免费代测elisa小鼠卵清蛋白特异性IgEELISA试剂盒

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英文名称:Rat Apolipoprotein E,Apo-E ELISA试剂盒

试剂盒性能:

·准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900

·灵敏度:最低检测浓度小于10 pg/ml

·特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

·重复性:板内、板间变异系数均小于15%

 贮藏:2-8,避光防潮保存。

有效期:6个月

用途:本产品仅供科学研究

规格:48T/96T(可提供免费代测服务)

 

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工作原理 一.豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)elisa试剂盒实验原理
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。
二.实验材料与试剂配制
1.仪器与材料:酶标仪(使用前预热30分钟),微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水,滤纸。
2. 洗液的配制:按1:30的比例配制洗液备用。
使用方法三.豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存
1).细胞培养上清:
适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:
用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:
在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:
包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:
切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:
如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
四.操作步骤
1)取出试剂盒,室温(20-25℃)放置30分钟。
2)分组:取出96孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6个浓度)、空白孔、待测样品组。
3)标准品的稀释:准备小试管6 只,依次编好号码,先在各小试管中加入标准品稀释液100ul,然后取原浓度标准品100ul加入一只已编好号的试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第二支试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第三只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul 加入第四只试管中,充分混匀;再在该试管中取100ul加入第五只试管中,充分混匀;然后在该试管中取100ul,弃掉。第六只试管作为0 号标准品。
注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。
4)加样:依照标准品的顺序分别加入50ul的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入50ul的蒸馏水;其余微孔中先加样品40ul然后再加生物素标记的抗体10ul。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
5)温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。
6)洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30 秒弃去,如此重复5 次,拍干。
7)加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入50ul的酶标溶液(空白对照孔除外)。
8)温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于37℃恒温孵育1小时。
9)洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置15-30s,充分清洗酶标板5次,用吸水纸彻底拍干。
10)显色:各孔加入显色剂A液50ul后,再加入显色剂B液50ul。
11)终止:25-37℃下避光反应10-15分钟,加入50ul终止液。
12)读板:在450nm波长读取各孔的OD值。
注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的30分钟内,以免影响准确性。
五.数据计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,即为样品的实际浓度。
注意事项六.豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒注意事项
1)实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2)加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔间的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性。
3)孵育:严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化,如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
4)建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
5)建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
七.保存条件及有效期
1.试剂盒保存:2-8℃
2.有效期:6个月
订购流程八.豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒订货说明
1)卖方确保所订产品与目录技术指标保持一致;
2)为了确保买方产品在运输中的质量,对有特殊要求的低温产品予以湿冰运输。
3)收到货物后如出现质量问题,买方需在收到货物一个月内向卖方提出书面异议。买方逾期不提出异议,视为货物符合其要求,卖方不付任何责任。
4)出现质量以外的问题,如破损等,买方应在收货后一个周内提出。买方未按时提出异议,视为该产品合格。
本公司对所有售出的产品保证质量,并提供良好的售后服务,有关产品质量的投诉,请在收到货物的32天内以书面形式提出,并向我公司技术人员提供相应的材料,我们会及时派人解决。所有形式的赔偿或退换仅限于产品本身,不涉及其他间接内容。凡购买本公司任意款elisa试剂盒,均可享受免费代测服务,并提供技术指导。
该公司产品分类: 维生素C代谢系列 谷胱甘肽系列 辅酶Ⅱ系列 辅酶Ⅰ系列 生化试剂盒 分子学类 生化学类 酶联免疫学类 代理品牌 兔酶联免疫试剂盒 牛酶联免疫试剂盒 猪酶联免疫试剂盒 原装酶联免疫试剂盒 小鼠酶联免疫试剂盒 大鼠酶联免疫试剂盒 人酶联免疫试剂盒 酶联免疫试剂盒 多克隆抗体 单克隆抗体 ABCAM抗体

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ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、牽9体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。

