人可溶性α–klotho蛋白酶免试剂
（日本IBL 27998）
简介
α–klotho被定义为极端的下调基因，它在转基因小鼠（klotho小鼠）的表现类似于人类衰老的各种症状，α–klotho基因的序列已在多个物种中得到确定，包括人类（基于转基因小鼠），α–klotho蛋白是分子量为130kDa的横跨膜蛋白，并在肾脏和甲状旁腺内表达。
近年来，已证实α–klotho是生物体内矿物质代谢的重要分子，如钙和磷的代谢。因此，有人认为，klotho小鼠的早期老化症状就是因α–klotho的表达减少导致矿物质稳态破坏而引起，与此同时，有报道称，组成α–klotho蛋白序列的主要部分：长N-端胞外域，因脱落释放至血液中。然而对于可溶性α–klotho蛋白的功能和浓度的变化仍存在很多疑问，所以要求研发一套α–klotho的检测系统
实验原理
此试剂盒根据酶免法的夹心原理，利用两种不同的高特异性抗体，TMB作为着色剂，颜色强度与人可溶性α–klotho的量成正比
检测范围
93.75~6000pg/mL
预期用途
此试剂盒可用于血清，血浆和尿液中人可溶性α–klotho的定量检测
试剂盒组成
1. 包被板，96孔，包被有抗人可溶性α–klotho（67G3）小鼠IgG单抗，亲和纯化
2. 标记抗体浓缩，30X，0.4mlx1，HRP标记的抗人可溶性α–klotho小鼠IgG Fab’，亲和纯化
3. 标准品，0.5mlx2，重组人可溶性α–klotho
4. EIA缓冲液，30mlx1
5. 标记抗体稀释液，12mlx1,1%BSA，含0.05%吐温20的PBS
6. 着色剂，15mlx1，TMB底物液
7. 终止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗涤缓冲浓缩液，50mlx1, 40X，含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪（450nm）
2. 移液器和枪头
3. 烧杯
4. 蒸馏水
5. 孵箱（37±1℃）
6. 坐标纸（对数-对数）
7. 吸水纸
8. 标准品稀释管
9. 洗瓶
10. 一次性试验管
试剂准备
1. 洗涤缓冲液制备：先将洗涤浓缩液平衡至室温，充分混匀，然后吸取50ml浓缩液与1950ml的去离子水混匀，即得。配制的洗涤液应保存于冰箱内，并于2周内用完
2. 标记抗体的制备：用标记抗体稀释液将标记抗体稀释30倍，即得。
第3年
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