人白介素-6定量检测试剂盒
(96人份/48人份)
【原理】
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人IL-6单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的人IL-6与单抗结合,加入生物素化的抗人IL-6抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入酶底物OPD,出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,在492nm处测OD值,人IL-6浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中人IL-6浓度。
【试剂盒组成】
1. 酶标板:一块(96孔/48孔),已包被抗人IL-6单抗。
2. 样品稀释液:一瓶(5ml)
3. 第一抗体工作液:一瓶(5.5ml/2.7ml)
4. 酶标抗体工作液:一瓶(10.5ml/5.5ml)
5. 底物稀释液:一瓶(15ml/10.5ml)
6. 终止液:一瓶(6ml/3ml)
7. 洗涤液(20 x):一瓶(50ml/25ml)
8. 标准品(冻干粉,2000 pg/ml):二管/一管
9. OPD片:三片/二片
10. 坐标纸:一张
11. 封板纸:一张
【样品的准备和保存】
样品如果不立即分析,应分装后冷冻保存,且避免反复冻融。
1. 血清:用干净试管收集血液,室温凝固30分钟,离心1000×g 15分钟,收集血清。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
2. 血浆:采用EDTA抗凝,抽血后30分钟内离心1000×g 15分钟。立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
3. 细胞培养、组织匀浆、体液:离心去除沉淀,立即分析或分装后-20℃冷冻保存。
【试剂的准备】
1. 标准品液配制:使用前每管中加入蒸馏水400ul溶解后即可。
2. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释
底物工作液配制:显色前5-10分钟将OPD片放入底物稀释液中溶解,每片加液5ml。
检测程序、结果计算(详询)
【临床意义】
1、免疫异常性疾病: 临床表现常见为发热、淋巴结肿大、血沉加快、急性期蛋白增高、高γ球蛋白血症、自身抗体阳性等症状,这些与IL-6的异常表达有密切关系。
2、IL-6与甲状腺疾病: 亚急性甲状腺炎发作期间,患者血中IL-6水平明显升高,当病情缓解后,其浓度则恢复正常。
3、其他: IL-6水平升高还与多种临床疾病有关,如急性慢性炎症,烧伤,移植排斥等。IL-6水平上升多见于急性期蛋白的出现,可作为炎症反应的早期指标。
【性能参数】
灵敏度:最小可测人IL-6达8 pg/ml。
重复性:板内变异系数<10%。
板间变异系数<15%。
深圳市科润达生物工程有限公司
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