胞生长所需的氨基酸、维生素、碳水化合物、微量元素及特殊促生长因子，无需额外添加血清或其他成分即可直接使用，适用于细胞驯化、高密度培养及工业化生产场景。
三、产品特点
无血清配方：排除动物源成分干扰，批次稳定性，符合生物制药的安全性要求
即开即用：预优化全成分体系，无需补加任何试剂，显著降低操作复杂度
高效驯化：支持昆虫细胞从贴壁到悬浮、或从其他培养基直接/渐进式驯化，驯化成功率＞95%
高密度支持：细胞峰值密度可达
1.5×107cells/mL
以上（优化培养条件下）
表达增强：与杆状病毒感染兼容，重组蛋白产量较传统培养基提升30-50%
四、基础参数
参数 | 指标 |
pH | 6.2-6.4（25℃） |
渗透压 | 320-350 mOsm/kg |
储存条件 | 2-8℃避光保存，避免冻结 |
保质期 | 12个月（未开封） |
开封后建议 | 4℃避光保存，30天内用完 |
五、使用方法
5.1细胞驯化与传代
5.1.1基础培养条件
温度：27±0.5℃
摇床配置：带挡板摇瓶，转速110-130 rpm，装液量≤30%瓶体积
传代密度：
0.8−1.2×106æ´»c¸»eˋ/mL
（台盼蓝染色计数）
5.1.2直接驯化（适用于悬浮适应细胞）
按常规传代比例（如1:3稀释）直接用CW003培养基替换原培养基
维持培养条件不变，连续传代2-3次即可完成适应
5.1.3渐进式驯化（适用于贴壁细胞或敏感细胞）
起始阶段：原培养基中复苏细胞，连续传代2-3次至对数生长期（活力＞95%）
混合过渡：
第1代：原培养基: CW003 = 75:25，细胞密度
0.8×106cells/mL
第2代：比例调整为50:50，密度
1.0×106cells/mL
第3-4代：比例提升至10:90，密度
1.1×106cells/mL
，每48小时传代
完全适应：过渡至100% CW003培养基，连续传代3次，若细胞倍增时间＜24小时且活力＞92%，驯化完成
5.2细胞复苏
快速解冻：从液氮中取出冻存管，37℃水浴震荡，120秒内完成解冻（残留少量冰晶时停止）
换液操作：
将细胞悬液转入50mL离心管，加入10mL预热（27℃）的CW003培养基
离心条件：175×g，5分钟，弃上清
用20-30mL预热培养基重悬，接种至摇瓶，初始密度
0.3−0.5×106cells/mL
5.3细胞冻存
细胞筛选：选择对数生长期（活力＞98%）、密度
2.0−2.5×106cells/mL
的细胞
冻存液配制（现用现配）：
45%新鲜CW003培养基+ 45%细胞培养上清+ 10% DMSO（体积比）
混匀后4℃预冷，避免长时间存放
操作步骤：
离心收集细胞：175×g，5分钟，弃上清
用预冷冻存液重悬至密度
1.0−2.0×107cells/mL
（推荐
2.5×107cells/mL
）
分装至冻存管（1mL /支），标注信息后放入4℃预冷的程序降温盒（含异丙醇）
-80℃过夜（降温速率1℃/分钟），次日转入液氮保存
六、注意事项
无菌操作：所有操作需在生物安全柜中进行，避免交叉污染
培养基管理：开封后需避光储存，避免反复冻融；使用前需平衡至室温（20-25℃）
过程监控：高密度培养时建议每24小时监测细胞密度、活力及pH值，必要时进行补料或气体调节
病毒感染：杆状病毒感染前建议将细胞密度调整至
1.0−1.5×106cells/mL
，MOI值根据具体蛋白优化
七、质量保证
本产品经严格质检，包含以下检测项：
无菌检测（细菌、真菌、支原体）
内毒素检测（≤10 EU/mL）
细胞增殖测试（sf9细胞倍增时间＜22小时）
表达兼容性测试（GFP蛋白表达效率＞90%）
原创作者：上海徕同生物科技有限公司
