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技术文章
Zeta Life 转染试剂转染raw 264.7细胞经验分享2024新
点击次数：2762 发布时间：2024/12/17 18:47:05
Zeta Life 转染试剂转染raw 264.7细胞经验分享2024新
为了转染raw 264.7小鼠巨噬单核细胞我们实验室尝试了lipo3000、,FuGENE 6、FuGENE HD、Effectene等其它转染试剂，对于我们8000bp的质粒DNA基本转染后都没有荧光信号；师兄在中山大学的同学给我们推荐了他们实验室用Zeta Life Advanced DNA RNA货号AD600050转染raw 264.7细胞经验分享。
按照中山大学师兄给出的方法并结合我实验室情况我把自己在6孔板转染raw 264.7细胞的相关经验整理如下，希望对你转染raw 264.7细胞有一定的帮助，下面是我*用转染raw 264.7细胞的荧光和细胞明场图片，后期进一步优化后的新图片我也会随后呈上：
一、质粒DNA准备
1、质粒DNA浓度700ng/ul（注意：①溶解于无菌双蒸水或超纯水；②无内毒素），我用QIAGEN试剂盒除去的内毒素
二、操作流程
1、先将细胞接种到细胞培养板，细胞汇合度在70%左右，再进行转染。
2、复合物制备：将质粒DNA与Zeta Life Advanced Transfection Reagent货号AD600050转染试剂按照1:1（12ug:12ul）关系直接混合，用移液器吹吸10-15次混匀，室温静止10-15分钟。
3、将复合物加入*培养基的细胞培养板，并轻轻混匀，放入培养箱中继续培养（不建议把复合物加入到无血清的培养基里面，我后期会进一步摸索此条件）。
4、转染24小时后对细胞进行正常换液。
5、质粒DNA转染48小时后荧光检测转染效率
三、Zeta Life Advanced DNA RNA转染试剂信息：
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 数量 | 报价 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD600025 | 0.25ML | 1 | 1590 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD600050 | 0.5 | 1 | 2390 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD600075 | 0.75 | 1 | 2890 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD600150 | 1.5ML | 1 | 4490 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD600500 | 5ML | 1 | 电询 |
| Advanced DNA RNA 转染试剂 | AD601000 | 10ML | 1 | 电询 |
四、注意事项：
1本转染方法不适用在下面转染试剂的转染如：lipo3000、,FuGENE 6、FuGENE HD、Effectene等转染试剂；
2细胞培养基：Zeta Life公司 z7181-500胎牛血清，Gibco公司DMEM;
原创作者：上海徕同生物科技有限公司
