薄膜表面缺陷检测仪

 【产品背景】

    在薄膜的实际生产过程中,由于各方面因素的影响,薄膜表面会出现诸如孔洞、蚊虫、黑点、晶点、划伤、斑点等瑕疵,严重影响了薄膜的质量,给生产商带来了不必要的损失。人眼往往不能及时准确的判断出瑕疵,MVC薄膜表面瑕疵缺陷检测系统能在线对生产过程中产生的表面缺陷瑕疵进行高速、精确的检测,显示和识别薄膜表面上的所有表面缺陷。能检测分别出直径 0.01mm-2mm的脏污点、条纹、破损、边缘裂缝、皱折、暗斑、亮斑、边缘破损、黑点疵点、毛发,蚊虫,等常见表面缺陷。强大的表面缺陷模式识别功能,根据表面缺陷的特征,在报警的同时,会指出导致该表面缺陷的设备、工艺问题所在,指导工人及时处理,从而有效的节约了生产成本、提高了产品质量。因此薄膜瑕疵在线检测系统成为高速薄膜生产线中不可或缺的检测设备。

【检测原理】

       生产线正常生产时,高亮的LED线性聚光冷光源采用透射的原理照射在生产线表面(对于不透明的薄膜产品采用反射的检测原理),通过架设在生产线上的线阵相机进行实时同步扫描,同时系统将相机采集到的薄膜图像通过MVC图像处理系统软件进行瑕疵识别处理。由于瑕疵图像的灰阶与正常产品的灰阶存在明显差异,从而使系统能够发现瑕疵,同时对瑕疵进行有效的判定、分类进行后续处理。

 

        薄膜瑕疵检测原理

【瑕疵图片】

薄膜瑕疵图像

 

【系统功能】
  1.操作便捷
  操作简单,只需点击“开始”、“停止”即可完成所有操作。
  2.稳定性高
  可连续工作在极端温度和厂房环境中。
  3.100%幅面表面检测
  发现疵点时可根据设定发出报警,提示及时修复,避免大量缺陷产品的产生。
  4.完整的表面质量信息
  材料表面疵点图像由计算机进行保存,每卷产品都有完全的疵点图像/位置和数量等信息,产品幅面边缘根据需要可以进行自动贴标。
  5.高精度检测
  方案可100%检测出0.02 平方毫米以上的疵点缺陷,满足客户的不断提升的产品品质要求。
  6.软件数据库管理功能
  可以对生产的每卷材料进行精确的质量统计,详细的缺陷记录(大小和位置)和统计为生产工艺及设备状态调整提供了方便;离线分析,用于后续分切和质量管理,可有效保证产品质量。
  7.定位标识功能
  每生产一卷产品,系统会自动对这一卷产品的表面缺陷进行统计,同时打印出统计标签,贴在每一卷产品上,跟随产品发放下游。这样用户就可以通过每一卷产品上面的标签对产品进行评级,从而有效的用于分配不同质量要求的用途。
  8.系统联动
  当系统检测到疵点时进行声光报警,也可在系统中加入其他连锁I/O 输出。
  9.一键导出
  一键导出EXCEL缺陷明细表,便于用户做进一步的查询,分析,建档。
           薄膜瑕疵检测系统软件

 

【技术指标】

 

 检测对象 保护膜、涂布膜、光学膜、锂电隔膜、食品包装膜 
 检测幅宽 适应任意幅宽(根据生产线宽度进行定制) 
 检测速度 MAX:600m/min
 检测精度 0.1mm*0.1mm 
 缺陷类型  晶点、线条、黑点、蚊虫、孔洞、划伤等常见缺陷
 测宽精度  产线无纵向偏移时误差≤3mm
 缺陷标识  自动声光报警,同时在系统界面显示当前缺陷的具体图像及信息
 历史记录  记录每一卷薄膜缺陷的总数,分布的位置、大小、面积等信息

