人转化生长因子-β1定量检测试剂盒
(96人份/48人份)
【原理】
本试剂盒全称为转化生长因子-β1人ELISA检测试剂盒(定量),此试剂盒采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人TGF-β1单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的人TGF-β1与单抗结合,加入生物素化的抗人TGF-β1抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入酶底物TMB,出现蓝色,加终止液硫酸,颜色变黄,在450nm处测OD值,人TGF-β1浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人TGF-β1浓度。
【试剂盒组成】
1. 酶标板:一块(96孔/48孔),已包被抗人TGF-β1单抗。
2. 样品稀释液:五瓶/三瓶(10ml/瓶)
3. 第一抗体工作液:一瓶(5.5ml/2.7ml)
4. 酶标抗体工作液:一瓶(10.5ml/5.5ml)
5. 底物液:二瓶/一瓶(5.5ml)
6. 终止液:一瓶(6ml/3ml)
7. 洗涤液(20 x):一瓶(50ml/25ml)
8. 标准品(冻干粉,4000 pg/ml):二管/一管
9. 坐标纸:一张
10. 封板纸:一张
【样品的准备和保存】
样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存,且避免反复冻融。
1. 血清:用干净试管收集血液,室温凝固30分钟,离心1000×g 15分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
2. 血浆:采用EDTA抗凝,抽血后30分钟内离心1000×g 15分钟。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
3. 细胞培养、组织匀浆、体液:离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
【标本激活方法】
1. 将450ul样品稀释液加入到一支1.5ml进口聚丙烯管中,再加10ul待测标本。
2. 加20ul 1 N HCL,盖紧,上下混匀。2-8℃放置60±2分钟。
3. 加20ul 1 N NaOH,盖紧,上下混匀。
4. 即用,或放-20/⁻⁷0℃保存3天。计算结果时乘以稀释倍数。(注意:不同的标本TGF-β1的水平可能有较大差异,请根据实际情况灵活掌握稀释度)
【试剂的准备】1. 标准品液配制:使用每管中加入蒸馏水400ul溶解后即可。
2. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释
【贮存】
转化生长因子-β1人ELISA检测试剂盒(定量),本试剂盒宜置2~8℃冷藏,可保存半年。试剂盒开封后请短期内做完。