CAS:530-57-4,丁香酸,纯度:97%,规格:10gCAS:6315-89-5,3,4-二甲氧基苯胺,纯度:98%,规格:10gCAS:3878-45-3价格,三苯基瞵硫价格,10gCAS:26685-82-5,顺-(1R,2S)-(+)-苯甲酰胺环己烷羧酸,纯度:98%,规格:250mgCAS:25449-96-1,3-氨基-4-甲基三氟,纯度:98%,规格:1g真核细胞起始因子-4E免疫组化试剂盒,IHC,Human2144-08-3,2,3,4-三羟基苯甲醛,英文名称:2,3,4-TrihydroxybenzaldehydeCAS:6610-29-3价格,4-甲基-3-硫代氨基脲价格,10gCAS:1879-09-0,2,4-二甲基-6-叔丁基苯酚,英文名称:2-(tert-Butyl)-4,6-dimethylphenol7440-04-2,锇标准溶液,标准品,OsmiumStard,催化剂,镀金,军工,化工。用于ICP-AES、AAS、AFS、ICP-MS、离子色谱等。滴定分析用标准溶液。CAS:2033-89-8,3,4-二甲氧基苯酚,纯度:97%,规格:10gCAS:80466-79-1,3,5-二甲基异,纯度:98%,规格:1g

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CAS:75-91-2,过氧化叔丁醇,纯度:7水溶液,规格:100mlCAS:38041-19-9,4-氨基四氢吡喃,英文名称:4-AminotetrahydropyranCAS:52334-81-3价格,2-氯-5-(三氟甲基)吡啶价格,25gCAS:123-93-3价格,硫代羟基乙酸价格,25g大鼠角化细胞内分泌因子价格(KAF)说明书/双调蛋白价格(AR)说明书Elisa检测试剂盒,Ratkeratinocyteautocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISA试剂盒,96T/48T穿心莲内酯,英文名称:Andrographolide,检测方法/纯度:HPLC≥98%,规格:20mg/支CAS:5445-51-2,1,1-环丁基二甲酸,纯度:99%,规格:5g141-86-6|2,6-二氨基吡啶,产品名称:2,6-二氨基吡啶CasNo.:141-86-6分子式:C5H7N3含量:98%CAS:626-18-6,1,3-苯二甲醇,纯度:98%,规格:2gGMS12303.5,磷酸二酯酶1C(Phosphodiesterase1C),0.25单位CAS:399580-55-3价格,4-甲氧基甲基价格,250mgCAS:110117-83-4,1-甲基-D-色氨酸,英文名称:1-Methyl-D-tryptophanCAS:832674-70-1,2-溴-5-乙氧基-4-羟基苯甲腈,规格:250mg柴胡皂苷D,英文名称:SaikosaponinD,检测方法及纯度:HPLC≥98%规格:20mg/支磷霉素价格,20片,bs-1847R,微管相关蛋白1A抗体价格,Anti-MAP1A/Mtap1a(microtubuleassociatedprotein1A),Anti-MAP1A/Mtap1a(microtubuleassociatedprotein1A)Ring/RimOD(mm),48481each价格,Anti-RFPTagMouseMonoclonalAntibody,产品规格:20ulCAS:1321-74-0,二乙烯基苯,纯度:二乙烯基苯,异构体混合物,1000ppm4-叔丁基邻苯二酚做稳,规格:聚蛋白胨价格,Polypeptone,产地:,规格:日本原装CAS:152-95-4,槐角苷,英文名称:Sophoricoside

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该公司产品分类: 分子生物试剂|食品安全检测|试剂盒 限制性内切酶 即用型试剂 核酸纯化类 染色液 血清 Amresco进口原装试剂 标准品,对照品 原材料部分 其他相关产品 干燥培养基 培养基配套试剂系列 生化鉴定管系列 培养基 Elisa试剂盒-人种类 Elisa试剂盒-大鼠种类 Elisa试剂盒-小鼠种类 Elisa试剂盒-牛种类 Elisa试剂盒-狗种类 Elisa试剂盒-豚鼠种类

牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒

牛溶菌酶Lysozymeelisa试剂盒上海润裕生物科技有限公司等科研产品,我公司ELISA试剂盒和免疫组化试剂盒产品质量可靠,ELISA试剂盒(酶联免疫分析试剂盒)专业技术团队提供免费代测服务及售后指导。所以生物试剂产品用于科研实验领域,如有需要请直接来电或给我们留言(半个工作日内给您回复)。

欢迎来电索取产品报价,产品说明书,润裕生物品质服务,真诚相伴!