【成功案例】

   薄膜瑕疵检测系统安装现场

PET薄膜检测系统现场

 
该公司产品分类: 检测分选设备 表面质量检测仪

GAXT-ABW氨气浓度报警仪,GAXT-A氨气检测仪

2018年的脚步已悄悄走进我们,无论时间空间如何变化,对于每个企业来讲安全问题永远都是经久不衰的话题 ,我们愿与您一同携手为我们的企业安全问题保驾护航 。BW氨气浓度报警仪,GAXT-A氨气检测仪

高度防水设计 超小的体积,精巧的设计 友好界面,操作简单 内置震动报警功能 可调节的高低报警功能 内含先进技术的微处理器按下按钮可显示峰值 数据存储和下载可选

BW氨气浓度报警仪,GAXT-A氨气检测仪技术指标检测:氨气量程:0-100ppm分辨率: 1ppm 校准:自动标定与调零 背光:低光/报警时自动背光传感器:插入式电化学传感器(带温度补偿 )报警:声光报警可清晰辨认 光报警: 红色LED及LCD闪烁 声报警:95dB (0.3米)可变的声音报警其它::过量程,传感器失效, 电量不足 显示:液晶数字显示读数 读数:开机自检后显示气体的成分/浓度TWA:时间加权平均值最大值:记录显示最大气体暴露量自检:开机后全功能自动自检防震ABS机壳湿度:5%--95%RH(非冷凝)EMI/RFI:符合EMC标准的89/336/EEC电源:3伏锂电电池寿命:2年电池使用寿命尺寸:28 x 50 x 95毫米重量:82克    防爆等级 本质安全

BW氨气浓度报警仪,GAXT-A氨气检测仪

高度防水设计 超小的体积,精巧的设计 友好界面,操作简单 内置震动报警功能 可调节的高低报警功能 内含先进技术的微处理器按下按钮可显示峰值 数据存储和下载可选

BW氨气浓度报警仪,GAXT-A氨气检测仪技术指标

检测:氨气量程:0-100ppm分辨率: 1ppm 校准:自动标定与调零 背光:低光/报警时自动背光传感器:插入式电化学传感器(带温度补偿 )报警:声光报警可清晰辨认 光报警: 红色LED及LCD闪烁 声报警:95dB (0.3米)可变的声音报警其它::过量程,传感器失效, 电量不足 显示:液晶数字显示读数 读数:开机自检后显示气体的成分/浓度TWA:时间加权平均值最大值:记录显示最大气体暴露量自检:开机后全功能自动自检防震ABS机壳湿度:5%--95%RH(非冷凝)EMI/RFI:符合EMC标准的89/336/EEC电源:3伏锂电电池寿命:2年电池使用寿命尺寸:28 x 50 x 95毫米重量:82克    防爆等级 本质安全在激烈的市场竞争环境中,我们必须抓住新机遇,迎接新挑战,以高度的使命感和责任感来推进我公司的持续发展,全力以赴,打造品牌

该公司产品分类: 加拿大BW

NDT150汽车配件机床附件便携式粗糙度检测仪

 概述

精密粗糙度测试仪NDT150是一种高精度表面光洁度检测仪器,可对多种机械加工零件表面的粗糙度进行测量,包括平面、斜面、外圆柱面,曲面,小孔,沟槽及车轴等。

主要特点

·机电一体化设计,体积小,重量轻,使用方便;

·采用DSP芯片进行控制和数据处理,速度快,功耗低;

·兼容ISO、DIN、ANSI、JIS多个国家标准;

·连续工作时间大于20小时

·超大容量数据存储,可存储100组原始数据及波形。

·实时时钟设置及显示,方便数据记录及存储。

·具有自动休眠、自动关机等节电功能

·可靠防电机走死电路及软件设计

·显示测量信息、菜单提示信息、错误信息及开关机等各种提示说明信息;

·中/英文语言选择;

·可连接电脑和打印机;

·打印全部参数或打印用户设定的任意参数。

·可选配蓝牙功能。

·可选配曲面传感器、小孔传感器、测量平台、传感器护套、接长杆等附件。

技术参数 

名称

内容

测量

范围

Z轴

(垂直)

160μm

X轴

(水平)

17.5mm

分辨率

Z轴

(垂直)

