人载脂蛋白B100检测试剂盒(日本原装进口)
(日本IBL 27181)
简介
即使脂类(如脂肪与胆固醇)不能溶于水,但是载脂蛋白即载体蛋白与脂类结合形成的脂蛋白颗粒可溶于水,可通过水性循环(如血液,淋巴液);载脂蛋白根据形式和功能分类,有6个主要类型,若干亚型;载脂蛋白B(ApoB)是LDL主要的载脂蛋白,可反映出血液中LDL水平的改变;载脂蛋白B有两种类型,一种是ApoB100,与胆固醇水平相关,释放LDL和VLDL;另外一个是ApoB48,归类于乳糜颗粒,与甘油三酯相关
通常血液中检测的ApoB浓度是ApoB100和ApoB48 的总浓度,此试剂盒采用的ApoB100抗体只能识别血浆样本中的ApoB100,不能识别ApoB48;高灵敏度夹心酶免法还可检测细胞上清或各种分馏脂蛋白样本
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的elisa试剂盒,使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂,最终溶液所显示的颜色强度与样品中ApoB100的量成正比
检测范围
0.13-8.4 ug/ml
预期用途
仅用于研究,不能用于诊断
1. 此试剂盒可用于血清,EDTA-血浆,和细胞上清中人ApoB100的定量检测
2. 血清和血浆样本的稀释比例500倍以上,用缓冲液稀释,但是最佳的稀释比例视各实验室情况而定
试剂盒组成
1. 包被板,96孔,包被了抗人ApoB100兔IgG亲和纯化
2. 标记抗体,浓缩,0.4ml x1,30倍浓缩,HRP标记的抗人ApoB100(35B1)小鼠IgG Fab’亲和纯化
3. 标准品,0.5ml x2 ,人ApoB100
4. EIA缓冲液,50ml x 1, 含1% BSA, 0.05% 吐温20 的 PBS
5. 标记抗体稀释液,12ml x 1,含1% BSA, 0.05% 吐温20 的 PBS
6. 显色剂,15ml x 1,TMB
7. 终止液,12ml x 1,1N的硫酸
8. 洗涤缓冲液,50ml x 1,40倍浓缩,含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
操作步骤
1. 实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪(450nm)
2. 移液器和枪头
3. 带刻度的量筒和烧杯
4. 去离子水
5. 冰箱(4℃)
6. 坐标纸(对数/对数)
7. 吸水纸
8. 标准品稀释试管
9. 孵箱(37±1℃)
10. 洗瓶
11. 一次性试管
2. 准备
1. 洗涤缓冲液制备:先将洗涤浓缩液平衡至室温,充分混匀,然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀,即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内,并于2周内用完
2. 标记抗体的制备:用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍,即得。
例:如果只测一条板,8孔,则需要标记抗体800ul(30ul的标记抗体+870ul的标记抗体稀释液,混匀,使用时每孔加100ul)
此步骤在实验开始前完成