本试剂盒仅供研究使用检测范围:1.56 pg/ml - 100 pg/ml检测限:0.39 pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人1,25-(OH)2D3,且与其他相关蛋白无交叉反应。期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中1,25-(OH)2D3含量。说明 1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。 3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。概述1966年狄路卡等证明维生素D是一个前体激素,其活性型为1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)。1,25-(OH)2D3的作用原理与经典类固醇激素一样,涉及遗传信息的表达。关于存在1,25-(OH)2D3受体/结合蛋白的靶组织除传统的小肠、骨和肾脏外,还有胰、脑垂体、甲状旁腺、乳腺、胎盘,甚至还可存在于性腺、子宫、结肠、皮肤成纤维细胞、胸腺和腮腺等多种组织。近来,发现1,25-(OH)2D3可抑制增生并降低白血病细胞分化,它可将白血病细胞分化为单核细胞/巨嗜细胞。另外,它还可抑制一系列其它恶性细胞增生,包括胸腺、前列腺和结肠癌细胞。1,25-(OH)2D3还影响激素分泌。除了影响甲状旁腺和垂体腺激素分泌,还报道有增加胰岛素分泌。此外,它还影响免疫系统,抑制T-细胞增生和细胞分裂表达。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗1,25-(OH)2D3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗1,25-(OH)2D3抗体、HRP标记的亲和素,经过洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的1,25-(OH)2D3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。 试剂盒组成及试剂配制 1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。 2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。需要而未提供的试剂和器材1. 标准规格酶标仪2. 高速离心机3. 电热恒温培养箱4. 干净的试管和Eppendof管5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器6. 蒸馏水,容量瓶等标本的采集及保存 1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为100 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,3.12 pg/ml,1.56 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。如配制50 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。操作步骤实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为实验结果性,每次实验请使用新的标准品溶液。2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。 4. 每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了实验结果的性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。注:1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。 3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。5. 建议检测样品时均设双孔测定,以检测结果的性。洗板方法手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 注意事项1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。3. 一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。7. 底物请避光保存。8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。来源:阿仪网(www.app17.com) http://www.app17.com/c63416/article/d32723.html
Globalsil C18-AP标准色谱柱
Globalsil C18-AP具有最大的表面覆盖率,是分离多种有机化合物的理想选择。严格控制的完全封端技术使得它在分离酸性,碱性化合物时具有卓越的性能。在保证分离度的同时,既为您节省了时间,又减少了各种溶剂开支。
◆高覆盖率和完全封尾
◆批次之间的重现性极高
◆更高的机械强度
◆较宽的ph使用范围:1.5-8.5
◆与同类型固定相比,碳载量较高
◆极佳的分离度和对称性,抗干扰性强
多种填料及规格可选
GlobalsilTM C18-AP色谱填料 | |||||
填料类型 | 粒径(μm) | 孔径 (A) | 孔体积 (ml/g) | 表面积(m2/g) | 碳载量(%) |
GS-120-5-ODS-AP | 5 | 120 | 1 | 300 | 17 |
GS-200-5-ODS-AP | 5 | 200 | 1.1 | 200 | 12 |
GS-300-5-ODS-AP | 5 | 300 | 0.9 | 100 | 7 |
GS-120-10-ODS-AP | 10 | 120 | 1 | 300 | 17 |
GS-200-10-ODS-AP | 10 | 200 | 1.1 | 200 | 12 |
GS-300-10-ODS-AP | 10 | 300 | 0.9 | 100 | 9 |
注:另有粒径3、15、40、50μm多种规格填料供您选择,欢迎垂询订购!
GlobalsilTM C18-AP色谱柱 | |||
产品编号 | 规格(mm) | 填料粒径μm | 填料编号 |
G04625D18AP03N | 4.6*100 | 3 | GS-120-3-C18-AP |
G04625D18AP05N | 4.6*250 | 5 | GS-120-5-C18-AP |
G10025D18AP10N | 10*200 | 10 | GS-120-10-C18-AP |
G10025D18AP50N | 10*250 | 50 | GS-120-50-C18-AP |
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主要技术参数:
1.仪器级别:1.0 级 2.测量范围: 电导率:(0~1.999)μS; (2.0~19.99)μS; (20.0~199.9)μS; (200~1999)μS; (2.0~19.99)mS; (20.0~199.9)mS 温度:-5.0~105.0(℃) 注:温度探头为选购件,200元/支
3.电子单元基本误差: 电导率:±0.5(FS) 温度:±0.5(℃)4.电子单元稳定性:±0.3(FS)5.温度补偿系数:2.0(%)6.温度补偿范围:0~100(℃)
联系人:宋建 |
电话:010-62399315 15011407163 |
2、先把橡胶抗撞块摆到需要安装的位置,用冲击钻将防撞块孔对着墙上打孔定位,然后拿开防撞块,在墙上打孔后,把防撞块放回原位,把拉爆螺丝用铁锤敲入防撞块及墙面,用套筒扳手拧紧即可。深圳市鹏翔瑞科技有限公司是以生产、销售交通设施,路政设施,安全防护设施、停车场设施为一体的大型企业。相关推荐产:路锥、交通锥、方锥、圆锥、橡胶锥、水马、警示灯、太阳能交通灯、反光衣、减速带、隔离墩、铁护栏、护墙角、防撞桶、防眩板、交通安全标志牌、安全凸面镜、广角镜等相关产品推荐:塑料产品系列:防撞桶,隔离墩,水马,围栏水马,防眩板橡胶产品系列:减速带,路锥,橡胶护墙角,车轮定位器,橡胶止退器,线槽板,标志牌:指示标志牌,警示标志牌,禁令标志牌,车库标志牌,施工标志牌其它的:遥控车位锁,道闸,反光道钉,轮廓标, 反光衣,广角镜 U型护栏 不锈钢岗亭 太阳能警示灯,钢管挡车器,路桩,柔性柱,铁马,
美国斯堡罗1200A水分测定仪(Seedburo 1200A MOISTURE TESTER)产品特点:1.多功能LCD屏幕显示2.三个多功能键,方便操作3.样品温度、大小监测4.符合NIST44的要求5.内置美国NTEP定标数据6.可多次测量,统计平均数7.样品自动落料8.RS-232数据口,可连电脑或打印机Seedburo 1200A谷物水分测定仪根据美国谷物协会标准烘箱测试数据进行定标,同时是小麦局专用水分测定仪器;电熔式的水分测定方式可快速精确的测量出谷物品种的水分值。水分测试过程,先通过扦样器取得样品后,再进行混合、分样、去杂后将样品倒入水分仪中进行测试,一样样品量为300g左右。进样后仪器会自动进行大小识别,自动温度补偿,用户选定需要测的样品名称后按测试键就可直接测定样品的水分值。电源:220V/50Hz尺寸:27(L)*38(W)*43(H)cm包装重量:11.3kg1200A水分测定仪的相关安装调试及售后服务提供由杭州钱江仪器设备有限公司全权办理。