0.01μm/±20μm

0.02μm/±40μm

0.04μm/±80μm

显示分辨率

                      0.001μm

测量

项目

参数

Ra   Rz==Ry(JIS)   Rq    Rt==Rmax 

Rp   Rv   R3z     R3y   Rz(JIS)

Rs   Rsk   Rku    Rsm   Rmr

标准

ISO,ANSI,DIN,JIS

图形

支承率曲线,粗糙度轮廓,直接轮廓

滤波器

RC,PC-RC,Gauss,D-P

取样长度(lr)

0.25,0.8,2.5mm

评定长度(ln)

Ln= lr×n    n=1~5

传感器

测量原理

位移式差动电感

触针

天然金刚石,90锥角,5μm针尖半径

测力

<4mN

导头

硬质合金,滑行方向半径40mm

滑行速度

lr=0.25,   Vt=0.135mm/s

lr=0.8,    Vt=0. 5mm/s

lr=2. 5,    Vt=1mm/s

返回      Vt=1mm/s

示值误差

不大于±10%

示值变动性

不大于6%

电源

内置锂离子充电电池,用DC5V,800mA充电器充电

外形尺寸

158x63.5x46mm

重量

300g

工作环境

温度:- 20 ~  40

湿度:< 90% RH

储存运输环境

温度:- 40  ~   60

湿度:< 90% RH

测量范围

参    数

显 示 范 围

Ra,Rq

0.005μm  ~  16μm

Rz,R3z,Ry,Rt,Rp,Rm

0.02μm  ~  160μm

Sk

0  ~  100%

S,Sm

1mm

tp

0 ~ 100%

 

标准配置:

·NDT150粗糙度仪主机       1台

·标配传感器                 1个

·多刻线标准样块             1块

·可调支架                   1个

·电源适配器                 1套

·说明书                     1个

·合格证                     1个

·保修卡                     1个

 

保修期:两年

 

 

 

 

 

该公司产品分类: 水质分析仪/多参数水质分析仪 钢丝绳探伤仪 涂镀层测厚仪 超声波测厚仪 数字超声波探伤仪 便携式里氏硬度计 皮带探伤仪 手持式表面粗糙度仪

HGAS-R气体检测仪可燃气体检测仪毒气检测仪气体报警仪

 

HGAS-R系列是将现场监测到的有毒有害气体浓度转换成标准 4-20mA电流信号、带国际标准HART数字协议、在线免停车数字自由组态、带背光多参数LCD现场显示、传感器更换即插即用、国际标准智能化的两线制智能有毒有害气体变送器。
产品特点
标准两线制 4-20mA 电流信号和国际标准 HART 协议数字信号同线传输,从标准模拟信号到数字现场总线无缝切换,兼容现有报警控制单元或 DCS (分散控制系统),更可通过数字总线通讯组成完整的 FCS (现场总线控制系统)
支持国际标准 275/375 HART 手操器现场、远程设置调整
带背光大屏幕多参数 LCD 显示,直观显示气体浓度、类型、单位、百分比条棒以及工作状态等
即插即用(Plug and Play!)国际标准智能化传感器
更换传感器无须现场标定,传感器关键参数自动识别
传感器故障自动识别并现场显示,同时输出相应故障电流信号
全量程范围温度数字自动跟踪补偿,测量性
本机标准三按键实现单人单点现场维护
Pc 机智能用户软件实现单人单点现场、远程设置维护
标准 PDA 智能用户软件实现单人单点现场、远程设置维护
现场、远程设置维护不影响控制单元
技术参数
2氧气:0-25%,30%VOL   
2有毒有害气体包括:CO(一氧化碳)、H2S(硫化氢)、Cl2()、NH3(氨气)、SO2(二氧化硫)、AsH3(胂)、ClO2(二氧化氯)、F2(氟)、PH(磷化氢)、H2(氢气)、HCl(氯化氢)、HCN()、HF(氟化氢)、NO(一氧化氮)、NO2(二氧化氮)、O2(氧气)、O3(臭氧)、COCl2(光气)、SiH4(硅烷)等气体;
2可检测的可燃性气体:天燃气、液化石油气、煤气、CH4(甲烷)、C2H6(乙烷)、C3H8(丙烷)、C4H10(丁烷)、C5H12(戊烷)、C6H14(己烷)、C7H16(庚烷)、C8H18(辛烷)、H2(氢气)、C2H4(乙烯)、CH4O(甲醇)、C2H5O (乙醇)、C3H8O2(丙二醇)、(CH3)2CO(丙酮)、C4H8O(甲基丙酮)、C6H12O(甲基酮)、C6H12(环己烷)、(C2H5)2O(二)、C4H8O2(乙酸乙酯)、C7H8(甲苯)、C8H10(二甲苯)、C2H2(乙炔)等

