碱性磷酸酶染液Cell Alkaline Phosphatase

碱性磷酸酶染液说明书

（Cell Alkaline Phosphatase Stain）

碱性磷酸酶染液【检验原理】

细胞中碱性磷酸酶（cAKP）在碱性的缓冲液中，催化底物水解，生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联，成不溶性的偶氮染料，沉着于有cAKP活性的部位。适用于血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以石蜡切片脱蜡梯度入水后。

碱性磷酸酶染液【试剂组成】

可染 20～30 张涂片

本所附赠疏水膜1张。

碱性磷酸酶染液【储存条件及有效期】

本试剂盒应置室温密封保存，有效期6个月。

【试剂配制】

〇 底物应用液的配制：临用时将 1 支乙粉剂倒入 1 支甲溶剂中，用微量移液器取少许液体打入小离心管中，反复颠倒离心管，再用微量移液器将离心管中的液体转移到瓶中，如此反复2～3次，使二者充分混合，完全溶解后才可加入1支丙粉剂，再充分摇动使其完全溶解，配成底物应用液待用。底物应用液要新鲜配制，用多少配多少。

【操作步骤】

① 固定：新鲜血涂片、骨髓涂片、细胞涂片或爬片、冰冻切片以及石蜡切片用固定液固定3 min左右。 （石蜡切片脱蜡梯度入水后不需固定） ② 加底物应用液：固定后的样本，滴加新鲜配制的底物应用液盖满样本部分，加盖疏水膜，放置湿盒中，避光37℃孵育 15min，水洗。（此时覆盖在样本上的疏水膜会遇水掉下） ③ 复染：趁湿用复染液(苏【染色结果】

碱性磷酸酶染液血涂片及骨髓涂片的观察： 选涂片中厚薄均匀的部位滴加香柏油用油镜检查，灯光适中。细胞核呈紫色， cAKP阳性者胞浆中出现红至红棕色颗粒，有些为棕褐色或咖啡色颗粒，其强度可按Kaplow记分法表示。

0 胞浆内无红色或无咖啡色；

1 弥散的红色并偶见红色或咖啡色颗粒；

2 弥散的红色，有中等量的红棕色颗粒；

3 显著的红色，有较多的红棕色或咖啡色颗粒；

4 显著的红色并有粗大的红棕色或咖啡色、深咖啡色颗粒充满胞浆。 木素或者甲基绿，两者取其一)染3min左右。水洗，镜检。