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细胞试验有限稀释法（limiting dilution analysis，LDA）具体步骤
实验步骤：1、分装了每孔0.1毫升腹腔细胞的96孔细胞培养板（可提前24小时准备就绪，置CO2培养箱中备用）；2、自细胞培养瓶中收集长势良好的杂交瘤细胞（亦可自24孔培养板孔中收集），制成悬液。3、按白细胞计数方法计得细胞悬液的细胞数，一般在105/ 毫升左右。4、取3支10毫升刻度离心管排列在超净工作台试管架上，先用无血清培养基将细胞稀释至103/毫升，再用含15%小牛血清的培养基稀释到101/毫升细胞，即每0.1毫升1个细胞。5、每孔0.1毫升细胞悬液。6、置37℃5%CO2培养箱，4天后取出观察，并在板盖上打上标记，做好记录并统计结果。7、继续培养时，则在第4-5天更换1/2培养基，约第7-9天可以收获培养液上清用于检测抗体。并重复检测1-2次。8、选择单克隆生长孔，生长良好，阳性强者，转移到24孔板再做克隆经培养或扩大培养。
有限稀释法的程序
①制备饲养细胞悬液
②转染了重组质粒后的细胞计数，并调细胞数在1～5×10３/ml
③取130个细胞放入6.5ml含饲养细胞培养液，即20个细胞/ml，100μl/孔加A、B、C三排为每孔2个细胞。余下2.9ml细胞悬 液补加2.9ml含饲养细胞的培养液，细胞数为10个/ml，100μl/孔加D、E、F三排，为每孔1个细胞。余下2.2ml细胞悬液补加 2.2ml含饲养细胞的培养液，细胞数5个/ml，100μl/孔，加G、H两排，为每孔0.5个细胞。
④培养4～5天后，在倒置显微镜上可见到小的细胞克隆，补加培养液200μl/孔。
⑤第8～9天时，肉眼可见细胞克隆。
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【Acc-3 涎腺腺样囊性癌 】【细胞说明】：只要具备合适的生存条件，每一个分离的细胞都可以在体外生长繁殖，表现出生命的特征。所以细胞是生命活动的基本功能单位，它是一株“绿色"一株”生命，本公司随时为您提供这份“绿色”的株。细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点，在分化程度较高的细胞更为明显，这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如：具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形；具有感受刺激和传导冲动机能的神经细胞有长短不一的树枝状突起；游离的血细胞为圆形、椭圆形或圆饼形。不论细胞的形状如何，细胞的结构一般分为三大部分：细胞膜、细胞质和细胞核。但也有例外。例如：哺乳类红细胞成熟时细胞核消失。计算细胞、细胞核体积的公式：圆 形 V=4/3πr 3 （r 为半径）椭圆形 V=4/3πab 2 （a、b 为长、短半径）核质比 N／D=Vn／（Vc—Vn）（Vn 为核的体积，Vc 是细胞质的体积）细胞的组织化学方法，是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应，从而在细胞局部形成有色沉淀物，再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。Acc-3 涎腺腺样囊性癌【操作步骤】：l．接种 Hela 细胞于盖片上并培养 24～48 小时，使长成单层。2．取出盖片，用 PBS（pH7.2）轻轻冲洗盖片表面去除残渣。3．放入 Carnoy 固定液中固定 l 小时。4．浸入甲基绿一呱咯宁醋酸缓冲液中 30 分钟染色。5．取出盖片放入蒸馏水中轻轻漂洗 2～3 次（2～3 秒钟左右），吸去水分。放入纯丙酮中分色 2～3 秒钟。6. 放入 l／2 丙酮+1／2 二甲苯中 5 秒钟。7．放入纯二甲苯中透明 5 分钟。8．滴一滴中性树胶于载玻片上，将盖片标本面朝下封片。9．镜下观察相关产品示下：NTERA-2 人恶性多发性畸胎瘤细胞 ATCC 株 询价 RC-0617R Anti-Glasses Snake poison Protein 抗眼镜蛇蛇毒蛋白抗体（眼镜蛇）PA-1 人卵巢畸胎瘤细胞 ATCC 株 询价 RC-1206R Anti-GLI1（GLI-Kruppel family member 1） 下游转录因子Gli1蛋白抗体PANC-1 人胰腺癌细胞 ATCC 株 询价 RC-0038R Anti-GLP-1（Glucagon-like peptide-1）（7-36） 胰高血糖素样肽-1抗体PC-3 人前列腺癌细胞 ATCC 株 询价 RC-0208R Anti-GLP-2（Glucagon-like peptide-2） 胰高血糖素样肽-2抗体RAJI 黑人Burkitt淋巴瘤 ATCC 株 询价 RC-0841R Anti-GLP-2（Glucagon-like peptide-2） 胰高血糖素样肽-2抗体RAMOS 人B淋巴细胞瘤 ATCC 株 询价 RC-0472R Anti-GLUT1（Glucose transporter type 1） 葡萄糖转运蛋白1抗体RAMOS（RA.1） 人B淋巴细胞瘤 ATCC 株 询价 RC-0351R Anti-GLUT2（Glucose transporter type 2） 葡萄糖转运蛋白2抗体RPMI-8226 人多发骨髓瘤细胞 ATCC 株 询价 RC-1207R Anti-GLUT3（Glucose transporter 3） 葡萄糖转运蛋白3抗体SaOS-2 人骨肉瘤细胞 ATCC 株 询价 RC-0384R Anti-GLUT4（Glucose transporter type 4） 葡萄糖转运蛋白4抗体Acc-3 涎腺腺样囊性癌技术咨询网址：http://www.shxysw.net/（上海信裕生物科技有限公司）欢迎您的垂询
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