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小鼠热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA样本收集

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上传时间：2014/9/26 9:00:25

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上传者：北京杰辉博高生物科技有限公司

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小鼠热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）ELISA样本收集

本试剂仅供研究使用
目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）水平。用纯化的小鼠热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96），再与HRP标记的热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠热休克蛋白糖蛋白96（HSP gp96）浓度。
样本处理及要求：
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。