盐度计,海水盐度计,盐分检测仪,盐水检测仪

 

PX-S10T/ PX-S28T盐度计,又称盐量计、盐分计、海水盐度计、盐分测量仪等,盐度计用于快速测定含盐(氯化钠)溶液百分比浓度或折射率广泛应用于制盐、食品、饮料等工业部门及农业生产和科研中。PX-S10T海水盐度计以每千分之一作为标度测量单位,测量范围:0~100‰ Salinity,最小刻度为1‰;1.000~1.070 比重,最小刻度为0.005。PX-S28T盐度计测量范围:0~28% Salinity,最小刻度为0.2%。PX-S10T/ PX-S28T盐度计主要应用在各种酱菜、泡菜、腌制菜、盐渍、海水养殖、水族馆、生理盐水制备等领域,可应用于海洋,渔场,养殖场使用的海水,水族馆使用的海水或人工海水,储藏鱼使用的盐水等的浓度管理。
 广州普析通仪器将继续通过持续稳健发展,以进口仪器产品质量,国内产品价格,为广大客户提供真正的“物美价廉”产品,期待与您相识相知,成为事业上的伙伴,共同发展,共同,进一步打造中国的精密检测仪器。欢迎您来电咨询采购!

型号
测试范围
最小刻度
重量(g)
PX-S10T
0~100‰ Salinity
1.000~1.070 比重
1
0.005
275
PX-S28T
0~28% Salinity
0.2%
215

 

细胞活力蓝色荧光检测试剂盒

产品名称:细胞活力蓝色荧光检测试剂盒

规格:50次

质量标准:性能稳定

  细胞活力蓝色荧光检测试剂盒由上海哈灵生物科技有限公司提供,产品都是经过严格检验测试后才出库的,请新老顾客放心购买!公司提供良好的售前售后服务,为您的实验保驾护航!

  细胞活力蓝色荧光检测试剂盒的同类型产品:

纯化线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 100
活体细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 20
完全线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 20
活体组织线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 10
真菌/酵母细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 20
冰冻切片线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 20
纯化线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 100
活体细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 20
完全线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 20
活体组织线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 10
真菌/酵母细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRE)测定试剂盒 20
DNA损伤彗星中性检测完全试剂盒(银染) 20次
过氧化氢处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次
内切核酸酶III处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次
FGP处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次
紫外线处理DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次
细胞DNA损伤彗星荧光检测试剂盒 20次
红细胞超氧化物歧化酶(SOD)亚型制备试剂盒   50
超氧化物歧化酶(SOD)植物裂解样品制备试剂盒  50
植物超氧化物歧化酶(SOD)亚型制备试剂盒  50
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒  50
酵母/真菌超氧化物歧化酶(SOD)亚型制备试剂盒  50
超氧化物歧化酶(SOD)细菌裂解样品制备试剂盒  50
细菌超氧化物歧化酶(SOD)亚型制备试剂盒  50
细胞超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 20次
组织超氧化物阴离子化学发光法定量检测试剂盒 20次
冰冻切片脂质过氧化物亚油酸(linoleic acid)荧光染色试剂盒 10
石蜡切片脂质过氧化物亚油酸(linoleic acid)荧光染色试剂盒 10
脂质过氧化物亚油酸(linoleic acidELISA定量测定试剂盒 48/96
脂质过氧化物亚油酸(linoleic acid)高效液相色谱 HPLC)分析试剂盒 20
细胞硫代巴比妥酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒 20/50
组织硫代巴比妥酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒 20
血液硫代巴比妥酸反应物(TBARS)比色法定量检测试剂盒 20
该公司产品分类: 其他标准品 抗体 进口elisa试剂盒 国产标准品 豚鼠elisa试剂盒 小鼠elisa试剂盒 其他试剂盒 其他试剂盒 培养基 中药标准品 标准品 检测试剂盒 大鼠elisa试剂盒 人elisa试剂盒 elisa试剂盒

