
产品介绍
Fluorescein PHA-E是将从菜豆(Phaseolus vulgaris)种子中天然提取纯化的菜豆凝集素E,与异硫氰酸荧光素(FITC)通过经典异硫氰酸酯偶联工艺制备而成的糖链特异性绿光通道标记科研试剂。它完整保留了菜豆凝集素E对复杂型N-聚糖中β1-6分支结构的高亲和力识别特性,依托荧光素染料成熟稳定的亮绿色荧光性能,兼具高亮度与全实验室设备通用的适配性,全程严格控制偶联反应的FITC与蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离荧光素,解决了早期荧光标记凝集素过度标记导致活性丢失、背景偏高的痛点。试剂为黄绿色至橙黄色冻干粉,在中性生理缓冲液中溶解分散性,是几乎所有常规生物实验室开展菜豆凝集素靶向糖链研究的入门级标杆工具。
基础参数
中文名称:荧光素标记菜豆凝集素E,FITC-外源凝集素(菜豆)
英文名称:Fluorescein PHA-E,FITC-PHA-E,Fluorescein-PHA-E,Fluorescein-Phaseolus vulgaris lectin E
外观状态:黄绿色至橙黄色冻干粉
荧光光谱参数:最大激发波长约495 nm,发射波长约519 nm,完全适配常规FITC/GFP荧光滤光片组
储存条件:-20℃避光密封干燥长期保存,避免反复冻融;复溶后建议分装为单次使用量,4℃避光短期可稳定存放,操作全程严格避光,同时注意缓冲液pH需维持在7.2-8.0区间,pH过低会导致荧光素荧光强度大幅下降
用途:复杂型N-聚糖绿光通道荧光标记,常规荧光显微镜成像,流式细胞术基础检测,教学实验演示
作用机理
Fluorescein PHA-E中的菜豆凝集素E蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中带有β1-6分支结构的复杂型N-聚糖,对该类特征糖基化修饰具有高选择性。FITC荧光基团通过稳定的异硫脲键锚定在PHA-E亚基表面的赖氨酸残基上,标记位点远离蛋白核心糖结合口袋,偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在495nm波长激发下,偶联在蛋白上的荧光素基团可发射出明亮的519nm亮绿色荧光,该波段是全球生物实验室普及率最高的荧光通道,从普通正置荧光显微镜到共聚焦、流式细胞仪均标配对应激发与检测模块,无需任何设备升级即可完成靶标糖链的原位标记观察。
核心产品优势
Fluorescein PHA-E的核心差异化优势集中在全场景通用的高适配性综合表现上,相比其他波段标记的同类凝集素,荧光素标记的绿光通道是所有生物荧光设备中普及度最高的通道,几乎不存在设备适配障碍,同时荧光素的荧光信号亮度高,在常规实验条件下肉眼即可在显微镜下直接观察到清晰信号。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离FITC残留低于1%,非特异性吸附极低,同时其制备工艺成熟、批次间性能高度一致、成本友好,非常适合用于大样本量筛选与基础教学实验,是常规生物实验室开展复杂型N-聚糖研究的入门级标杆工具。
应用领域
Fluorescein PHA-E可用于细胞样本糖链快速成像,依托其亮绿色荧光特性,在普通荧光显微镜下快速观察大量细胞样本中靶标糖链的表达与亚细胞分布情况,完成大批次样本的初筛分类。该试剂可应用于流式细胞术基础分析,作为绿光通道探针标记细胞群体中靶标糖链高表达的亚群,配合其他通道探针完成简单的多参数流式检测。同时它也适用于教学实验演示,作为经典荧光标记凝集素试剂在本科与研究生实验教学中展示凝集素-糖链的特异性识别现象,帮助学生直观理解糖生物学基础原理,为糖生物学相关非医疗方向研究提供高普及度的经典入门工具。

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