主要成分:酶标板,试剂,标准品等

性状:盒装液体

ELISA试剂盒实验标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

ELISA试剂盒种属齐全:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

产品运输方面:部分现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货

2、检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。

3、服务承诺:工作时间内免费技术咨询和指导,提供来样检测及免费代测服务,保证实验结果的有效性。

4、研究领域:炎症研究、神经生物学、肿瘤研究、新陈代谢、信号通路、免疫学、传染病、其他研究。

如果牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒所检测的样本不是连续的,所以实验中不用的板条立即放回包装中,密闭封口,4℃可保存1个 月。其余不用试剂应包装好或盖好。在做样本检测前要有一个完整的计划,如标本编号、所测项目、目的等。操作时尽量使用一次性的吸头,避免交叉污染。

主要分为以下系列:

1、细胞因子检测试剂盒

2、内分泌检测试剂盒

3、肝纤维化检测试剂盒

4、心肌梗塞检测试剂盒

5、肿瘤标志物检测试剂盒

6、自身免疫检测试剂盒

7、优生优育检测试剂盒

8、传染病检测试剂盒等等。

牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒操作步骤

方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为110μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)

2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)

3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml37℃孵育0.51小时,洗涤。

4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml371030分钟。

5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml

6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O·D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O·D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。

方法二 用于检测未知抗体的间接法:

用包被缓冲液将已知抗原稀释至110μg/ml,每孔加0.1ml4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的456

牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒注意事项

1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

2. 在牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒实验中,选择好各项ELISA实验条件是很重要的,其中包括:

(1) 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

(2) 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH9.09.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用41824小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.11.010μg/ml)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为110μg/ml

(3) 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

(4) 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(OPD)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMBABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

凡购牛溶菌酶LysozymeELISA试剂盒等润裕生物ELISA试剂盒,标准品等试剂产品,公司专业技术团队全程提供免费技术支持与指导,只需来样即可为您免费代测,可测定血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量或者活性表达。润裕生物专业为您提供ELISA试剂盒价格,规格,用途,说明书等操作说明详情可来电咨询,欢迎订购。

该公司产品分类: 其他ELISA试剂盒 犬ELISA试剂盒 猪ELISA试剂盒 猴ELISA试剂盒 植物ELISA试剂盒 鸡ELISA试剂盒 牛ELISA试剂盒 小鼠ELISA试剂盒 大鼠ELISA试剂盒 人ELISA试剂盒 ELISA试剂盒

人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书

   人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书英文缩写:XCR1Elisa kit ,规格:96T/48T ,产品别名:人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA定量检测试剂盒,人XC趋化因子受体1(XCR1)酶联免疫试剂盒.于测定血清、血浆、组织和相关液体样本中的含量或者活性,规格96T/48T,存储条件:2-8℃,有效期:6个月

人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书等ELISA检测试剂盒基本属性:特异性:本ELISA检测试剂盒可同时检测天然或重组的,且与其他相关蛋白无交叉反应。检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。适用范围:此试剂盒仅用于科研实验,禁用于临床      96T使用方法:96T ELISA检测试剂盒可用作标本90个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本94个,标准对照2个。48T使用方法:48T ELISA检测试剂盒可用作标本46个,标准曲线6个或者用本公司产品作标本47个,标准对照1个。ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。

人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书等上海心语生物科技有限公司elisa检测试剂盒试剂盒优点多多,更加方便我们的科研学者进行科学实验,是科研实验的最佳伙伴。  (1)、高效、灵敏、特异的抗体;  (2)、稳定的重复性和可靠性;  (3)、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;  (4)、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;  (5)、节省实验经费。

人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书等上海心语生物科技有限公司ELISA检测试剂盒技术原理:   (1). 抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。   (2). 结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。   (3). 酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。   (4). 受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。   (5). 此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。   (6). 加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术

人XC趋化因子受体1(XCR1)Eelisa试剂盒说明书相关ELISA试剂盒产品热销中,欢迎广大新老用户前来咨询:

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Rat Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit 英文名称:大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ( PPAR-γ)ELISA Kit 规格:96T/48T

Rat Cyclosporine A,CsA ELISA Kit 英文名称:大鼠环孢素A(CsA)ELISA Kit 规格:96T/48T

Rat high sensitivity C-Reactive Protein,hs-CRP ELISA Kit 英文名称:大鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA Kit 规格:96T/48T

Rat β2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M,β2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit 英文名称:大鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA Kit 规格:96T/48T

Rat Endometrium Antibody,EMAb ELISA Kit 英文名称:大鼠抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA Kit 规格:96T/48T

Rat LDL-IC ELISA Kit 英文名称:大鼠低密度脂蛋白免疫复合物(LDL-IC)ELISA Kit 规格:96T/48T

该公司产品分类: 马ELISA试剂盒说明书 标准品 生化试剂 培养基相关试剂 淋巴细胞分离液及分离试剂盒 RBITC 荧光标记抗体 FITC荧光标记抗体 纯化抗体 封闭用血清 免疫血清 HRP 标记抗体 免疫球蛋白抗原 生物试剂 犬elisa试剂盒说明书 鸡elisa试剂盒说明书 牛ELISA试剂盒说明书 兔ELISA试剂盒说明书 猪ELISA检测试剂盒说明书 小鼠ELISA试剂盒说明书 大鼠ELISA试剂盒说明书