HXA-1100型检测端安全栅

 概述

HXA-1100型现场供电安全信号调理器可为现场两线制变送器提供一组隔离的24VDC电源,同时把变送器的输出信号转换成标准的420mADC 15VDC信号出,并能限制高能量危险信号从控制室窜入危险场所。还可与现场总线型变送器及编程器配合使用,完成信号转换及通讯功能,其输入/输出/电源之间,以及两路输出通之间均相互隔离,以提高系统抗干扰的能力。

主要技术指标

输入信号:420mADC

输出信号:420mADC负载电阻:0~300Ω(4~20mADC电流输出端

配电电压:18.5~28.5VDC

基本误差:±0.2%

绝缘电阻:输入/输出/电源≥100MΩ

绝缘强度:输入/输出/电源间1500VAC/1分钟

电  源:24VDC±10%

防爆标志:本安防爆型(Exib)ⅡC

防爆额定值:220VAC

本安电路额定值:最高开路电压≤30V

        最大短路电流≤30mADC

工作条件:环境温度050

相对湿度≤85%

外形尺寸:外形尺寸:23×106×70mm(宽×高×深)

安装方式:35mmDIN导轨HXA-110

0型检测端安全栅国产系列图片HXA-1100型检测端安全栅国产系列图片HXA-1100型检测端安全栅国产系列图片

 

■型号规格

型号

输 入

输 出

HXA-1100

4~20mADC

4~20mADC

安全栅有几种?   
 本安型安全栅应用在本安防爆系统的设计中,它是安装于安全场所并含有本安电路和非本安电路的装置,电路中通过限流和限压电路限制了送往现场本安回路的能量,从而防止非本安电路的危险能量串入本安电路,它在本安防爆系统中称为关联设备,是本安系统的重要组成部分。    本安防爆系统关联设备,是指安装在安全场所,本安电气设备与非本安电气设备之间的相连的电气设备。 由于安全栅被设计为介于现场设备与控制室设备之间的一个限制能量的接口,因此无论控制室设备处于正常或故障状态,
安全栅都能确保通过它传送给现场设备的能量是本质安全的。           
中国国家仪器仪表防爆安全监督站是中华人民共和国地区监督生产安全防爆产品的权威机构,对本安型安全栅产品有着严格、科学、详细的规定,只有通过该监督站认证的企业及其所开发生产的产品才具备符合标准的安全性能,否则可能会给使用方的设备、人员和生产造成无可估量的损害。            
 
安装位置      安全栅安装于安全场所,接收来自危险区的信号,输出安全信号到安全区或危险区.             
 
安全栅的结构形式     
 
常见的安全栅结构形式分为齐纳式和隔离式.   
        
齐纳式安全栅      
电路中采用快速熔断器、限流电阻或限压二极管以对输入的电能量进行限制,从而保证输出到危险区的能量。它的原理简单、电路实现容易,价格低廉,但因由于其自身原理的缺陷使其应用中的可靠性受到很大影响,并限制了其应用范围,其原因如下:       
    1、安装位置必须有非常可靠的接地系统,并且该齐纳式
安全栅的接地电阻必须小于1Ω,否则便失去防爆安全保护性能,显然这样的要求是十分苛刻并在实际工程应用中难以保证。        
   2、要求来自危险区的现场仪表必须是隔离型,否则通过齐纳式
安全栅的接地端子与大地相接后信号无法正确传送,并且由于信号接地,直接降低信号抗干扰能力,影响系统稳定性。
          
