克氏锥虫寡核甘酸色谱层析检测条克氏锥虫检测条产品名称 | 中文名称 | 克氏锥虫寡核甘酸色谱层析检测条 |
| 英文名称 | T. cruzi OligoC-Test |
| 产品货号 | C-3404 |
| 产品规格 | 20T |
| 检测样本 | 血清 |
| 适应物种 | 人 |
| 预期用途 | 检测血清的克氏锥虫(详细操作看说明书)仅用于科研使用 |
| 产品品牌 | 比利时Coris |
| 供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
克氏锥虫检测条检测原理该实验对克氏锥虫的DNA序列进行扩增,使用胶体微粒和寡核苷酸探针进行寡核苷酸层析法检测。
分子扩增是通过现成的混合物,包含了内部质控的模板(IC),质控模板的扩增使用的底物与克氏锥虫目标区域DNA是一致的,不过包含了一个特殊内置序列,该序列可以被质控探针检测到。聚合酶和DNA模板都必须增加到混合物中。
当DNA扩增完成了,内部质控和克氏锥虫扩增物就会与缓冲溶液混合,然后检测条(Oligo-strip)插进溶液中,扩增物与金色特异性探针位于检测条(Oligo-strip)底部。扩增物在毛细管作用下各自向质控和锥体虫捕获区域聚集,如果相符合的扩增物出现,那么粉红色或者紫色带就会在捕获区域形成。过剩的金色探针与补充探针杂交涂布在卡片两面的的顶部作为一个质控移动。
克氏锥虫检测条成分每个克氏锥虫寡核苷酸层析法检测盒子都包含一个小盒子,一旦收到就应该存放在-20°C。
A.克氏锥虫扩增-试剂(小盒子),保存在-20°C。
1.克氏锥虫扩增-混合物(蓝帽,SUL-3804,两瓶C-3404,一瓶C-3704),存放在-20°C的预PCR的地方每个混合物包含了引物,dNTPs,缓冲液和内部质控模板。
避免对克氏锥虫扩增-混合物反复冻融超过两次,否则会降低灵敏度。如果需要多次试验,克氏锥虫扩增-混合物应分装放置在-20°C保存。即使混合物会与其他试剂放置室温下,但接收时应该放在到-20°C。克氏锥虫扩增-混合物包含了dUTP,遗留污染可以通过尿嘧啶-DNA糖基化酶进行清除。
2.克氏锥虫扩增-质控(一瓶,BUL-4004),保存在-20°C。
克氏锥虫扩增-质控是作为克氏锥虫扩增-混合物一个阳性质控。它以干燥的形式放置在一个螺旋盖瓶里。一旦接收就保存在-20°C,单独放置。(看步骤VII.B.)
B.克氏锥虫寡核苷酸层析法检测(大盒子),保存在室温下(4°C-30°C)。
1.克氏锥虫寡核苷酸层析法检测条(分别包装,SUL-3204,用于C-3404的20条卡片,用于C-3704的10条卡片),保存在室温下(4°C-30°C)每张克氏锥虫寡核苷酸层析法检测条两面都有感应的,捕获试剂在硝化纤维底部。上部的硝化纤维也可以感应(两面),作为一个寡核苷酸探针的补充。第二条感应线是作为移动质控线。
探针偶联物是由寡核苷酸结合金色胶粒组成的。这些探针偶联物是干燥的,位于卡片的底部。
卡片的两面是不同的(蓝色的面“T. cruzi”,是克氏锥虫检测面,绿色面“Internal control”是质控面)。克氏锥虫寡核苷酸层析法检测条每个袋子有一个干燥剂,保存在室温下(4-30°C)。
2.配有塞子的实验管(20),保存在PCR的环境中
3.缓冲液(2ml一瓶,SUL-3702),保存在室温下(4°C - 30°C)PCR环境中。
用于寡核苷酸检测的缓冲液包含了NaN3(防腐剂),保存在室温下。
4.说明书
克氏锥虫检测所需材料(试剂盒未提供)■移液管
■0.2ml或者0.5mlPCR反应试管
■变温箱
■矿物油(如果变温箱没有加热板)
■用于离心机上2ml的试管
■热反应的DNA聚合酶(5U/ul)
■一次性的手套。
■用于干加热机(或者水浴锅)13mm直径的试管。
■PCR级别的水克氏锥虫检测条检测步骤1.将40ul已预热的缓冲液加入到已预热的试管底部并放置到加热器里。
2.使用移液管加入40ul的PCR产物并替换实验管放置在加热器里
3.直接将检测条浸泡到实验管里并用塞子塞紧实验管。
4.在加热器上55°C温育5分钟。
5.在检测条依然湿润时查看结果,因为当检测条干燥时会出现一些背景线条。
6.溶剂在检测条上移动完后不要打开实验管,避免遗留污染物,在分析结果之后丢弃实验管和 检测条。克氏锥虫检测条产品性能检测限
纯DNA
1 fg/T (相当于0.005寄生虫/PCR)
血液寄生虫
每180ul血液1个寄生虫
灵敏度
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