人多巴胺DopamineELISA试剂盒价格

人多巴胺Dopamineelisa试剂盒价格 

英文名称:Human dopamine DopamineELISA kit

规格:48T/96T

特点:专一性强。灵敏度高,样品易保存,结果易观察,可以定量测定,可以大规模测定样品,仪器和试剂简单。

 

 

人多巴胺DopamineELISA试剂盒价格  优点

一、高效、灵敏、特异的抗体;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型。

 

 

人多巴胺DopamineELISA试剂盒价格  使用方法:

1、 血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。

2、 血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。

3、 细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4、 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。5、 保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

 

 

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BIM大鼠20-HETEELISA试剂盒

  

 BIM大鼠20-HETEELISA试剂盒

 

 

本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠20-HETE()的含量。

有效期:6个月

保存条件:2-8℃

本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断

工作原理 

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包大鼠20-HETE()捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠20-HETE()呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

 

样本处理及要求

1.  血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.  血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

3.  组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。

4.  细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。注:标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

标本处理

1.  本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。

2.  实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。

3.  若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。

4.  使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。

5.  若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。

6.  某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。

7.  建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。

 

需要而未提供的试剂和器材

1. 酶标仪(450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒温箱

4. 蒸馏水或去离子水

 

试剂盒组成

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

8孔×12

8孔×6

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

1.  标准品浓度依次为:1600、800、400、200、100、0 pg/mL

2.  经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

 注意事项

注意事项

1. 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。

2. 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。

3. 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。

4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。

5. 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。

6. 在储存和温育时避免强光直接照射。

7. 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。

8. 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。

9. 不能使用过期产品。

10. 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置

 

试剂准备

试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

 

操作步骤

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.  样本孔待测样本50μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

实验结果计算

所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程将样品的OD值代入方程,计算出样品浓度

 

试剂盒性能

1.  检测范围50 pg/mL  1600 pg/mL

2.  灵敏度:最低检测浓度小于10 pg/mL

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 

 

说明

1.  由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。

2.  最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。

3.  不同批次的同一产品可能会有少许差别,如:检测限、灵敏度以及显色时间等,请依据试剂盒内说明书进行实验操作,网站电子版说明书仅作参考。

4.  只有全部使用本试剂盒配套试剂才能保证检测效果,不能混用其他制造商的产品。只有严格遵守本试剂盒的实验说明才会得到最佳的检测结果。

 常见问题

问题解答

若实验效果不好,请及时对显色结果拍照,保留所用板条及未使用试剂,并妥善保存,然后联系我公司技术支持为您解决问题。同时您也可以参考以下资料:

问题

可能原因

解决方案

标准曲线差

吸取及洗涤不充分

充分的吸取及洗涤

移液不精确

检查和校正移液器

精密度低

洗涤不充分

按说明书要求充分洗涤和浸泡

混匀不充分和吸取试剂不足

充分混匀和吸取试剂

重复利用吸头、容器和覆膜

使用加样器要更换新的吸头、使用新的容器和覆膜

加样不精确

检查和校正移液器

O.D值低

每孔加的试剂量不精确

校正移液器,精确加入试剂

温育时间不正确

保证充足的温育时间

温育温度不正确

试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度

酶标记物或底物失效

通过混合酶标记物和底物,颜色应迅速显现来检查

没有加入终止液

按照说明书实验操作步骤加入终止液

超出读数时间读数

在说明书推荐的读数时间内读数

样本值

不正确的样本储存方式

正确储存样本,使用新鲜样本进行实验

不正确的样本收集和处理方法

采取正确的样本收集和处理方法

待测物质在样本中含量低

使用新鲜样本,重复实验

 

该公司产品分类: 谷胱甘肽系列 辅酶Ⅱ系列 辅酶Ⅰ系列 生化试剂盒 酶联免疫学类 生化学类 分子学类 代理品牌 GIBCO原装 缓冲试剂 表面活性试剂 维生素试剂 色素试剂 碳水化合物试剂 植物激素及核酸试剂 蛋白质试剂 蛋白质试剂 酶试剂 sigma标准品 其他生化试剂

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