隔离式安全栅         采用了将输入、输出以及电源三方之间相互电气隔离的电路结构,同时符合本安型限制能量的要求。与齐纳式安全相比,虽然价格较贵,但它性能上的突出优点却为用户应用带来了更大的受益:            
1.由于采用了三方隔离方式,因此无需系统接地线路,给设计及现场施工带来极大方便。            
2.对危险区的仪表要求大幅度降低,现场无需采用隔离式的仪表。           
3.由于信号线路无需共地,使得检测和控制回路信号的稳定性和抗干扰能力大大增强,从而提高了整个系统的可靠性。         
4.隔离式安全栅具备更强的输入信号处理能力,能够接受并处理热电偶、热电阻、频率等信号,这是齐纳式安全栅所无法做到的。            
5.隔离式安全栅可输出两路相互隔离的信号,以提供给使用同一信号源的两台设备使用,并保证两设备信号不互相干扰,同时提高所连接设备相互之间的电气安全绝缘性能。             因此,对比齐纳式和隔离式安全栅的特点和性能后可以看出,隔离式安全栅有着突出的优点和更为广泛用途,虽然其价格略高于齐纳式安全栅,但从设计、施工安装、调试及维护成本来考虑,其综合成本可能反而低于齐纳式安全栅。在要求较高的工程现场几乎无一例外地采用了隔离式安全栅作为主要本安防爆仪表,隔离式安全栅已逐渐取代了齐纳式安全栅,在安全防爆领域得到了日益广泛的应用.           
 3、齐纳式安全栅对电源影响较大,同时也易因电源的波动而造成齐纳式
安全栅的损坏。
 
该公司产品分类: 多参量变送器 重庆弘兴仪表 毕托巴流量计 电磁流量计热表 流量计热表 智能旋进旋涡流量计 一体化标准孔板流量计 一体化温度变送器 温度变送器 扩散硅压力变送器 温度传感器 温度仪表 液位变送器 电磁流量计 节流装置 流量仪表 涡街流量计 金属管浮子流量计 压力开关 压力仪表

20次/50次TUNEL原位检测试剂盒(通用)(BIOTIN标记POD法)

凯基TUNEL细胞凋亡原位检测试剂盒(通用)

(BIOTIN标记POD法,适用于细胞、组织样本)

Cat:KGA702,703,704

(20,50,100Tests)

一 TUNEL检测原理

凯基TUNEL细胞凋亡检测试剂盒是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA的断裂情况,其原理是生物素(biotin)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂的DNA的3-OH末端,并可与连接了的辣根过氧化酶的链霉亲和素(Streptavidin-HRP)特异结合,在辣根过氧化酶底物二氨基联苯胺(DAB)的存在下,产生很强的颜色反应(呈深棕色),特异地定位正在凋亡的细胞,因而在普通显微镜下即可观察和计数凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)的凋亡原位检测。

