人硫氧还蛋白酶免试验检测试剂
（日本IBL 27417）
简介
人硫氧还蛋白由105个氨基酸组成，分子量为120道尔顿的蛋白，通过活性位点上两个邻近的半胱氨酸反应来调节体内的氧化还原反应状态。
众所周知，硫氧还蛋白是因应激诱导产生的，如紫外线，辐射，氧化剂和病毒感染，并作为一个生化防御因子抵抗应激力，且有抗氧化作用和调节细胞内信号分子和转录因子的活性。
因此，检测硫氧还蛋白不仅可以检测体内应激状态，还可提高抗逆性研究的进展
实验原理
此试剂盒根据酶免法的夹心原理，利用两种高特异性抗体，TMB作为一种着色剂，颜色的强度与人硫氧还蛋白的量成正比
检测范围：3.91—250ng/ml
预期用途
1. 此试剂盒用于血清，EDTA血浆，尿液和上清中的人硫氧还蛋白的定量检测
2. 以防上清介质中含有FCS，我们建议设置一中阴性质控作为试验样品空白孔
试剂盒组成
1. 预包被板，96孔，抗人硫氧还蛋白小鼠IgG单抗亲和纯化
2. 标记抗体浓缩液，0.4mlx1，,30X，HRP标记抗人硫氧还蛋白兔IgGFab’亲和纯化
3. 标准品，1.0mlx2，重组人硫氧还蛋白
4. EIA缓冲液，30mlx1，1%BSA，含0.05%吐温20的PBS
5. 标记抗体稀释液，12mlx1，1%BSA，含0.05%吐温20的PBS
6. 着色剂，15mlx1，TMB底物液
7. 终止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗涤缓冲浓缩液，50mlx1,40X，含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
实验所需材料但试剂盒未提供
1. 酶标仪
2. 移液器和枪头
3. 烧杯
4. 去离子水
5. 吸水纸
6. 用于稀释标准品的试管
7. 洗瓶
一次性试验管
特别注意
1. 试验样品采集后应立即检测，冻存的样品避免反复冻融，检测前应先将其完全溶解混匀
2. 试验样品用EIA缓冲液稀释
3. 试验样品和标准品应做双份检测
4. 试验样品应在中性PH范围，有机溶剂的污染可能会影响检测
5. 只能用试剂盒提供的洗涤液洗板，否则会导致试验失败
6. 吸水纸上拍干微孔板，不能擦拭
7. TMB底物液应贮存于黑暗处，因其对光敏感，且避免接触金属
8. 加入终止液后30min内必须酶标仪读数
结果计算
绘制曲线前，所有的数据都应减去试验样品空白值，包括标准品和未知的样品。以标准品的OD值和浓度在对数-对数坐标纸上绘制标准曲线，从标准曲线上可直接读取未知样品的浓度
第3年
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