人半乳糖凝集素-3 检测试剂盒（酶联免疫法）
（Human Galectin-3 Assay Kit）
（日本IBL 27755）
简介
半乳糖凝集素广泛分布于线虫类，昆虫类，多孔动物和脊椎动物及真菌；半乳糖凝集素不仅只出现于细胞质内，细胞核，细胞表面，细胞外基质等都会出现，同时也参与了许多的生物学现象，包括发育，分化，形态发生，肿瘤转移，细胞死亡和RNA剪切
半乳糖凝集素是一种β-半乳糖苷结合蛋白，曾用名有IgE结合蛋白，CBP35, CBP30, Mac-2, L-29, L-31, L-34等，由糖链结合域（半乳糖凝集素域）和非凝集素域组成的嵌合型凝集素结构
半乳糖凝集素生物学功能还未确定，但有许多研究已阐明半乳糖凝集素-3 参与了细胞增殖，黏附，代谢和凋亡；例如，半乳糖凝集素表达与固定细胞株内恶性转变程度呈正相关关系，近期也有研究报道半乳糖凝集素-3表达与恶性肿瘤的恶性程度呈正相关，所以检测半乳糖凝集素-3 可作为肿瘤恶化程度的指标
实验原理
此试剂盒是一种夹心法的elisa试剂盒，使用了两种高特异性的抗体。TMB作为显色剂，显色的强度与人样品中半乳糖凝集素-3的量成正比
检测范围
117.19~7500 pg/ml
预期用途
1. 可用于细胞培养物和临床标本裂解物中人半乳糖凝集素-3的检测（如甲状腺细针抽吸细胞标本）
实例1 ：
吸取适量的试剂盒提供的"EIA 缓冲液"稀释细胞上清，然后用于实验
实例2：
加500 ul的TNE缓冲液（10 mM Tris pH8.0, 1% NP-40, 0.15M NaCl, 1 mM EDTA）或是IBL 货号为19022的IBLysis-Ⅰ（裂解缓冲液）（大致范围：1×105−1×107 cells）至培养细胞或是临床标本，振荡器上充分混匀，4℃下混匀30min，混匀完全后，10000 rpm 下离心10min，然后用试剂盒内提供的“EIA缓冲液”适当稀释（大约5-10倍），用于检测
2. 人半乳糖凝集素-3 与总蛋白成比例，建议溶解后检测总的蛋白（检测总的蛋白采用罗氏蛋白质定量检测法）
3. 若检测细胞，则建议任何时候都应进行细胞计数
4. 若检测血清或血浆中的人半乳糖凝集素-3 ，则建议用试剂盒内提供的“EIA缓冲液”适当稀释（大约4-10倍），用于试验样本
试剂盒组成
1. 包被板，96孔，包被了抗人半乳糖凝集素-3（50A3）小鼠 IgG 单抗
2. 标记抗体0.4ml x1 ,30倍浓缩，HRP标记的抗人半乳糖凝集素-3 （87B5）小鼠 IgG 单抗
3. 标准品，0.5mlx2，重组人半乳糖凝集素-3
4. EIA缓冲液，30mlx1，1% BSA, 0.05% Tween 20 的PBS
5. 标记抗体稀释液，12mlx1，1% BSA, 0.05% Tween 20 的PBS
6. 显色剂，TMB ，15mlx1
7. 终止液，12mlx1,1N的硫酸
8. 浓缩洗涤缓冲液，50mlx1,04倍浓缩，0.05%吐温20 的磷酸缓冲液
实验所需材料但试剂盒未提供
酶标仪（450nm） 移液器和枪头
量筒和烧杯 去离子水
冰箱（4℃） 坐标纸（对数/对数）
吸水纸 试管（用于标准品稀释）
孵箱（37±1℃） 洗瓶（用于洗板）
一次性试管，用于“浓缩标记抗体”和“显色剂”
第3年
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