二 TUNEL试剂盒组分

组 份

Cat: KGA702

20 assays

Cat: KGA703

50 assays

Cat: KGA704

100 assays

储存条件

Equilibration Buffer

1.0 mL

2.5 mL

5.0 mL

-20℃

Biotin-11-dUTP

20μL

50μL

100μL

-20℃

TdT Enzyme

80μL

200μL

400μL

-20℃

50×Proteinase K

40μL

100μL

200μL

-20℃

Streptavidin-HRP

10μL

25μL

50μL

4℃避光

DAB

2mg

5mg

10 mg

-20℃

注意事项

1 使用前请认真阅读本说明书,提前准备好相关试剂。

2 因本试剂盒中组分均为微量,使用前请离心集液。

3 为避免试验误差、降低试剂的损耗,建议使用精密度高的进口微量移液枪及枪头。

4 TdT 酶反应液在使用前根椐样本数量集中配制,再分别滴加于各样本片上,避免每个样本单独配制而产生的试剂损耗。

5 另因DAB为固体粉末,使用前加入适量PBS溶解,配制成20×DAB(10 mg/ml)后,按下述方法显色使用。

6 用户自备:二甲苯、多聚甲醛、PBS、H2O2 、TritonX-100、柠檬酸钠、复染染液:苏木素或甲基绿等、盖玻片、载玻片、染色缸。

三 操作流程概览

本试剂盒特点● 操作简便:使用Ready-to-Use型试剂,并配有Proteinase K 和DAB。

● 高灵敏度:可以单一检出初期的凋亡细胞。

● 高特异性:能特异性染色凋亡细胞。

● 快速操作:整体操作约需3小时。

● 用途广泛:可应用于组织切片、细胞样本等。

● 方便观察:使用光学显微镜观察实验结果。

● 高正确性:有阳性对照片的制备方法,可以确认试剂盒的性

四 检测样本的预处理

TUNEL检测时样本的预处理是试验的关键所在,本说明书推荐的条件仅为普遍情况,用户需根椐自已的样本材料及试验结果来调整各个条件(参照Page 9),如处理时间、处理浓度等,来优化出适合自身样本的试验条件,从而做出客观的试验结果。

1 细胞样本的准备.

操作注意事项:

1. 为防止样本脱落,请使用硅烷(Silane)处理的载玻片或采用多聚赖氨酸铺片。

2. 固定好的样本可以在-20℃的70%乙醇中放置30分钟~一晚,以改善细胞的渗透性。

3. 使用PBS清洗细胞样本时,不要直接加在细胞样本上,以防止细胞样本的脱落。

4. 进行PBS清洗时,以5分钟清洗3次为标准。

5. 固定液、PBS、封闭液、通透液、染色缸需用户自备,请按上述方法配制。

2 石蜡组织切片的预处理

* 注意事项:蛋白酶K处理的使用浓度、处理时间及温度,都因组织的类型不同而有所不同,需要自已摸索优化上述条件,如有问题,请根椐本说明书Page 9的《常见问题的原因及推荐解决方案》来调整条件。例如:如果凋亡细胞染色较弱时,可用高浓度的Proteinase K(400μg/ml)处理5分钟。(本试剂盒的50×Proteinase K浓度为1mg/ml)。

其它替代方法: 石蜡切片的预处理也可根椐实际情况可采用下述三种替代方法之一,即蛋白酶K处理的步聚改用下述方法,其余步聚均相同:

替代方法1: 将脱蜡及水合好的切片浸入通透液中8-10 min(通透液:0.1%TritonX-100溶于0.1%柠檬酸钠,需新鲜配制

替代方法2 将脱蜡及水合好的切片浸入胃蛋白酶或胰蛋白酶中8-10 min(胃蛋白酶:0.25%-0.5%溶于HCl PH2,胰蛋白酶0.25%-0.5%溶于0.01N HCl )

替代方法3: 将脱蜡及水合好的切片浸入含200ml 0.1M的柠檬酸缓冲液PH 6 的塑料盒中,置于微波炉中350W(低档)处理5 min。

3 冰冻切片的预处理

4 其它难于处理的组织切片的预处理

5 阳性对照及阴性对照的准备

TUNEL检测同时需要设阳性和阴性对照,以显示试验的客观性及性。因此需要按下述方法准备两个样本来制备阳性及阴性片,其后续步聚与待测样本同样进行。

A:阳性对照样本的准备

组织样本在蛋白酶K处理、PBS浸洗后,细胞样本在Triton X-100通透液处理、PBS浸洗后,再加入100μL DNase I反应液(10U-3000U DNase I,40mM Tris-HCl PH 7.9,10 mM NaCl, 6mM MgCl2, 10mM CaCl2)(用户自备)室温—37℃处理10 —30 min,其余步骤均相同。如有问题详见Page 9.

