大鼠富亮氨酸α2 糖蛋白（LRG）检测试剂盒
（日本IBL 27770）
简介
富亮氨酸α2 糖蛋白（LRG）是富亮氨酸重复单位家族蛋白的一员，LRG参与蛋白-蛋白间相互作用，信号转导，细胞粘附与发育；近期报道称类风湿关节炎患者血清中的LRG水平与健康质控对比显著升高，经抗TNF治疗后，又会降低；另一报告称特发性正常颅压脑积水患者脑脊液中的LRG水平与质控相比也显著性升高，这一结果可能可以将特发性正常颅压脑积水患者从其他显示类似症状的如老年痴呆患者中区分出来
此试剂盒用于检测大鼠LRG
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的elisa试剂盒，使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，最终溶液所显示的颜色强度与样品中大鼠LRG的量成正比
检测范围
6.25 - 400 ng/mL
预期用途
仅供研究，不能用于诊断
1. 此试剂盒可用于血清，EDTA血浆，尿液，细胞上清中大鼠LRG的定量检测
2. 血清或血浆样本需进行EIA缓冲液4或8倍的稀释，合理的双倍稀释不能检测血液样本中的LRG
3. 尿液样本需进行EIA缓冲液 大约8倍的稀释
试剂盒组成
1. 包被板，96孔，包被了抗大鼠LRG（191）兔IgG亲和纯化
2. 标记抗体，浓缩，0.4ml x1，30倍浓缩，HRP标记的抗大鼠LRG（312）兔IgG Fab’亲和纯化
3. 标准品，0.5ml x2 ,重组大鼠LRG
4. EIA缓冲液，30ml x 1，磷酸缓冲液
5. 标记抗体稀释液，12ml x 1，含1% BSA, 0.05% 吐温20 的 PBS
6. 显色剂，15ml x 1，TMB
7. 终止液，12ml x 1,1N的硫酸
8. 洗涤缓冲液，50ml x 1，40倍浓缩，磷酸缓冲液
操作步骤
1. 实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪（450nm）
2. 移液器和枪头
3. 带刻度的量筒和烧杯
4. 去离子水
5. 冰箱（4℃）
6. 坐标纸（对数/对数）
7. 吸水纸
8. 标准品稀释试管
9. 孵箱（37±1℃）
10. 洗瓶
11. 一次性试管
特别注意
1. 试验样品采集后应立即检测或是冻存，冻存的样品避免反复冻融，检测前应在低温下先将其完全溶解混匀
2. 试验样品用EIA缓冲液稀释
3. 试验样品和标准品应做双份检测
4. 试验样品应在中性PH范围，有机溶剂的污染可能会影响检测
5. 只能用试剂盒提供的洗涤液洗板，不充足或过多的洗涤会导致试验失败
6. 吸水纸上拍干微孔板，不能擦拭
7. TMB底物液应贮存于黑暗处，因其对光敏感，且避免接触金属
8. 加入终止液后30min内必须于酶标仪读数
结果计算
绘制曲线前，所有的数据都应减去试验样品空白值，包括标准品和未知的样品。以标准品的OD值和浓度在对数-对数坐标纸上绘制标准曲线，从标准曲线上可直接读取未知样品的浓度
第3年
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