谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(比色法)
【产品名称】
通用名称:谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(比色法)
英文名称:Glutathione Peroxidase Assay
【产品规格】
96T
【预期用途】
用于定量检测组织匀浆、细胞融解产物、血浆以及红细胞融解产物中谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
【前言简介】
谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)催化氢过氧化物的还原反应(包括过氧化氢),通过还原型谷胱甘肽以及中和反应来保护细胞免受氧化性损伤。除了磷脂氢过氧化物GPx是单体外,其他的GPx都是四聚体,由四个相同的单位组成,每个活性单位带有一个硒代半胱氨酸(其作用是直接参与过氧化物的双电子还原)。这种酶使用谷胱甘肽作为最终的给电子体以再生还原性的硒代半胱氨酸。
【检测原理】
试剂盒直接通过一个与谷胱甘肽还原酶(GR)的耦合反应来检测GPx的活性。GPx还原过氧化物产生氧化性的谷胱甘肽(GSSG),然后通过与GR以及NADPH反应返回到还原态。
NADPH被氧化成ANDP+会连带出现340nm波长下吸光度的减少。在GPx活性被限制速率的条件下,340nm下的吸光值减小速率与GPx的活性成正比。
【试剂盒组成成分】
微孔板 12×8
分析缓冲液 2ml
10倍浓缩
样品缓冲液 2ml
10倍浓缩
质控品 1瓶
含牛红细胞GPx
GPx基材混合物 3瓶
含NADPH、谷胱甘肽以及谷胱甘肽还原酶的冻干粉。
GPx氢过氧化枯烯 1瓶
粘性盖板 1片
所需材料(未提供)
1. 340nm吸光度酶标仪
2. 移液器
3. 高效液相级纯净水
【储存条件】
试剂盒-20℃下保存,效期内有效
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【参考文献】
1. Ursini, F., Maiorino, M., and Gregolin, C. The selenoenzyme phospholipid
hydroperoxide glutathione peroxidase. Biochim. Biophys. Acta 839, 62⁻⁷0 (1985).
2. Forstrom, J.W., Zakowski, J.J., and Tappel, A.L. Identification of the catalytic site of rat liver glutathione peroxidase as selenocysteine. Biochemistry 17, 2639-2644 (1978).
3. Paglia, D.E. and Valentine, W.N. Studies on the quantitative and qualitativecharacterization of erythrocyte glutathione peroxidase. J. Lab. Clin. Med. 70, 158-169(1967).