B:阴性对照样本的准备

在Page 8标记反应制备TdT酶反应液时,不添加TdT酶,其余步骤均相同。

五 标记和显色反应:

操作注意事项:

1. 进行PBS清洗时,以5分钟清洗3次为标准。

2. PBS清洗后,为了各种反应的进行,请尽量除去PBS溶液后再进行下一步反应

3. 在载玻片上的样本上加上实验用反应液后,请盖上盖玻片或保鲜膜,或在湿盒中进行,这样可以使反应液均匀分布于样本整体,又可以防止反应液干燥造成实验失败。

4. TdT酶反应液即用即配,短暂于冰上保存。不宜保存,保存会导酶活性的失活。

5. 如果20×DAB溶液颜色变深成为紫色,则不可使用,需重新配制。

6. 用甲基绿(Methyl Green)染液(3-5%甲基绿溶于0.1M醋酸巴比妥 PH4.0)染色后,请用灭菌蒸馏水清洗多余的甲基绿。然后进行洗净(100%乙醇)、脱水(二甲苯)透明、封片后通过光学显微镜观察操作。如果此时使用80~90%的乙醇洗净时,甲基绿比较容易脱色,注意快速进行脱水操作。

六 常见问题的原因及推荐解决方案.

 

现象

可能原因

建议

非特异性染色(例如:非凋亡细胞的强染色)

Biotin-dUTP的非特异性结合

勿使细胞干涸

在TdT酶反应之后,再用含0.1% Triton X-100和1 mg/ml BSA 的PBS洗三次。

TdT酶的浓度过高

用TdT dilution buffer* 作1:2——1:10稀释,

内源过氧化物酶未被封闭

封闭液室温(15-25℃)封闭10min(封闭液: 3%H2O2溶于甲醇)

光照紫外线导致包埋试剂的聚合(如:甲基丙烯酸会导致样本DNA的断裂)

尝试改用其它包埋材料或其它聚合试剂

在固定组织时样本DNA已断裂(内源核酸酶的作用)

确保样品取样后立即固定或通过肝静脉灌注固定

固定后某些核酸酶活性依然较高导致DNA断裂

用含有dUTP和 dAPT的溶液封闭

染色背景较高

福尔马林固定导致某些含黑色素前体的细胞染成黄色

尝试以甲醇固定,但可能会降低检测的敏感性。

内源过氧化物酶未被封闭

封闭液室温(15-25℃)封闭10min(封闭液: 3%H2O2溶于甲醇)

Biotin-dUTP的非特异性结合

在TdT酶反应之后,再用含0.1% Triton X-100和1 mg/ml BSA 的PBS洗三次。

样本被支原体污染

使用支原体检测试剂盒检测,如阳性则制备未被污染的新样本

标记反应试剂(TdT酶及dUTP)的浓度过高

稀释50%,以降胝的标记反应的浓度

细胞处于高度增殖期

在非高增殖期取样检测

DAB孵育时间过长

减少DAB染色时间

标记率低、染色淡至无

如果以乙醇或甲醇固定的样本则标记效率较低(因为在固定时染色质未能与蛋白质交联,而在操作中丢失)

用溶于PBS PH7.4中的4%多聚甲醛固定

或福尔马林或戊二醛固定。

过度的固定导致与蛋白过度交联

缩短固定时间,或用溶于PBS PH7.4的2%多聚甲醛固定

促渗条件不佳,以致于试剂不能到达靶分子或浓度过低

l 增加通透剂促渗时间

l 增加通透剂的作用温度(15-25℃)

l 优化蛋白酶K的作用浓度和作用时间(如:以400ug/ml作用5min)

l 0.1M的柠檬酸钠70℃作用30min。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

复染信号较弱

选择的染料不合适

用溶于0.1M醋酸巴比妥的r3-5%甲基绿PH4.0,或苏木素复染

阳性对照没有信号

 

 

l 冷冻切片使用3U/mlR的DNase I

l 石蜡切片使用 1500U/ml的DNase I

l 一般样本使用10U/ml DNase I/

l 反应缓冲液:10mM Tris-HCl PH 7.9 10 mM NaCl, 5mM MnCl2, 10mM CaCl2 25mM KCl2 37℃ 反应30 min,PBS洗去。

组织样本从载玻片脱落

组织样本被酶从玻片消化下来

降低蛋白酶K的处理时间

 

GYCY柴油气体浓度检测仪

产品特性

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