高GC纳米PCR试剂盒首选上海沪峥
产品目录号:NHS21-5
高GC纳米PCR试剂盒产品说明:本试剂盒既适用于高GC序列的扩增,也适用于一般PCR扩增。产品定位于解决目前市场上难于扩增的若干PCR反应。纳米PCR是纳米材料辅助的基因扩增技术,研究表明某些纳米材料可以增强基因扩增的总体效率。
高GC纳米PCR试剂盒25ul/250次 配置如下:
2×NanoPCR buffer 11-1 (1000ul);
2×NanoPCR buffer 11-2 (1000ul);
2×NanoPCR buffer 11-3 (1000ul);
dNTPs (2.5mM)(300ul);
MgCl2 (25 mM) (500ul);
Taq DNA polymerase (5 U/ul) (60ul)
使用建议:
I) 纳米材料容易聚集,每次使用前请震荡均匀再使用。PCR产物中含有的纳米材料一般不影响电泳等后续操作。
II) 一个典型的PCR反应(举例:扩增一个高GC片段780bp)设计如下:
| 12ul反应 | 25ul反应 |
2×NanoPCR buffer-11 | 6.0 ul | 12.0ul |
dNTPs (2.5 mM) | 1.0 ul | 2.0ul |
MgCl2 (25 mM) | 1.2 ul | 2.5ul |
Primer 1(2 uM) | 0.8 ul | 1.6ul |
Primer 2(2 uM) | 0.8 ul | 1.6ul |
Template DNA (~10 ng/ul) | 0.2 ul | 0.4ul |
Taq DNA polymerase (5 U/ul) | 0.2 ul | 0.4ul |
ddH2O | 1.8 ul | 4.5ul |
PCR程序举例:[94℃-5min];[94℃-30s,56℃-30s,72℃-40s]×35 cycles(循环数可按照PCR产物的多少适当调节);[72℃-5min]. 如果不确定最佳退火温度,可以先做梯度PCR确定最佳退火温度。
III) 批量PCR需要计算并规划好实验中所需要混合的mix总量以及需要单独加入PCR体系中的成分和加量。例:做以不同基因组为模板的9管12ul体系的PCR。计入加样损耗,按10管加量计算。试验操作全过程建议在冰盒上进行。
| 12ul反应 |
|
2×NanoPCR buffer-11 | 6.0 ul | ×10=60 |
dNTPs (2.5 mM) | 1.0 ul | ×10=6 |
MgCl2 (25 mM) | 1.2 ul | ×10=12 |
Primer 1(2 uM) | 0.8 ul | ×10=8 |
Primer 2(2 uM) | 0.8 ul | ×10=8 |
Template DNA (~10 ng/ul) | 0.2 ul | 单独添加 |
Taq DNA polymerase (5 U/ul) | 0.2 ul | ×10=2 |
ddH2O | 1.8 ul | ×10=18 |
按照上表所描述的将mix做好,并反复摇晃15-20下、上下振荡后离心(大约待离心机转到7000rpm随即停下来就好),离心后,用枪头分别加入相应基因组0.2ul的PCR管内,每管11.8ul并用枪头顺便混合3下使均匀。放入PCR仪进行PCR。
实验举例1:扩增以人类基因组为模板的38对序列引物。该38对高GC扩增产物GC>60%,大小均在700-800bp左右。38对退火温度基本一致。使用上述12ul扩增体系, 使用NanoPCR试剂盒进行扩增的图片如图1所示。
图1 使用NanoPCR试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片
Marker为λ/Hind Ⅲ.
图2 使用国外某公司高GC试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片
图3 使用国内某公司高GC试剂盒扩增人类基因组38对引物的电泳图片
参考文献:
Haikuo Li etal. Nanoparticle PCR: Nanogold-assisted PCR with enhanced specificity. Angew. Chem. Int. Ed. 2005, 44(32):5100-3
Zhizhou Zhang et al. Aqueous suspension of carbon nanopowder enhances the efficiency of polymerase chain reaction. Nanotechnology, 18 (2007) 355706
Zhizhou Zhang et al. Aqueous suspension of carbon nanotubes enhances the efficiency of long PCR. 2008, Biotechniques, 44(4):537-545
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保质期:12个月
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QQ:869248833 Tel:021-20421762/18916004157本制品适合于ABI PRISM 7000/7700/7900HT/7300/7500 Real-Time PCR System、7500 Fast Real-Time PCR System、LightCycler(Roche Diagnostics)等各种机种的Real Time PCR扩增仪。
详情请见说明书
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【英语名称】:Methylamp MS-qPCR Fast Kit (100 reactions)
【中文名称】:快速MS-qPCR试剂盒(100次反应)
【产品类型】:细胞分析试剂盒【供应商】:Epigentek
【产品货号】:P-1028-100
【产品规格】:100次样本
Epigentek
【背景资料】:Methylamp的快速MS-qPCR试剂盒提供了一整套试剂和方法,来进行甲基化特异定量PCR,操作简便快捷,灵敏度高,可重复利用.本试剂盒适用于使用痕量的DNA进行快速甲基化特异性定量PCR.试剂盒中新型的热启动DNA聚合酶可以减少MS-qPCR所需的循环数,使实验过程从近2.5小时缩短到不超过70分钟.试剂盒通过提高引物-亚硫酸氢盐 DNA模板间的退火效率来提高了MS-qPCR的灵敏度和特异性,省时高效.
【保存建议】:请在您收到Epigentek的快速MS-qPCR试剂盒(100次反应)产品后,参考说明书建议,使用不同的保存条件或温度来保存试剂盒内组分.
【产品说明】:点击:快速MS-qPCR试剂盒(100次反应)查看更详细产品说明,更多应用、储存、价格、货期等信息请致电400-6800-868垂询Epigentek中国区域授权总代理艾美捷科技有限公司。
Epigentek集团公司是全球领先的创新技术和表观遗传学相关研究产品的开发商和供应商.公司开发了包括400多个专利产品的全面的产品组合,为表观遗传学方面的研究和新药研发提供全面系统的解决方案.作为多家知名品牌的代理,艾美捷与Epigentek一起为研究者们提供最好、最新的表观遗传学研究工具而不断扩大产品及服务质量.
产品名称:TQ2600-01 动物组织直接PCR试剂盒 Omega试剂盒价格 北京
供 货 商:北京方程生物科技有限公司 ELISA试剂盒免费待检测
产品商标:Omega
10mM dNTPs | |
TQAC135 | dNTP solution,10mM(4x250ul) |
TQAC136 | dNTP solution,25mM(4x250ul) |
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