人不对称二甲基精氨酸(ADMA)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人不对称二甲基精氨酸(ADMA)水平。用纯化的人不对称二甲基精氨酸(ADMA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入不对称二甲基精氨酸(ADMA),再与HRP标记的羊抗人抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的不对称二甲基精氨酸(ADMA)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人不对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度。
试剂盒组成:
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
标准品:90μmol/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为60μmol/L,40μmol/L,20μmol/L,10μmol/L,5μmol/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
2.5μmol/L - 80μmol/L
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
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(1)、高效、灵敏、特异的抗体;
(2)、稳定的重复性和可靠性;
(3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
(4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
(5)、节省实验经费。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
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微电脑采液控制器/采血称
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郑州飞龙医疗设备有限公司
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电子秤 叉车秤称重问题的解决方法,现在咱们平时日子中离不开电子叉车称,所以该商品广受咱们期待,但是在运用电子叉车秤的过程中,该商品呈现毛病或反常该怎么办?电子叉车秤假如不能称重的话肯定会影响作业的,也会耽搁许多工作,那咱们是不是都知道电子叉车秤呈现了疑问咱们该怎么解决?关于电子叉车秤不能称重的一些维修办法,咱们能够参阅参阅,期望能够帮到大家
电子叉车秤不称重的解决办法:
办法一:翻开内码值,假如没有内码值或有一个数值但物品放上去后秤盘数值也不会改变,这种称为无内码或死码,均会造成不校对或不称重;这种状况请查看称重传感器的焊线是不是有掉。
办法二:假如不稳或内码太高或太低,通常是主板的阻波器以及电容不良,或者是AD坏了,需求送到专业的电子叉车秤维修点去处理,由于电子叉车秤比别的电子叉车秤运用条件谨慎,该商品操作人员不行私行拆开。
电子叉车秤称重时不能置零是什么因素?
因素一:查看一下叉车称重板上下间有没有碰到,你能够称叉车臂的前面和后边比照一下分量看是不是相同,假如相差太大肯定是碰到了。
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24V称重系统供电:YB987H ,MV信号YB964H
18V以下称重系统供电:YB968H ,MV信号YB964H
12V以下称重系统供电:YB970H ,MV信号YB964H
7V以下称重系统供电:YB958H ,MV信号YB964H
主要技术参数:YB987H 防爆等级:[Ex(ia)]IIC 工作电压:24V 最高输入电压:26V 短路电流:76mA 端电阻:310Ω
YB968H 防爆等级:[Ex(ia)]IIC 工作电压:18V 最高输入电压:19V 短路电流:154mA 端电阻:276Ω
YB970H 防爆等级:[Ex(ia)]IIC 工作电压:10V 最高输入电压:12V 短路电流:332mA 端电阻:80Ω
YB958H 防爆等级:[Ex(ia)]IIC 工作电压:6V 最高输入电压:7V 短路电流:735mA 端电阻:20Ω
YB964H 防爆等级:[Ex(ia)]IIC 工作电压:10V 最高输入电压:11V 短路电流:12mA 端电阻:2000Ω
外观尺寸:如图安装方式:导轨式接线方式:如图
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M0139 | 弹性蛋白酶(猪胰)/弹性硬朊酶/胰肽酶E/胰肽酶I/弹性水解酶/胰弹性酶/弹性酶/Elastase | 生物技术级,30u/mg | 1克 | 国药 | 300 | 39445-21-1 | 保存:-20℃ |
5克 | 国药 | 1200 | |||||
高层析纯,8u/mg | 5毫克 | 国药 | 800 | ||||
20毫克 | 国药 | 2600 | |||||
M0140 | 半乳糖氧化酶/Galactose oxidase | 高纯,30u/mg | 150u | 国药 | 700 | 9028-79-9 | 保存:-20℃ |
1KU | 国药 | 1400 | |||||
M0141 | α-甘油磷酸脱氢酶/3-磷酸甘油脱氢酶/α-Glycerophosphate dehydrogenase | BR,100-300u/mg | 1KU | 国药 | 1800 | 9075-65-4 | 2~8℃ |
M0142 | 苹果酸脱氢酶/Malate dehydrogenase/MDH | 超纯,1200u/mg,液体 | 25KU | 国药 | 1900 | 9001-64-3 | 2~8℃ |
BR,200u/mg,粉末 | 25KU | 国药 | 1000 | ||||
M0143 | 肌激酶/Myokinase | BR,1500-3000u/mg | 1ku | SimgaM3003原装 | 550 | 9013/2/9 | 2~8℃ |
M0144 | 神经氨酸酶(梭菌)/神经氨酸苷酶/唾液酸苷酶/神经氨糖酸苷酶/神经氨酶/神经酰氨酶/受体破坏酶/Neuraminidase | BR,0.5u/mg | 2.5U | 国药 | 1100 | 9001-67-6 | 保存:-20℃ |
10U | 国药 | 2500 | |||||
M0145 | 多酚氧化酶(菌菇)/酪氨酸酶/酥氨基酸酶/多聚苯酚氧化酶/儿茶酚氧化酶/Polyphenol oxidase | BR,500u/mg | 25KU | 国药 | 800 | 9002/10/2 | 保存:-20℃ |
100KU | 国药 | 2500 | |||||
M0146 | 丙酮酸激酶/丙酮酸磷转称酶/磷酸丙酮酸激酶/PK | BR,300u/mg,粉末 | 5KU | 国药 | 1000 | 9001-59-6 | 保存:-20℃ |
精制级,350-600u/mg,粉末 | 1KU | SigmaP9136 | 600 | ||||
生物技术级,200u/mg,液体 | 1KU | 国药 | 900 | 2~8℃ | |||
M0147 | 酪氨酸脱羧酶/Tyrosine decarboxylase | USP级,0.1u/mg | 25u | 国药 | 800 | CAS:9002-09-9 | 保存:-20℃ |
BR,0.1u/mg | 250毫克 | 国药 | 1000 | ||||
M0148 | 尿酸酶/脲酸酶/尿酸氧化酶/UAO | 生物技术级,10u/mg | 1KU | 国药 | 1300 | 9002/12/4 | 保存:-20℃ |
M0149 | 尿激酶/雅激酶/尿活素/U-血纤维蛋白溶酶原激活剂/Urokinase | BR,500u/mg | 10毫克 | 国药 | 3000 | 9039-53-6 | 保存:-20℃ |
M0149-1 | 人纤溶酶/人纤维蛋白溶酶/Fibrinolysin | BR,2u/mg | 150ug | 国药 | 1500 | 9001-90-5 | 保存:-20℃ |
500ug | 国药 | 4000 | |||||
M0150 | 几丁质酶/壳多糖酶/Chitinase | BR,200u/g | 5U | 国药 | 1400 | CAS:9001-06-3 | 保存:-20℃ |
25U | 国药 | 4000 | |||||
M0151 | 3α羟基类固醇脱氢酶/羟基甾族化合物氧化还原酶/羟固醇/HSD | BR,50u/mg | 500U | 国药 | 1400 | 9028-56-2 | 保存:-20℃ |
1KU | 国药 | 2500 | |||||
M0152 | 肌氨酸氧化酶/SAO/Sarcosine Oxidase | BR,5-10u/mg | 100U | 国药 | 5000 | 9029-22-5 | 保存:-20℃ |
1KU | 国药 | 9000 | |||||
M0153 | 肌酐酶/CAH/Creatininase amidohydrolase | BR,100-300u/mg | 1KU | 国药 | 7000 | 9025-13-2 | 保存:-20℃ |